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目的构建人磷脂酰肌醇4-磷酸酶Ⅱ型(inositol polyphosphate 4-phosphatase typeⅡ,INPP4B)重组慢病毒表达载体,并检测其在人雄激素抵抗型前列腺癌细胞株PC3中的表达。方法以人工合成的人INPP4B基因为模板,PCR扩增目的基因片段,克隆入pGC-FU载体构建重组质粒pGC-FU-INPP4B,将其与辅助包装原件PHelper 1. 0和PHelper 2. 0载体经Lipofectamine TM 2000介导共转染293T细胞,包装获得携带人INPP4B基因的重组慢病毒LentiINPP4B,免疫荧光法测定病毒滴度。用Lenti-INPP4B感染PC3细胞(Lenti-INPP4B组),以慢病毒Lenti-GFP(携带GFP基因)感染的PC3细胞为阴性对照,RT-PCR及Western blot检测PC3细胞中INPP4B m RNA水平和蛋白的表达,CCK8法检测PC3细胞增殖;Western blot检测PC3细胞中p-AKT水平。结果经PCR及测序鉴定,重组质粒p GC-FU-INPP4B构建正确;Lenti-INPP4B病毒滴度达2... 相似文献
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商务活动中互赠礼品就如同做一笔大生意,选择得好可以改善公司形象.选择得不好有可能适得其反。在2004年岁末.选择一份什么样的礼品送给你的生意伙伴呢? 相似文献
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中国自加入WTO,针对服务领域提出了一系列的对外承诺,其中在建筑业,勘察设计行业是对外开放比较彻底的一个行业。伴随着中国持续高速的经济发展以及城市化进程,无论是城市规划、基础设施建设还是房屋建设,整个设计行业都面临着空前的机遇与挑战,世界的目光纷纷投射到这个全球建筑业的新兴市场,国外的设计企业不同程度地进驻中国,同时,设计国际竞赛作为一种全新的竞争机制也应运而生。 相似文献
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长期以来,冶金工程中厂房内复杂的设备基础、钢结构、不规则的构筑物等只能用手工计算,工程量繁琐,工作量大,工期长。为此,对一系列建筑工程预算软件进行了研究和试验,发现尽管这些软件是针对商厦和住宅楼开发的,但通过举一反三的拓展思维,并对其做巧妙的变通和功能借用,最后找到了解决方法,缩短了工期,简化了工程量计算过程,提高了计算准确度。 相似文献
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