新型黑曲霉液体发酵及对黄曲霉毒素B1的脱除

对经紫外照射诱变制备的新型黑曲霉FS-UV1在马铃薯葡萄糖液体培养基(PDB)中的pH、蛋白质质量浓度、蛋白酶活性变化以及脱除机制进行了研究。在发酵过程中,pH值不断下降,由初始pH 5.9下降为1.83。蛋白质质量浓度在发酵48 h后达到最大,为10.07 g/L,而酸性蛋白酶活性则在72 h达到最高,为0.98 U/m L。新型黑曲霉FS-UV1孢子悬液对AFB_1无脱除效果,而菌丝体对AFB_1具有吸附作用,发酵液则对AFB_1具有降解作用,其中发挥降解作用的可能是蛋白质。对FS-UV1在pH 7的模拟肠道环境中脱除黄曲霉毒素B_1(AFB_1)的效果进行了评价。脱除48 h时,在pH 7的模拟肠道环境中对AFB_1的脱除率为87.3%。     

基于氧化应激和线粒体功能障碍的伏马毒素B1诱导线虫神经毒性机制

为研究线粒体功能和氧化应激在伏马毒素B1(fumonisin B1,FB1)诱导神经毒性中的作用,以秀丽隐杆线虫为模型,对FB1处理后的线虫行为表型以及包括氧化应激和线粒体功能相关指标变化进行分析。结果表明,20～200μg/mL的FB1暴露24 h以剂量依赖方式诱导细胞色素氧化酶、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和过氧化氢酶（catalase,CAT）相关基因（cyp35A2、sod-1、sod-3、ctl-2和ctl-3）的异常表达。此外,100～200μg/mL的FB1处理降低了线虫线粒体密度,并显著降低了三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）水平和线粒体膜电位（P<0.05）。200μg/mL的FB1处理显著抑制了线虫线粒体呼吸链复合物I和Ⅴ的表达,提高了线粒体分裂基因drp-1的表达水平。相关性分析显示,氧化应激和线粒体功能相关指标的表达与线虫行为学表型具有显著相关性。综上,FB1可能通过参与线虫氧化应激、线粒体呼吸链和线粒体动力学过程诱导神经毒性。     

CdTe量子点与微囊藻毒素-LR抗体的偶联及其相互作用的研究

以巯基乙酸作为稳定剂制备了水溶性CdTe量子点,将纯化后的量子点与微囊藻毒素-LR抗体偶联,通过分析紫外-可见吸收光谱和荧光光谱,研究了不同温度下CdTe量子点与微囊藻毒素-LR抗体的相互作用,得到了量子点与抗体之间的表观结合常数Kapp(84.3M-1),SternVolmer猝灭常数KSV(6.74×104(298 K),6.11×104(304 K),5.93×104(310 K)),结合位点n和结合常数K。此外,还研究了量子点与抗体之间相互作用的热力学参数△H(0),△G(0)和△S(0),经实验数据发现,量子点与抗体之间的作用力以静电相互作用为主,氢键、范德华力也起到了一定的作用。     

实时荧光环介导等温扩增技术检测猪肉中的假单胞菌

根据假单胞菌16S rDNA基因序列设计引物,并向反应体系中加入饱和型核酸染料Eva Green,利用实时荧光检测仪,建立假单胞菌属实时荧光环介导等温扩增技术(LAMP)。研究中对62株假单胞菌的16S rDNA基因通过DNAMAN软件进行序列比对后,针对共有片段设计扩增引物。对扩增体系进行了优化,优化结果经电泳鉴定。通过12株假单胞菌和23株非假单胞菌进行特异性验证,并比较了实时荧光LAMP与普通LAMP的灵敏度,对人工污染样品的检出限进行了测定。结果表明,特异性验证中12株假单胞菌为阳性,23株非假单胞菌为阴性。实时荧光LAMP检测纯菌的灵敏度为36 CFU/mL,是普通LAMP灵敏度的10倍。人工污染样品的检出限为1.73×10~3 CFU/g。本研究中建立了一种检测冷鲜猪肉中假单胞菌属的方法,实现了多个菌种的同时检测,避免了单一菌种检测的局限性,该方法快速、准确、灵敏度高,可在2 h内完成冷鲜猪肉中假单胞菌的检测。     

