宏基因组文库新型β-葡萄糖苷酶的筛选、克隆及酶学性质分析

利用宏基因组文库方法,通过功能筛选法从文库中筛选到一个新型β-葡萄糖苷酶基因bgl2238（GenBank：KU320675.1）,对新基因进行生物信息学分析和原核表达,并研究其酶学性质。结果表明,该基因全长2238bp,可编码745个氨基酸,通过氨基酸序列分析,预测bgl2238蛋白分子质量为80.67kDa,pI值为4.95,是一种结构较稳定、疏水性高且无信号肽序列的酸性蛋白质;经同源性分析,发现其与来源于Bacteroides thetaiotaomicron的β-葡萄糖苷酶具有58%的相似性,属于GH3超家族和GH3C超家族酶。将重组质粒pET-32a（＋）-bgl2238转化入Escherichia coli BL2l（DE3）细胞进行异源表达,酶学性质测定结果显示,以对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷（p-nitrophenyl-β-D-glucopyranoside,pNPG）为底物,β-葡萄糖苷酶bgl2238最适反应pH值和温度分别为6.10、44℃,此时该酶最大比活力达到29.1U/mg;且在4～50℃范围内,热处理β-葡萄糖苷酶bgl22384h后仍保留70%以上的酶活力,热稳定性较好;其动力学参数Vmax为576μmoL/（L·min）,Km为0.296mmol/L;不同浓度的K＋、Na＋、Fe2＋、Mg2＋、Mn2＋、Ca2＋、Co2＋和Ni2＋对酶活力均有较大促进作用,其中Fe2＋对bgl2238酶活力的促进作用最大,10mmol/LFe2＋使相对酶活力高达260%,而重金属离子Ag＋、Hg2＋及Cu2＋对酶活力有抑制作用。bgl2238具有良好的酶学性质,可以尝试应用于工业上纤维素降解的生产。     

基于ANP-QUALIFLEX的海上风电EPC项目投标决策研究

海上风电EPC项目投资大、建设周期短、风险因素众多,科学合理的投标决策至关重要。首先,从EPC总承包商实力、市场环境、业主实力、海上风电项目条件4个方面建立投标决策指标体系;其次,针对决策问题的复杂性与不确定性,运用ANP-QUALIFLEX方法构建投标决策模型;最后,结合工程实例,运用该模型进行投标项目优选,并提出相应的投标建议。研究表明,该决策模型能够有效反映各投标项目的优劣水平,可为类似项目投标决策提供参考。     

减轻城市地震灾害的立法问题

1976年7月28日唐山大震,使一座生气勃勃的城市的大部分,在倾刻之间夷为平地,变成一片瓦砾和废墟。强烈地震给一座城市带来的灾害之大,使人们对于减轻城市地震灾害的重要意义,有了极为深刻的认识。为了作好城市防灾的工作,有     

底层框架-抗震墙砖房的抗震性能

探讨了决定底层框架-抗震墙砖房抗震性能的几个问题,主要有:底层的钢筋砼框架-抗震墙体系应合理设置,底层钢筋砼墙宜为带边框开竖缝的低矮墙,过渡楼层的抗剪和抗弯能力应给予增强和底层与上部砖房的抗震能力宜相匹配等.     

分枝犁头霉WL511热稳定α-半乳糖苷酶基因克隆及序列分析

构建并筛选耐热分枝犁头霉cDNA文库获得639 bp热稳定α-半乳糖苷酶基因片段,并以5′-RACE和3-′RACE技术获得上下游片段1817 bp和1092 bp,拼接得α-半乳糖苷酶全长序列2228 bp,其完整开放读码框为2142 bp,编码713个氨基酸,G+C含量43%;产物预测等电点5.2,预测相对分子质量81000。该基因(GenBank No.DQ234280)属α-半乳糖苷酶36家族,与其他来源的α-半乳糖苷酶基因同源性较低,与链霉菌Streptomyces avermitilis MA-4680的α-半乳糖苷酶同源性最高为38%。     

