大肠杆菌和枯草芽孢杆菌来源γ-谷氨酰转肽酶的克隆表达和性质比较

γ-谷氨酰转肽酶(GGT)是生物体内谷氨酰循环的关键酶,在生物有机合成领域具有重要的应用价值。今建立了大肠杆菌和枯草芽孢杆菌GGT的克隆、重组及诱导表达方法。在此基础上,分别考察了重组大肠杆菌GGT(rE_GGT)和重组枯草芽孢杆菌GGT(rB_GGT)的催化特性和稳定性。结果表明,rE_GGT对供体对硝基苯胺(GpNA)的亲和力(Km)优于rB_GGT,但rB_GGT的催化常数(kcat)高达3.48×105 s?1,是rE_GGT的20倍。稳定性研究表明,rE_GGT在pH 6~9和T45℃条件下的稳定性明显优于rB_GGT;但当温度超过45℃时,rB_GGT的稳定性更佳。通过对rE_GGT和rB_GGT的氨基酸组成及其大、小亚基界面相互作用力的分析表明,rE_GGT大小亚基间疏水键的数目明显多于rB_GGT,有助于稳定其四级结构,使其在中低温下具有良好的稳定性;而rB_GGT氨基酸组成中荷电残基和芳香族残基的比例较高,可有效维持其二级结构的稳定性。     

极大螺旋藻藻蓝蛋白的提取与纯化

将极大螺旋藻用高渗液低温浸泡、经（ＮＨ４）２ＳＯ４沉淀、透析后,经过改进的羟基磷灰石柱层析２次纯化得到试剂级的藻蓝蛋白。比较了干藻粉在不同高渗液的渗出液条件下藻蓝蛋白的得率和纯度。建立了低温浸泡时ＰＣ得率与纯度和时间的关系。提出了一种简易可行而高效的羟基磷灰尘石制法。     

微波强化固相合成伐普肽

以伐普肽为研究对象,用固相合成方法,并对偶合反应进行微波强化。利用正交实验研究了微波强化对偶合反应的促进作用。正交实验结果用多元非线性回归分析和响应面法优化,确定优化条件为:反应时间5min,包括1min升温、4min维持,最高反应温度60℃。与常规偶合反应相比,提高反应效率12~36倍。常规接肽反应保护氨基酸用量与固相合成树脂摩尔数之比为3倍,在优化的微波强化反应条件下,保护氨基酸用量减少为过量1倍;保护氨基酸与树脂的偶合效率明显提高,伐普肽得率从常规合成的48%提高到76%。其结构经质谱、高分辨质谱、红外光谱、核磁共振氢谱证实,与目标化合物的结构一致。     

5α-雄甾-2-烯-17-酮的合成

以吸附对甲苯磺酸的硅胶作为催化剂,用表雄酮为原料合成肌肉松弛药的中间体5α-雄甾-2-烯-17-酮。采用质量比m(硅胶)∶m(对甲苯磺酸)为100∶7吸附后,甲苯中回流6 h。甲醇重结晶,以92.3%的高产率得到纯度为98.9%的5α-雄甾-2-烯-17-酮。同时讨论了影响反应的因素。     

4、5、6、7单氟代吲哚-2-酮的合成工艺综述

氟代吲哚-2-酮多用于现代医药化工业中,可以作为多种药物重要中间体.经过文献查阅,综述了吲哚酮4、5、6、7位置氟取代化合物的合成方法,一共给出12条路线.     

模拟移动床连续分离L-苯丙氨酸的研究

利用模拟移动床结合离子交换法从酶转化液中连续分离L-苯丙氨酸。在模拟移动床分离过程中,L-苯丙氨酸的吸附波稳定在区Ⅲ,吸附损失为零,单位质量树脂对L-苯丙氨酸的吸附量可达到125g/kg树脂,提高了树脂利用率:利用区Ⅰ的解吸尾流解吸杂质,L-天冬氨酸、蛋白等杂质的解吸波稳定在区Ⅱ,先于L-苯丙氨酸脱离模拟移动床分离系统;L-苯丙氨酸在区Ⅰ被集中解吸,解吸液中L-苯丙氨酸的浓度达35g/L。实验结果表明该法的L-苯丙氨酸解吸收率达97．6%,单位质量L-Phe的氨水(0．5mol/L)消耗率仅为38．37L/kg。     

生物分离工程双语教学探索与思考

本文作者通过十余年对生物分离工程双语教学的研究,提出在优化教学内容,注重传授专业基础知识,介绍本学科的研究进展的同时,应用多媒体,网络资源等现代化教学手段及多元化的教学方法,提高双语教学质量和效果。经过14年的探索与实践,该课程已成效显著,于2005年荣获“国家级精品课程”称号,实现了全国生物工程类精品课程零的突破。     

超声酶促维生素A棕榈酸酯反应的动力学

考察超声辐照下影响合成维生素A棕榈酸酯反应的因素(溶剂、底物摩尔比、底物浓度、反应时间、酶量和超声功率),并优化了反应条件:在10 mL的正己烷溶剂中,0.164 g维生素A醋酸酯和0.32 g棕榈酸,在酶与维生素A醋酸酯的质量比为1∶4的固定化脂肪酶Novozym 435催化下,超声功率为90 W,反应6 h,酯化率可达82%。并对其动力学进行了研究,由非线性拟合得到动力学参数:最大反应初速率(rmax)为0.522 mmol/(min.g);维生素A醋酸酯的米氏常数为0.404 mmol/L;棕榈酸的米氏常数为0.034 mmol/L。     

改革实践教学,培养高素质的技术应用型人才

实践教学是实施素质教育,培养学生综合能力和工程素质的重要组成部分,也是衡量学校办学水平的重要标志之一,在高校教学改革和教学质量评估中亦是不可缺少的重要部分.本文结合南京工业大学制药与生命学院的实际,对实践性教学的改革作了初步的探讨.     

相转移催化法合成4-氯-2-硝基苯酚

本文于相转移催化条件下，以廉价易得的工业品对工氯苯为原料，经硝化，水解二步合成了4-氯2-硝基苯酚，得率较高。