类胰岛素生长因子I(IGF-I)基因的克隆及融合蛋白的表达

目的 扩增类胰岛素生长因子Ｉ（ＩＧＦ－Ｉ）２１０ｂｐ的ＤＮＡ片段,将其克隆到ＰＧＥＸ－１ λＴ质粒,并转化到 Ｅ．ｃｏｌｉ　ＮＨ５２２中高效表达。方法 用改进的ＲＴ－ＰＣＲ法合成人肝脏ｃＤＮＡ,然后从该ｃＤＮＡ文库中扩增出ＩＧＦ－Ｉ基 因。将扩增的ＩＧＦ－Ｉ ｃＤＮＡ用 ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲ　Ｉ双酶切后,插入到同样双酶切处理的ｐＧＥＸ－１λＴ载体中,连接转化 Ｅ． ｃｏｌｉ　ＮＭ５２２,筛选克隆,酶切鉴定后,进行了核苷酸序列分析及表达。结果 将ＩＰＴＧ诱导表达的菌体离心收集,经 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析,在相对分子质量３４０００处可见明显高表达带,表达量可占菌体蛋白总量的２０％以上。免疫印迹表 明重组蛋白具有ＩＧＦ－Ｉ的抗原性。结论　重组人ＩＧＦ－Ｉ的成功克隆与表达,将为进一步研究人ＩＣＦ－Ｉ的生物学特性 打下基础。     

CpG-ODN对乙肝核酸疫苗及重组疫苗免疫效果的影响

目的研究CpG寡聚脱氧核苷酸(CpGODN)对乙肝核酸疫苗及重组(CHO细胞)疫苗免疫效果的影响。方法核酸疫苗实验组用CpGODN与乙肝核酸疫苗联合免疫BALBc小鼠,阳性对照组注射核酸疫苗,阴性对照组注射质粒pVAX1;重组疫苗分4个实验组,用CpGODN与不同剂量的重组疫苗配伍后分别免疫BALBc小鼠,阳性对照组注射重组疫苗,阴性对照组注射生理盐水。应用ELISA检测小鼠血清中的抗HBs水平。结果CpG与乙肝核酸疫苗组抗体阳转率比阳性对照组提高3倍,抗体水平提高2倍。CpG与重组疫苗组的阳转率和阳转时间均高于或早于CpG与核酸疫苗实验组。加入CpGODN后,即使重组疫苗用量减少3倍,诱导抗体水平和阳转率均无明显改变。结论CpGODN可提高乙肝核酸疫苗和重组疫苗的免疫效果,并使抗体产生的时间提前。     

甲型流感病毒HA基因核酸疫苗表达载体的构建及表达

目的构建含有甲型流感病毒HA基因的核酸疫苗表达载体,转染COS-7细胞,并检测目的蛋白的表达。方法将甲型流感病毒New Caledonia/20/99(H1N1)接种鸡胚后,收获尿囊液,提取流感病毒总RNA,RT-PCR法扩增HA基因。经亚克隆后获得质粒pMD-T/HA,酶切鉴定后测序,将其与质粒pVAX1分别双酶切后连接,构建甲型流感病毒表达载体pVAHA。脂质体法转染COS-7细胞,并检测目的蛋白的表达。结果扩增出1700 bp片段,与预期的HA基因大小相符,测序结果与GenBank报道一致,酶切鉴定表明甲型流感病毒表达载体pVAHA构建正确,Western blot检测证明了流感病毒HA蛋白的表达。结论已成功构建了甲型流感病毒HA基因核酸疫苗表达载体pVAHA。     