黑曲霉降解黄曲霉毒素B1的研究及转录组分析

为探究黑曲霉FS10对AFB_1的降解机制,使用黑曲霉FS10的不同组分(菌悬液、发酵液、孢子、菌丝体)对AFB_1进行降解,并研究了AFB_1刺激对黑曲霉FS10降解效果的影响;利用扫描电子显微镜观察降解过程中黑曲霉菌丝体的形态变化;用转录组学技术探究AFB_1可能的降解机理。结果表明:黑曲霉FS10能有效降解AFB_1,72 h时菌悬液的对AFB_1脱除率高达98.65%;黑曲霉FS10孢子对AFB_1无明显脱除作用,但菌丝体对AFB_1有一定的吸附能力,发酵液对AFB_1有明显脱除效果;经过AFB_1诱导刺激后黑曲霉FS10降解效果有明显提升,表明AFB_1处理能显著提升黑曲霉FS10对AFB_1的降解能力。微观结构分析表明AFB_1处理在一定程度上影响黑曲霉FS10的形态,但随着时间的延长这种影响逐渐减小。此外,转录组学分析表明AFB_1处理降低了一些能量代谢基因的水平,这可能是黑曲霉FS10的一种自我保护机制,同时蛋氨酸的合成基因上调,推测AFB_1的降解可能与蛋氨酸的合成有关。     

苹果渣饲料中展青霉素生物脱除的条件优化及脱除前后饲料中营养物质评价

为降低苹果渣中展青霉素的含量,以一株对展青霉素有降解能力的黑曲霉FS10为发酵菌株对展青霉素污染的苹果渣进行发酵脱毒。以展青霉素降解率为指标,通过单因素实验对接种量、料水比、发酵时间和发酵温度四个影响苹果渣固态发酵的因素参数进行优化,然后利用响应面法筛选最优发酵条件,并对最优发酵条件下苹果渣发酵产物的营养物质进行评价。结果表明,接种量10%,发酵温度31 oC,发酵时间4 d,料水比1:3.2（g:mL）为黑曲霉生物发酵苹果渣的最优发酵条件,在此条件下展青霉素可被完全脱除。该验证结果与理论值相对误差为1.67%,说明该优化参数可行,具有实际应用价值。相较于发酵前而言,发酵后苹果渣中粗纤维含量从20.26%降低17.32%,粗蛋白含量从 8.16% 提高至10.08%,粗脂肪含量从3.32%提高至4.06%,总氨基酸含量从64.43 mg /g提高至73.78 mg/g。该研究不仅能够完全脱除受污染苹果渣中的展青霉素,还可有效改善苹果渣的营养价值,为开发安全营养的苹果渣饲料提供了有力的技术支持。     

黄曲霉毒素B1金标检测体系建立过程中的影响因素

详细研究了纳米金标记免疫检测体系建立过程中的影响因素，包括检测带的信号强度、封闭试剂，纳米金探针的浓度、包被试剂A和B的浓度、纳米金溶胶的颗粒尺寸，及检测过程中的化学体系等。通过参数优化，确立了建立快速、简易的金标试剂条检测方法的最佳条件。探针溶液中加入保护试剂K后，试剂条的稳定性有明显的提高，常温下试剂条保存期可达120d（信噪比保留70％以上）。     

自然发酵黄豆酱生产过程中理化及微生物指标的动态分析

以马鞍山市黄池食品(集团)有限公司酱类产品为调查对象,以自然发酵黄豆酱生产工艺流程与HACCP关键控制点为依据取样,跟踪了2010年3～9月生产周期中各环节的水分质量分数、水分活度、总酸、氨基酸态氮含量、AFB1质量分数、细菌总数、霉菌总数、致病菌的检测。确定了AFB1的变化动态以及与水分活度、水分质量分数的相关关系,进而分析了自然发酵黄豆酱中AFB1的污染源;确定了豆酱质量重要指标氨基酸态氮的变化动态以及与酸度、pH的相关关系;确定了黄豆酱自然发酵过程中微生物的变化动态以及致病菌污染状况。     

电致化学发光方法检测肉的新鲜度

肉类的变质过程中伴随着硫化物和氨气的产生.基于电致化学发光的原理和方法,构建了MWNTs/PVA/铱配合物修饰电极,此电极对无机氨有很好的响应,实验中以MWNTs/PVA/铱配合物修饰电极为工作电极,铂丝电极为对电极,Ag/AgCl电极为参比电极,进行循环伏安-电致化学发光扫描,扫描范围为0.2～1.8V,扫描速率为100 mv/s,线性范围为1.8×10-7～1.0×10-9 mol/L,检出限为1.2×10-13 mol/L.实验表明,ECL响应值与肉的腐败程度具有很好的相关性,该法可用于肉品新鲜度的监控.     

葛根素-羟丙基-β-环糊精包合物的制备及表征

以HPβ--CD作为客体分子葛根素的载体,采用均匀设计法研究制备包合物的最优工艺,采用圆二色谱,红外光谱,紫外光谱,薄层色谱等方法对产物进行了表征,研究结果表明:产物的溶解度、光学特性、亲水性质等得到改善,为开发具有延缓葛根素作用时间的新口服剂型提供了理论依据。