植物油精炼过程中缩水甘油酯和3-氯丙醇酯的形成及脱除研究进展

缩水甘油酯(GEs)和3-氯丙醇酯(3-MCPDE)是植物油精炼过程中产生的主要污染物之一。GEs和3-MCPDE伴随食用油摄入人体后,经脂肪酶水解产生的缩水甘油和3-氯丙醇具有肾脏毒性和遗传毒性。植物油中GEs和3-MCPDE主要产生于油脂精炼脱臭工段,脱臭温度、脱臭时间对GEs和3-MCPDE的生成影响巨大。从油脂精炼加工过程中GEs和3-MCPDE的形成及脱除等方面进行了综述,指出脱色和脱臭工段可促进GEs和3-MCPDE的生成,当前可通过抑制及脱除其前体物质、优化植物油脱臭条件、脱除精炼油中的GEs及3-MCPDE等方式降低植物油中GEs和3-MCPDE含量。酶制剂具有安全、无污染等优点,通过酶法酯交换降低待脱臭油脂中的甘油二酯和甘油单酯,进而减少脱臭过程中GEs及3-MCPDE的生成是降低GEs和3-MCPDE的发展趋势。     

节杆菌10137β-呋喃果糖苷酶基因克隆及在大肠杆菌表达

以一株高产β-呋喃果糖苷酶的节杆菌10137基因组为模板,成功地扩增出β-呋喃果糖苷酶基因,基因片段长度为1488bp,编码496个氨基酸。将扩增出的目的片段克隆到pFL-B13cl载体上,通过双酶切鉴定,确定该基因已成功克隆至表达载体。研究不同表达条件对β-呋喃果糖苷酶活性的影响,IPTG浓度0.5mmol/L,诱导温度22℃,诱导12h,比酶活可达1412.30U/g,SDS-PAGE电泳显示融合蛋白分子质量大小约为67u,亲和层析纯化后比酶活为2207.48U/g。将重组大肠杆菌在2L发酵罐中培养,诱导10h后β-呋喃果糖甘酶的比酶活为1208.23U/g。     

白假丝酵母脂肪酶CaLIP5在毕赤酵母X33中的优化重组表达

[目的]研究新的脂肪酶及优化脂肪酶发酵培养条件.[方法]在毕赤酵母X33系统中重组表达白假丝酵母脂肪酶CaLIP5.利用响应面分析法,构建了CaLIP5的酶活回归方程.[结果]由响应面分析可知,在温度25.71℃,pH8.33,酵母提取物浓度1.28%和葡萄糖浓度4.06%时,预测最大酶活为8.33U/ml.试验验证酶活为9.24U/ml.实际试验值与模型预测值基本一致.优化后的酶活提高了22.22%.[结论]在优化的培养条件下,可以获得毕赤酵母X33重组表达CaLIP5的最大酶活.     

响应面法优化CALA在毕赤酵母中的组成型表达

南极假丝酵母脂肪酶A (CALA)是现有研究中唯一一种对甘油三酯sn-2位显示出偏好的脂肪酶.本文在完成CALA在毕赤酵母中组成型表达的基础上,为了提高CALA的酶活,采用响应面法建立了CALA发酵培养基和培养条件的二阶数学模型,并验证了模型的有效性;筛选出了2个影响毕赤酵母发酵产CALA的主要因素:培养温度、葡萄糖含...     

慕课结合翻转课堂的课程启发式教学探究

教学中对慕课与翻转课堂相结合的启发式教学方法的实施及成效进行了探究。以食品分析课程为例,采用线上慕课与线下翻转课堂相结合的教学模式,学生线上自主学习课程的核心知识点,预先掌握各种化学组分分析的多种分析方法,而在翻转课堂中,教师则以实际的化学分析案例启发学生运用线上慕课所掌握的化学分析方法解决实际组分分析问题。这种教学模式取得了良好的教学成效,提高了学生专业综合素质以及学以致用的能力。     

重组甘油单酯脂肪酶GMGL的高效表达及固定化

该研究以来源于海洋地衣芽孢杆菌的甘油单酯脂肪酶GMGL为研究对象,在5 L发酵罐中优化了重组大肠杆菌的发酵条件,确定了最佳诱导培养条件：诱导温度25 ℃,发酵培养基pH 7.0,发酵液菌体OD600达到20时添加IPTG至终浓度为1 mmol/L,葡萄糖流加方式为变速流加。诱导培养24 h,菌体湿重达到125.40 g/L,发酵液活力为1985 U/mL,较优化前（1185 U/mL）提高了67.50%。进一步对GMGL进行固定化研究,确定最佳固定化条件为：酶载量为100 mg/g,磷酸盐缓冲液离子强度为0.50 mol/L,pH为9,优化后固定化GMGL的活力为4770 U/g,较优化前（1650 U/g）提高了189.09%。利用扫描电镜（SEM）和傅里叶红外光谱（FT-IR）对固定化酶进行表征,证实GMGL成功负载在ECR8285上。上述结果表明将为高活力甘油单酯脂肪酶的高效制备提供了一定的研究依据。