食源性生物活性肽对2型糖尿病的干预作用及其机制研究进展

2型糖尿病属于非胰岛素依赖性糖尿病,全世界每年有数百万人患2型糖尿病或成为潜在患者。食源性活性肽不仅具有基本的营养优势,而且更易被机体吸收,有研究证实生物活性肽可以抑制与2型糖尿病相关的代谢酶活力,促进肠促胰岛素分泌,改善胰岛素抵抗,因此可以作为有效管理该疾病的功能性食品或药物。本文综述了食源性生物活性肽的特性和来源,以及目前其关于调节血糖作用机制的研究进展,归纳了食源性代谢酶调节剂的相关研究,以期为食源性生物活性肽的进一步研究提供参考。     

植物乳杆菌中胆盐水解酶基因的原核表达及纯化

目的克隆植物乳杆菌中胆盐水解酶(BSH)基因,原核表达并纯化重组蛋白。方法利用PCR技术扩增植物乳杆菌BSH基因,克隆至表达载体pET-30a,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行纯化及Western blot鉴定。结果重组表达质粒pET-30a-BSH经双酶切鉴定,可见961bp的目的基因条带。表达的重组蛋白相对分子质量约为40000(含6个His标签),主要以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的43%,纯化后,纯度达90%以上,且可与植物乳杆菌多克隆抗血清发生特异性反应。结论已成功克隆了植物乳杆菌中BSH基因,并在大肠杆菌中获得高效表达。纯化的重组蛋白纯度较高,为高效降解胆固醇的基因工程菌株的研究奠定了基础。     

黑龙江省不同产地水稻的GC-MS代谢物差异分析

采用气相色谱-质谱联用技术对黑龙江省建三江水稻产区与其他产区的水稻种子进行代谢组学研究,探讨产地对其代谢物的影响。在R软件平台下采用XCMS软件包对气相色谱-质谱数据进行处理,结合SIMCA-P软件,进行主成分分析、偏最小二乘法-判别分析以及聚类分析进行多元统计分析。结果表明,共检测到173?个峰,定性出氨基酸、脂肪酸、糖类、多元醇等共44?个化合物;筛选出建三江地区相对于其他产区具有显著变化（P＜0.05,VIP≥1）的差异代谢物23?个,通过代谢通路分析得到氨基酸代谢对水稻品质及产地区分具有一定影响。结果表明,产地对水稻代谢物的种类和含量均有影响,水稻代谢物携带其产地信息,建三江地区与其他产地水稻代谢物之间存在显著差异。利用气相色谱-质谱技术分析产地对水稻种子代谢产物影响以及产地区分具有可行性。     

米蛋白抗氧化肽的制备及其结构分析

实验以大米为原料,在单因素的基础上以温度、酶添加量、pH为响应因子,以大米蛋白肽的DPPH自由基清除率和水解度为响应值,采用Design-Expert 8. 0. 6. 1软件对水解工艺进行优化,并通过傅里叶红外光谱对多肽结构进行分析。结果显示,制备米蛋白抗氧化肽最佳工艺为:温度61℃、酶添加量7%、pH为8.6。此条件下,DPPH自由基清除率和水解度的预测值分别为65.96%,25.12%。经验证,得到DPPH自由基清除率和水解度的实际值分别为66.36%,26.06%,与预测值相近。通过红外光谱可知,米蛋白肽的出峰位置均与蛋白肽特征峰位置相吻合。因此,以本方法制备的米蛋白抗氧化肽维持了多肽的基本结构,并非小分子氨基酸结构。     

绿豆清蛋白Osborne分级提取工艺优化及亚基组成分析

以绿豆为原料,采用Osborne分级法从绿豆中提取清蛋白,在单因素试验基础上,用L9(34)正交试验,研究提取温度、提取时间和料液比对绿豆清蛋白提取率的影响,并采用SDS-PAGE电泳分析绿豆清蛋白的亚基组成。结果表明,绿豆清蛋白的最佳提取工艺为料液比110(g/mL)、提取温度45℃、提取时间150min,该条件下绿豆清蛋白的提取率为(86.79±0.31)%,清蛋白纯度为88.33%。提取的绿豆清蛋白中有4条亚基条带,分子量分别为56.2,46.8,26.3,21.9kD。     

龙胆多糖的结构表征及其体外免疫活性

对龙胆多糖的结构和生物活性进行研究,采用甲基化分析多糖的链接方式。结果表明,龙胆多糖中存在(→1)末端和(1→5)-链接的呋喃阿拉伯糖基、(1→4)-链接的吡喃半乳糖基,同时也存在其他含量比较少的糖基和分支。龙胆多糖中糖醛酸是以(1→4)-链接的半乳糖醛酸方式存在,对龙胆多糖的生物活性起着重要的作用。龙胆多糖可以促进RAW264.7细胞增殖并产生NO,而且NO的产生是通过一氧化氮合成酶mRNA上调实现的,同时龙胆多糖可以上调细胞因子COX-2和TNF-α的mRNA表达水平。     

杂粮灵芝发酵饮料的配方优化及指标测定

杂粮粉富含多种维生素、氨基酸和微量元素,灵芝可补中益气提高人体免疫力,二者制成的杂粮灵芝发酵饮料,营养物质更丰富,口感风味更稳定。实验以燕麦粉等杂粮为原料,将其与灵芝粉混合后制作发酵饮料,用感官评分作为评判标准,通过正交试验确定最佳配方,并对成品理化指标进行分析。结果显示,杂粮灵芝发酵饮料的最佳配方为:燕麦粉25%、薏仁粉12%、灵芝粉6%、白砂糖5%、酵母32%、三氯蔗糖1.9%、结冷胶1.9%、水525%,感官评分为97分。对杂粮灵芝发酵饮料进行理化指标测定,结果为:可溶性固形物2.56%、pH 4.28、乙醇0.14 g/kg,碳水化合物为2.5 g/100 g。     

响应面法优化沙棘果酒发酵条件的研究

以沙棘汁为原料,自选酵母菌Y23作为菌种进行发酵,通过单因素试验选取温度、SO(2)用量、接种量、发酵时间为主要因素,根据Box-Benhnken中心组合试验设计原理,采用响应面分析法确定沙棘果酒最优发酵工艺条件.结果表明:沙棘果酒发酵最佳工艺条件为:温度28.4 ℃、SO(2)用量88 mg/L、接种量12%、发酵时间9.5 d,在此条件下沙棘果酒的酒精度为(11.2±0.2)%(V:V).     

响应面优化碎米蛋白水解及多肽抗氧化研究

为研究碎米蛋白水解工艺条件及其水解产物的抗氧化特性,实验以碎米为原料,以水解度为指标,筛选最适酶解大米蛋白的酶,在单因素的基础上以温度、底物质量分数、酶添加量、pH为响应因子,以碎米蛋白的水解度为响应值,采用Design-Expert 8.0.6.1软件对水解工艺进行优化,并对米蛋白肽的抗氧化活性进行研究。结果表明:碱性蛋白酶是生产米蛋白肽的最适合酶类;碎米蛋白最佳水解工艺为:温度63.7℃、底物质量分数4.4%、酶添加量6.8%、pH为8.5,水解度预测值为24.56%,得到水解度的实际值为25.2%。此条件下得到的碎米蛋白肽具有显著的羟自由基和超氧自由基清除能力,在水解180min、210min时羟自由基和超氧自由基清除率出现最高值为28%、33%,因此,水解180min为制备抗氧化肽的最佳时间。