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PIK3CA突变检测是实现肿瘤个体化治疗的重要预测因子。以PIK3CA为目的基因,选择E542K、E545K、H1047R三个热点突变,建立对其准确定量检测的微滴式数字聚合酶链式反应(ddPCR)方法。优化退火温度、引物探针浓度等条件,对方法特异性、线性范围、重复性等方面进行考察。结果表明,建立的ddPCR检测方法精密度好,在突变丰度(0.05~82.75)%范围内相对标准偏差值介于(0.392~14.031)%,准确性高,与重量法的相关系数达到99.91%、99.98%、99.94%;在突变丰度0.2%以上,方法的重复性可达5%以内;在突变丰度0.2%以下,重复性保持在15%以下。在20μL反应体系中3个热点突变的空白限分别为0.03%、 0.04%、0.04%,检测下限和定量下限均为0.05%。因此,所建立的PIK3CA基因E542K、E545K及H1047R位点突变的ddPCR参考测量灵敏度高,重复性好,在癌症诊断、个体化用药指导和预后方面具有良好的应用。 相似文献
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本文通过对汽车客运站总平面的研究,探讨了影响总平面设计的若干因素以及总平面设计在建筑设计中的重要性。再结合几个具体的实例进一步分析城市交通、基地性质等因素对总平面设计的影响,进而展望未来总平面设计的发展方向。 相似文献
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建筑师斯蒂芬·布劳菲尔斯 (Stephan Braunfels)设计的慕尼黑现代绘画馆,发端于清晰的概念,受控于严密的逻辑,其结果是富有感染力的精确的建筑空间。本文是作者在参观该绘画馆以后,试图通过分析捕捉到该建筑设计与形式之间的深层线索,并由分析得出形式语言背后清晰的概念,使本文获得了设计——形式的现实意义。 相似文献
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