应用地应力分析技术优化九龙山构造的钻井设计

四川盆地川西地区北部九龙山构造钻井中经常出现井涌、井漏、卡钻、遇阻等钻井复杂和事故。为此,在该构造应用地应力分析技术（GMI）开展了现今地应力状态研究和岩石力学参数定量计算,先通过密度测井、水力压裂及成像测井等资料解释出上覆岩石应力属于中间主应力,然后应用密度、声波等测井数据,采用不同模型计算砂岩、泥岩、碳酸盐岩的岩石强度、杨氏模量、泊松比、内摩擦系数等岩石力学参数,从而获取了较准确的地层压力三曲线剖面,评估了该区地应力状态下的直井、定向井及水平井的井壁稳定性。根据该区钻井复杂和事故形成的力学根源,提出了适合该构造钻井的合理的井身结构、安全的钻井液密度窗口、钻井轨迹最佳方向等新井钻井设计优化建议。新钻5口井实际应用效果表明：钻井复杂和事故得到了显著降低,钻井周期明显缩短,由此加快了九龙山构造的勘探开发步伐。     

管井和轻型真空井点组合 在某电厂深基坑降水中的应用

以某电厂翻车机室为研究对象, 针对其深基坑降水降深大, 工期紧等特点, 主要介绍了该工程的工程地质及水 文地质条件, 并且运用管井和轻型真空井点组合降水的方法, 设计了基坑降水处理的施工方案, 确定了降水的各个 参数。实践证明, 管井和轻型真空井点组合应用效果良好, 有效保证了工程的顺利进行, 加快了工程进度, 缩短了工 期。结合实例提出了降水过程中应注意的问题及应对措施。     

优化资本结构 降低资本成本

我国资本市场的进一步完善,要求企业经营者更加关注资本市场,重视资本成本。通过对企业如何进行优化资本结构决策的探讨,找出降低资本成本的途径;阐述影响企业资本结构优化的各个因素,以及资本结构优化决策的几种方法;对比较企业价值法进行重点介绍,论述利用该方法进行资本结构优化决策的全过程。     

北极，有大美而不言

北极地区主要由一个被广大冰原覆盖的大洋（即北冰洋）和环绕在其周围的一圈无树木的冻土地带所组成。北冰洋位于地球的最北端，大致以北极为中心，被亚洲，欧洲，北美洲三洲所环绕。面积约为1310万平方公里，是地球上最小最浅的大洋。北极地区的生物包括冰中的微生物、鱼类与海洋哺乳动物、陆地动物等。非常独特的生态系统和奇特的动物种群吸引着越来越多的人们的探访。     

基于Google Earth平台地震勘探点位批量显示与输出

Google Earth软件平台以快速、直观方式显示地图及相关的地表信息,研究地震勘探点位批量显示与输出,将为实现地震勘探点位的目标设计打下基础.本文首先较为详细地分析了KML地标文件,然后运用COORD软件实现了测量数据平面坐标与经纬度的转换、运用VB编程,成功制作KML地标文件以及读取KML文件提取相关数据,最后应...     

乳化剂对醋苯丙核壳乳液性能的影响

简要叙述了乳化剂对聚合物乳液的影响。详细地讨论了AES、OP-10两种乳化剂对聚合物乳液最低成膜温度(MFT)、粘度、乳胶粒核壳结构等性能的影响。     

双价肾综合征出血热纯化疫苗的研究

目的　研制包含Ⅰ型和Ⅱ型病毒抗原的肾综合征出血热纯化疫苗 ,以提高疫苗质量及临床应用效果。方法　用金黄地鼠肾细胞培养的PS 6株 (Ⅰ型 )病毒和L99株 (Ⅱ型 )病毒以体积比 1∶1的比例配制成双价疫苗 ,经醋酸锌沉淀、超滤浓缩、Sepharose 4FF柱层析制备成双价纯化疫苗。结果　双价纯化疫苗经中国药品生物制品检定所检测 ,各项指标全部合格。疫苗于 37℃放置 2周和 4℃放置 3年 ,效力试验均合格。临床观察血清中和抗体阳转率大于 85 % ,仅出现 0 .5 %的轻反应。结论　研制的出血热双价纯化疫苗 ,各项质量指标均符合《双价肾综合征出血热纯化疫苗试行规程》的要求 ,临床应用效果良好