路堑高边坡锚索格梁支护体系受力特征及设计方法研究

以湖南省某高速公路路堑高边坡工程为依托,建立边坡支护模型,研究锚索间距、锚固角度、锚固长度等设计参数对锚索格梁支护体系受力特征及边坡稳定性的影响规律,并根据模拟分析结果,提出最优支护设计方案.研究表明:锚索间距对边坡稳定性影响较大,锚固角度、锚固长度对边坡稳定性影响较小;锚索间距、锚固角度的改变对混凝土格梁受力特征有显...     

新型影碟机开辟新天地

部全功能的VCD2.O小影碟/卡拉OK播放机     

马蹄笋粉特性及其酥性饼干制作研究

本文主要研究马蹄笋粉对胆固醇、胆酸钠和重金属离子的体外吸附能力,马蹄笋粉不同添加量对小麦粉糊化特性影响的规律,以及利用马蹄笋粉制作酥性饼干的最佳配方。结果表明:马蹄笋粉在p H2和p H7时对胆固醇的吸附量分别为17.11、1.02mg/g,对浓度为2、3mg/m L胆酸钠吸附量分别为64.70、75mg/g;马蹄笋粉对四种混合重金属离子具有一定的吸附作用,吸附能力Pb2+>Cd2+>Cu2+>Zn2+;马蹄笋粉添加量的增加对小麦粉糊化的峰值粘度、最低粘度、最终粘度、回生值和糊化时间影响较大,但对崩解值和糊化温度没有显著影响;采用单因素及正交分析、感官评价确定了利用马蹄笋粉制作酥性饼干的最佳配方为:小麦粉∶马蹄笋粉∶白砂糖∶膨松剂∶植物油=100∶15∶25∶1.5∶15,感官得分为51.4。      

高密度建成环境鸟鸣声的感知评估与优化提升研究——以重庆市南岸区为例

高密度建成环境内自然式鸟鸣声感知特征与城市空间建设运营、鸟类活动行为以及居民感知状况密切相关,是衡量城市空间品质优劣程度、环境适宜性特征以及生态可持续性的关键。通过解析高密度建成环境内鸟鸣声感知的影响因素,构建影响鸟鸣声感知的自然式和人工式影响因子评估体系,识别重庆市南岸区高密度建设空间,结合城市活力特征对比分析城市居民鸟鸣声感知现状和需求意向,针对高密度建成环境内承载鸟类活动的公园绿地、防护绿地、广场绿地和附属绿地4类绿色空间,解析自然式和人工式影响因素与鸟鸣声感知现状的相关性特征。研究发现高密度建成环境内鸟鸣声感知呈现出“听者—环境—感知”复杂的互动关系,区位、外部环境和内部生态特征对鸟鸣声感知产生复杂的影响,生态特征愈优的城市空间,其鸟鸣声感知愈强,人类干扰越高的城市空间呈现对鸟鸣声感知的需求洼地。匹配高密度建成环境内居民鸟鸣声感知需求和建设开发现状,提出提高生态基底质量和降低人类干扰的合理管控和建设引导,并形成“增量—连廊—通源”“提质—优植—共营”“降扰—弱噪—增感”的优化提升路径。     

复合氧化物VPO催化剂的制备和催化性能的研究

采用ＢＥＴ,ＸＲＯ,ＩＲ和ＥＳＲ等测试手段,考察由４种不同的方法（ＰＶ＝１．１５）制备的ＶＰＯ催化剂的比表面、晶相组成和表面状态,以及用于正丁烷制顺酐反应的催化性能。研究表明,影响顺酐收率的主要因素是催化剂的相组成及钒的氧化态。在（ＶＯ）２Ｐ２Ｏ７相中含有少量α－ＶＯＰＯ４相对丁烷氧化制顺酐有良好的催化效果。有机溶剂的使用能增大催化剂表面积,但并不一定改变催化活性。