嗜热链球菌KLDS3.1012胞外多糖合成途径的基因组学及表型特征分析

在分子水平上挖掘嗜热链球菌KLDS3.1012合成胞外多糖的途径并且通过表型特征进行验证。首先,基于Illumina HiSeq与Illumina MiSeq测序平台对菌株KLDS3.1012进行基因组测序并构建基因组图谱;随后,从糖代谢、糖核苷酸合成、胞外多糖基因簇等方面进行生物信息学分析;最后,利用API 50CH测定菌株KLDS3.1012的糖发酵情况及采用高效离子交换色谱法测定胞外多糖的单糖组成。生物信息学分析结果表明菌株KLDS3.1012具有半乳糖、葡萄糖、果糖、甘露糖、乳糖和蔗糖转运系统和4 种糖核苷酸（UDP-葡萄糖、dTDP-鼠李糖、UDP-半乳糖和UDP-N-乙酰葡糖胺）合成的相关基因及1 个胞外多糖合成基因簇。表型特征分析结果表明菌株KLDS3.1012可以利用以上6 种碳源并能形成由鼠李糖、半乳糖和葡萄糖组成的胞外多糖。本研究为分析该菌株合成胞外多糖的遗传基础与胞外多糖结构的关系提供理论依据,并对将其开发为发酵剂具有一定指导意义。     

粪便微生物粗提液修复溃疡性结肠炎的研究

研究了粪便微生物粗提液对溃疡性结肠炎修复作用的影响。将64只健康小鼠随机分为4组,即完全空白组（n=20）、肠炎空白组（n=20）、SASP（柳氮硫胺吡啶）组（n=12）和FMT（粪便微生物移植）组（n=12）,处理组小鼠自由饮用3%葡聚糖硫酸钠盐（DSS）溶液8 d,建立溃疡性结肠炎（UC）模型,并于建模第8 d,解剖完全空白组、肠炎空白组小鼠各8只,以验证UC模型是否建立成功。造模后,SASP组、FMT组同时分别给予柳氮硫胺吡啶片及鼠源粪便微生物提取液干预治疗4周,灌胃频率2 d/次,然后进行为期两周的后续观察,期间观察各组小鼠表观状态、体重变化,结肠组织长度变化,结肠组织病理学改变,并测定各组血清IL-1β、IL-6、TNF-α的浓度变化。结果表明:与肠炎空白组小鼠相比,粪便微生物移植疗法使小鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著降低（p<0.05）,并使结肠长度及体重显著增加,结肠组织更加完整。因此证实,粪便微生物提取液对溃疡性结肠炎具有较好的治疗作用,具有应用于临床医学的潜力。      

五株嗜热链球菌抗药性研究

采用药敏纸片法研究了五株高产粘嗜热链球菌（KLDS3.1012、KLDS3.1014、KLDS-SM、KLDS3.0206、KLDS3.0207）对15种抗生素的敏感性,结果发现,KLDS3.1014对两种抗生素有抗性,KLDS3.1012、KLDS-SM、KLDS3.0206对3种抗生素有抗性,KLDS3.0207则表现出多重抗药性。对五株嗜热链球菌耐四环素基因（tet M,tet S,tet L）、耐红霉素基因（erm A,erm B,msr A/B）和耐氯霉素基因（cat）的初步研究表明,四环素耐受基因、红霉素耐受基因以及氯霉素耐受基因不位于基因组DNA上,同时,受试菌株均无质粒,因此可以初步判断受试菌株抗药性不会进行传递。      

基于基因水平研究乳酸乳球菌的有氧呼吸代谢

本研究旨在对能和不能有氧呼吸代谢的乳酸乳球菌呼吸链基因同源性和细胞色素氧化酶活力进行分析,为确定乳酸乳球菌的有氧呼吸必要条件奠定基础。首先,分别测定已筛选到的菌株KLDS4.0325和KLDS4.1102在发酵和有氧呼吸代谢时的生长曲线;其次,提取KLDS4.1102的基因组DNA,随后利用PCR扩增其呼吸链编码基因并进行DNA测序;最后,从Gen Bank数据库下载KLDS4.0325的呼吸链编码基因序列,利用DNAMAN软件比较这两株菌呼吸链编码基因的同源性,并测定这两株菌的细胞色素氧化酶活性。结果表明在有氧呼吸条件下KLDS4.0325的生物量和p H都显著增大,而KLDS4.1102在两种条件下呈现一致的生长趋势,呼吸链编码基因的同源性分析显示KLDS4.1102具备完整的呼吸链,而酶活测定结果却显示KLDS4.1102无细胞色素氧化酶活性,这表明KLDS4.1102不能进行有氧呼吸代谢不是由于编码基因缺陷造成的,可能是某些编码基因不能正常表达,导致其细胞色素氧化酶不能正常发挥作用。     

