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以含有人α-乳白蛋白基因功能域的YAC(yeast artificial chromosome)为起始材料,构建了可以在动物乳腺高效表达外源基因的载体系统。根据已发表的人α-乳白蛋白基因序列,通过PCR的方法,扩增出了其5’端的837bp及3’端的1007bp片段,构建了整合型载体pRLA22。利用pRLA22在大肠杆菌中进行基因操作,可以将外源基因准确地置于乳白蛋白基因启动子控制之下。把重组的pRLA22导入含YAC的酵母菌后,高频率同源重组事件将会把外源基因插入YAC。本实验通过上述程序,将鸡的γ-干扰素基因cDNA序列导入了YAC。经过PCR检测,证明鸡的γ-干扰素cDNA序列已被重组到YAC的预定位置。因此,大肠杆菌载体pRLA22和含人的α-乳白蛋白基因的YAC,将构成能在动物乳腺高表达外源基因的有效载体系统。 相似文献
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本实验的目的是利用Cre/lox重组系统进行“友好”基因座的筛选,即利用一个两端带有lox位点的标记基因去转染动物细胞或生产转基因动物,获得可以高效表达外源基因的“友好”基因座。一旦筛选到好的基因座,就建成了一个可以在动物体稳定地高效表达外源基因的技术平台。为此,利用野生型loxP位点和含有一个点突变的lox511位点分别构建两个载体pSL-loxGFP和pSL-loxIFN。首先将含有GFP和新霉素基因的质粒pSL-loxGFP DNA转染牛胎儿成纤维细胞,并用G418筛选,挑选出发绿色荧光的细胞克隆。经增殖培养之后,再将含有鸡γ-干扰素基因的质粒pSL-loxIFN和含有Cre重组酶基因的质粒pBS185 DNA共转染发荧光的细胞克隆,筛选出发生重组后不再发光的细胞克隆。用PCR法检测了两个不发荧光的细胞克隆及发荧光的细胞克隆,并使用质粒pSL-loxIFN、质粒pSL-loxGFP及牛基因组作为对照。检测结果显示,在Cre重组酶的作用下,两个不发荧光的细胞克隆中,一个发生了基因置换,另一个发生了基因删除。以上实验表明,巧妙地用Cm/lox重组系统,可以构建一套使外源基因在动物体内定点地高效表达的技术体系。 相似文献
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随着社会的发展,国内的教育业和云计算技术产生有效融合,为校园教育提供新的教学模式。但目前国内在教学高峰期间会出现教学资源下载过慢的问题,严重影响校园的教育效果。文章基于此展开研究,首先阐述云计算的概念和特点,其次概述教学资源预约服务模式的构成要素,最后对云计算环境下教学资源的核心内容设计进行详细介绍,包括预约服务单、资源反馈单的设计、资源的热度值设计、资源冷却函数的设计。 相似文献
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为了满足烟草行业的迅速发展及生产工艺的特殊要求,联合工房在卷烟行业中得到了广泛的应用。联合工房具有空间高、储存物质多、内部通道错综复杂、火灾扑救难度大等特点,一旦发生火灾,极易造成重大的财产损失。为了保障新工艺下烟草生产和储存的消防安全,对联合工房的自动灭火系统进行讨论,为联合工房的自动灭火系统设计提供参考。 相似文献
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目前箱式储丝物流系统中常用的送丝模式AGV(Automatic Guided Vehicle)、输送机、环形穿梭车等系统,都存在着输送效率较低、响应时间过长等缺点,为此设计了具有无接触能量传输技术和转轨功能的地面支撑式EMS柔性送丝物流系统。该系统主要由EMS小车、轨道系统、供电系统、控制系统组成,通过采用自动转轨机构,形成了EMS轨道路径的多环路、嵌套式运行模式,实现了烟丝箱与风力送丝机组的快速、准确对接和后端供料的连续性。通过仿真分析表明,地面支撑式EMS柔性送丝物流系统与传统的环形穿梭车输送方式相比,有效降低了车辆的空载运行比例,且车辆数量可减少40%以上,具有较高的输送灵活性和快速响应能力,尤其适用于流量大、距离长、工艺布局复杂的物料输送。 相似文献
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以γ-聚谷氨酸(γ-PGA)为材料,以顺铂(CDDP)作为装载药物,制备CDDP/PGA-PAE纳米微球。通过纳米粒度仪、红外光谱、可见光分光光度计对所制得的颗粒的粒径、粒度分布、Zeta电位、结构、包封率和载药量进行表征。以MTT实验进行体外初步药效学考察。结果显示,CDDP/PGA-PAE纳米微球制备成功,纳米微球的平均尺寸为148.4±4.7 nm, PDI=0.266±0.032。MTT实验结果显示,CDDP/PGA-PAE纳米微球浓度为100μg/mL时,人结肠癌LoVo细胞的存活率仅为33.80%±1.01%,说明CDDP/PGA-PAE纳米微球具有较高的CDDP利用率,为聚谷氨酸的应用提供了理论基础。 相似文献