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为了研究遗传密码子对表达调控的影响,利用PCR重叠延伸法,对萝卜抗真菌蛋白Rs-AFP2基因编码序列区的部分核苷酸进行沉默突变,构建突变体Rs-AFPm.序列分析表明,PCR产物全长240bp,有一个阅读框,编码的蛋白由29个氨基酸的信号肽和51个氨基酸的抗真菌蛋白组成.突变体与突变前的Rs-AFP2基因相比,在编码区第3号氨基酸Lys相差一个碱基(TTG→TTA),第5号氨基酸Gln相差一个碱基(CAG→CAA),第6号稀有密码子Arg相差两个碱基(CAG→CGA).重新合成引物,将切除信号肽的Rs-AFP2基因和Rs-AFPm基因与原核表达载体pET-21b(+)分别重组到大肠杆菌BL21菌株.IPTG诱导后,二者均得到了表达.软件分析显示,突变前pETAFPo表达产物占全菌蛋白的3%,突变后pETAFPm的表达产物占全菌蛋白含量的8%;表达蛋白主要以包涵体的形式存在,包涵体经超声波破碎后,蛋白质复性,抑菌结果表明,pETAFPm表达产物的抑菌半径大于pETAFP2表达产物的抑菌半径.这些都说明改造后的Rs-AFPm基因与Rs-AFP2基因相比,已有效地提高表达量. 相似文献
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为进一步了解豚鼠耳蜗毛细胞静纤毛变异的形态特征和原因,采用本实验室20多年各种实验动物耳蜗的扫描电镜观察标本,回顾分析耳蜗毛细胞静纤毛的形态特征和变异。收集正常对照豚鼠37只,受噪声刺激者187只,给予耳毒性药物(奈替米星)实验者20只,WM88拈抗庆大霉素耳毒性实验观察24只,丹参滴耳液实验6只,激光辐射镫骨底板实验7只,给予负压和超压者6只,接受次声者23只。共观察豚鼠310只,620只耳蜗。样品制备按照常规或本实验室改良的技术方法进行,所有动物均快速断头处死,取出双侧颞骨,挑破圆窗膜,取出镫骨,打开卵圆窗,用针在耳蜗尖挑一小孔,用21.5%戊二醛做蜗管内灌注固定,随后置冰箱连续固定8h。0.1mol/L磷酸缓冲液漂洗后,1%四氧化锇固定2h。然后在0.1mol/L磷酸缓冲液中去除耳蜗骨壳,去除螺旋韧带、前庭膜,充分暴露Corti器。单宁酸导电染色,梯度酒精脱水,HCP-2型临界点干燥仪干燥,E-102型离子溅射仪镀金。Philip SEM 505型或Hitachi S-800型扫描电镜观察。 相似文献
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IP承载网技术发展趋势 总被引:1,自引:0,他引:1
介绍了下一代网络的发展目标,IP技术发展状况,IP QoS技术发展现状和趋势,网络可用性技术的发展现状和趋势,以及IP承载网发展的安全问题、地址问题。 相似文献
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对微波陶瓷基印制板的制造工艺流程进行了简单的介绍,对所采用的工艺技术的有效性进行了较为详细的论述。 相似文献
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乌江洪家渡水电站坝址河谷深切300余m,硬质岩与软质岩相间分布,岸坡地形陡峻,软弱夹层发育,卸荷、崩塌等物理地质作用强烈。根据坝址地质条件与电站枢纽布置,工程存在:隧洞群进水口同向高边坡整体稳定问题;坝肩开挖、隧洞进出口开挖、厂房开挖及料场开挖等高边坡稳定问题;泄洪冲刷及雾化区1号、2号塌滑体高边坡稳定问题;王家渡堆料场、瓦房寨砂石系统高边坡稳定问题。因此,工程高边坡稳定问题是本工程的主要工程问题之一,但通过参建各方共同努力,本工程高边坡处理都取得了圆满成功。 相似文献
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重庆市通信管理局局长苏少林在对电信市场“十大关系”的论述中提出,要正确把握和处理好基础业务与增值业务的关系。落实科学发展观,统筹考虑不同电信业务的协调发展。电信业务分为基础业务和增值业务。基础电信业务关系到国家安全、网络安全和国家通信资源的优化配管,在通信发展中起着固本的作用;增值电信业务,尤其是第 相似文献
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