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人工合成78 个碱基的随机ssDNA文库,采用指数富集配基的系统进化技术与诱变聚合酶链式反应(polymerase chain reaction)结合的方法,通过筛选富集、克隆、测序,获得了与河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)特异结合的单克隆DNA适配子A3。DNA适配子A3的二级结构主要为茎环结构,与TTX的亲和力为1.254。对适配子和TTX结合的磷酸盐缓冲液pH值、荧光染料结合时间进行优化,结果表明,最适pH值为7.5,最佳结合时间为10 min。建立的快速筛选检测TTX的DNA适配子-荧光染料法对TTX的检出限为10-6 mo1/L。 相似文献
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应用16S rRNA基因聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增通用引物,对3 属13 种福建省搜集的河豚鱼样品与9 个未知物种的河豚鱼样品的16S rRNA基因序列中的部分片段进行PCR扩增与脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)碱基序列测定,各物种序列长度在611~614 bp之间。应用DNAMAN V6软件进行样品间DNA序列同源性比对分析,建立样品间系统关系同源树。供试13 个样品被划分为4 个类群组,群间的同源率为87%,群内同源率为94%~100%。根据序列同源性分析结果,9 个未知种名的样品被归类到3 个类群组中,推测9 个未知种名的样品为东方鲀属或腹刺鲀属。探讨了16S rRNA基因部分DNA序列测试及同源性分析技术在河豚鱼种属鉴别中应用的可能性。 相似文献
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多基因DNA条形码鉴定6 个鳗鱼物种 总被引:1,自引:0,他引:1
建立6?种鳗鱼的物种多基因DNA条形码精准鉴定方法。以鳗鱼DNA为模板,采用3?对通用引物对6?种鳗鱼的3?个基因(16S rRNA、Cyt b、COⅠ)部分DNA片段进行聚合酶链式反应扩增、测序,结果6?种鳗鱼各获得3?条16S rDNA(638~643?bp)、Cyt?b(464~466?bp)、COⅠ(705~707?bp)基因部分DNA序列,从中选取各物种序列同源的片段设计3 对新引物对6 种鳗鱼的16S rRNA、Cyt b、COⅠ基因部分DNA片段进行PCR扩增,其产物大小分别为504~507、400、609?bp,再从各片段中筛选出具有6?种鳗鱼物种特异性强的、碱基数分别为262、280、300?bp的3?条DNA片段序列,作为6?种鳗鱼物种的3?个基因的标准DNA条形码,应用DNAMAN?V6软件进行同源性分析,并通过GenBank数据库的比对验证,制定了供检测实践用的同源率判别指标,建立鳗鱼物种的多基因条形码检测方法。应用该方法对30?个待检鳗鱼样品进行检测,结果表明,各样品基于3?个基因DNA条形码的比对,符合同源率指标,物种判别结果互相吻合,从而精准判别样品的所属物种。该方法稳定、精准、易于操作,可应用于6?种鳗鱼的物种鉴定,值得推广。 相似文献
76.
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介绍了一种计算与作图相结合的直齿锥齿轮粗铣刀齿形设计方法,推导了精确计算公式,详述了计算步骤和计算机作图方法,并给出了设计实例。 相似文献
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主要对影响滚、剃齿精度、引起剃齿中凹的原因进行了分析。推导了进入双点啮合区的法面啮合角公式,采取了独特的剃齿刀修形方式,从设计和修形上下功夫杜绝剃齿中凹的产生。为提高齿轮滚、剃精度,解决剃齿中凹问题进行了大量的实验并对其实验结果进行了对比分析,提出了解决这一系列问题的方法和措施,并在生产实践中得到了验证。 相似文献
79.
针对相对封闭空间发生火灾时烟气无法及时排除的现象,在介绍静电除尘技术原理的基础上,分析了在火场中利用静电除尘技术进行消烟的可行性、研究现状及存在问题,并提出了改进的方向。将静电除尘技术运用于火场消烟中,可以最大限度地减少相对封闭空间由于烟气无法及时排除带来的危害,为设计出一种运用于相对封闭空间消烟的装置提出理论现实性和科学性。 相似文献
80.
研究了苯磺酸氨氯地平(ADB)在石墨烯(GR)修饰玻碳电极(GR/GCE)上的电化学行为及电化学动力学性质,据此建立了ADB电分析方法。采用电化学阻抗(EIS)法,循环伏安(CV)法,计时电流(CA)法,计时电量法(CC)等测定电极动力学参数。结果表明,ADB在GCE上的直接电化学较迟缓,GR对ADB的电化学氧化具有明显的电催化作用,其氧化峰电流增大了近4倍。用微分脉冲伏安法(DPV)在优化条件下测得氧化峰电流与ADB在6×10-7~1×10-4mol/L浓度范围内呈良好线性关系,检出限(S/N=3)为8.0×10-8 mol/L。该方法可用于市售ADB药品含量的电化学定量测定。 相似文献