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41.
甲酸脱氢酶基因在大肠杆菌Rosetta中的高效表达 总被引:4,自引:1,他引:4
甲酸脱氢酶是氧化还原酶辅酶NAD(P)~+和NAD(P)H再生循环体系中的关键酶。实验中,用PCR方法扩增了假丝酵母Candida boidinii中甲酸脱氢酶基因(fdh),分别构建了诱导型表达载体pUC-dh和pET- fdh,以E.coli Rosetta为表达宿主,获得了能够高效表达甲酸脱氢酶的重组菌。经诱导后重组菌Rosetta/pET- fdh的FDH比酶活为0.399U/mg(蛋白),Rosetta/pUC-fdh的FDH比酶活为0.163U/mg(蛋白)。经SDS- PAGE分析,Rosetta/pET-fdh和Rosetta/pUC-fdh表达的FDH蛋白分别占菌体可溶性总蛋白的17%和10%,实现了fdh基因在Rosetta中的高效表达。研究中所构建的重组菌为氧化还原反应中的辅酶再生奠定了良好的基础。 相似文献
42.
43.
44.
45.
通过酸处理活性碳催化环氧苯乙烷制备苯乙醛,收率可达97.5%。并筛选了缩合反应催化剂,以三乙醇胺为催化剂实现了苯乙醛与海因的直接缩合。5-苯乙叉基海因收率50%。 相似文献
46.
甘氨酸席夫碱Ni(Ⅱ)复合物法不对称合成丝氨酸 总被引:1,自引:0,他引:1
采用甘氨酸席夫碱Ni(Ⅱ)复合物法不对称合成光学纯的D-和L-丝氨酸。以2-N-(N'-苄基)脯氨酰-氨基-二苯甲酮甘氨酸席夫碱Ni(Ⅱ)复合物与聚甲醛反应,生成2-N-(N'-苄基)脯氨酰-氨基-二苯甲酮丝氨酸席夫碱Ni(Ⅱ)复合物,经水解生成D-或L-丝氨酸,对映体过量值(e.e.)达到98%,重结晶后e.e.为99.5%,并对手性辅基2-N-(N;-苄基)脯氨酰-氨基-二苯甲酮进行了回收,回收率为85%~95%。 相似文献
47.
引 言苯丙酮酸是重要的医药中间体[1] ,其制备方法很多 ,主要有醋酐制备法[2 ] 、氯苄羰化合成法[3] 和亚苄基海因水解法[4 ] .其中亚苄基海因碱性水解制备苯丙酮酸是一条副产物少、水解收率高的生产路线 ,碱的种类和用量、水解温度和时间均影响着亚苄基海因的降解和苯丙酮酸的生成 ,因此 ,要获得高得率的苯丙酮酸 ,必须通过对各种影响水解动力学的因素进行研究分析 ,并建立亚苄基海因的水解动力学模型 .1 材料与方法1.1 实验试剂亚苄基海因 :工业级 ,自制 ;氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钡、氢氧化钾等 :均为化学纯 ,南京化学试剂厂 .1.2… 相似文献
48.
天冬氨酸转氨酶及其酶学性质 总被引:11,自引:0,他引:11
从大肠杆菌中提取了天冬氨酸转氨酶,并对其酶学性质进行了系统的研究,得出该酶的最适反应温度为37℃、最佳反应pH范围为8.0 ̄8.5、最佳氨基供体为L-天冬氨酸、转化反应动力学常数Km,地影响该酶作用的其它因素(辅酶、金属离子)作了研究。利用几种α-酮酸,考察了该酶在转化制备相应的芳香族L-氨基酸过程中的作用。为该酶的工业化应用提供了理论上的依据。 相似文献
49.
50.
Na+等有害离子胁迫是滨海盐渍土理化性能无法得到提高的主要障碍因子之一,本文通过研究不同改良物料对消除和减轻这一障碍因子的作用性能和机理,为改良滨海盐渍土壤提供理论依据. 相似文献