具有抑制大肠杆菌作用的乳酸菌的初步筛选及其益生潜能的研究

为了筛选出具有抑制致病性大肠杆菌作用的乳酸菌,本实验以大肠杆菌ATCC25922作为指示菌,抑菌实验采用牛津杯法。通过发酵上清液对大肠杆菌ATCC25922的抑菌实验,初步筛选出三株乳酸菌发酵上清液对大肠杆菌ATCC25922具有抑制作用,经过对16S rRNA基因进行系统发育分析,发现这三株乳杆菌均为嗜酸乳杆菌。随后又对这三株嗜酸乳杆菌进行了耐酸、耐胆盐及抗生素敏感性实验。结果表明:KLDS1.0901酸耐受性最强,而KLDS1.0902和KLDS1.1003与Lactobacillus acidophilus NCFM酸耐受性接近;对照菌株Lactobacillus acidophilus NCFM胆盐耐受能力最强,KLDS1.0901和KLDS1.1003与Lactobacillus acidophilus NCFM胆盐耐受能力差异不显著,KLDS1.0902胆盐耐受能力最弱;对于抗生素敏感性,三株嗜酸乳杆菌展现出类似的结果,对氨基糖苷类的抗生素展现出耐受;相比于KLDS1.0902,KLDS1.0901和KLDS1.1003有着更好的益生作用潜能,因此随后将对这两株菌在细胞和动物模型中对抗病原菌的作用进行进一步的研究。      

中华稻蝗人工饲养技术初探

根据中国林蛙取食的特点，提出以中华稻蝗替代或部分替代黄粉虫作为中国林蛙饵料的设想，并对其人工饲养技术进行了初步研究。试验结果表明3龄前饲以活体狗尾草优于水稻，而3龄后则相反。活体植株饲养累积死亡率呈S型，而剪叶饲养的累积死亡率呈J型，提出了采用3龄前室外活体狗尾草饲养结合3龄后室内剪叶饲养的方案。     

两株嗜酸乳杆菌体外降解粘蛋白能力的研究

以从人体肠道中筛选,并经16S r DNA鉴定的2株嗜酸乳杆菌KLDS1.0901、KLDS1.0902为研究对象,体外评估两株嗜酸乳杆菌降解粘蛋白的能力。体外粘蛋白降解能力的评估主要是通过液体培养法、SDS-PAGE蛋白分析以及平板降解实验三部分进行。受试菌株在含粘蛋白的液体培养基中生长不良,粪便菌群生长良好;SDS-PAGE粘蛋白残留分析检测以及平板粘蛋白溶圈检测表明受试菌株无粘蛋白降解活性,而粪便菌群产生阳性反应。实验结果表明,两株嗜酸乳杆菌无体外降解粘蛋白活性。      

铁氧磁流体磁性粒子形成的影响因素及其作用机理

采用化学共沉淀法制备纳米级铁氧体磁性粒子,探讨温度、碱的过量比(y)、表面活性剂的用量比(n)、反应时间对磁流体基本性质的影响。着重讨论了磁性粒子形成的影响因素及其作用机理。并用古埃磁天平对产品进行了性能测试。通过实验确定了制备高纯度、小粒径、强磁性、均匀分散的Fe3O4磁性粒子的合理工艺条件:反应时间180min,温度80℃,y=0.25,n=0.6。     

独立学院大学生思想政治状况调查分析

为全面了解独立学院大学生思想政治状况,进一步增强新形势下大学生思想政治教育的针对性、实效性和感染力。本文采取问卷调查和座谈的方法,对大一新生的道德品质状况进行了调查、研究和分析。针对调查中掌握的不容忽视的问题,提出加强和改进独立学院大学生思想政治教育工作的对策。     

磁性纳米固体超强酸催化合成没食子酸酯

研究了以磁性纳米固体超强酸SO4^-2/TiO2为催化剂,以没食子酸与正丙醇为原料合成没食子酸酯的反应。探讨了醇酸比、催化剂用量、催化剂焙烧温度以及反应时间、反应温度对酯产率的影响。结果表明最适宜的反应条件是：正丙醇、酸、催化剂的物质的量比：0．934/0．0825/0．00524,反应温度为120℃,反应时间2．5h,产率为84．3％。