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71.
目的:原核表达抗克伦特罗重组单链抗体,对表达的包涵体蛋白进行提取和纯化,并鏊定重组抗体特性.方法:通过温度诱导大肠杆菌表达抗克伦特罗单链抗体,超声破碎菌体细胞,采用不同洗涤溶液提取包涵体.以不同变性剂溶解包涵体,Ni-NTA亲和柱纯化后,经脉冲稀释法将其复性.超滤及透析浓缩蛋白复性液,经Ni-NTA亲和柱二次纯化,得到纯化重组目的蛋白.通过SDS-PAGE电泳分析重组目的蛋白纯度,采用Western bloning和间接竞争EUSA对所制备的抗克伦特罗重组单链抗体特异性进行鉴定.结果:以大肠杆菌Es-cherichia coli BL21(DE3)为宿主菌诱导表达重组单链抗体,产率最高,占菌体蛋白的31%.以1 mol/L尿素洗涤包涵体,6 mol/L盐酸胍为变性剂,经Ni-NTA亲和柱纯化,所得复性重组单链抗体蛋白的纯度达96%.Western blotting分析显示,纯化并复性后的单链抗体可与鼠抗His标签蛋白单克隆抗体发生特异性的结合反应.间接竞争ELSIA结果表明,该重组抗体IC50值为3.35 ng/mL,与沙丁胺醇等结构类似物无交叉反应.结论:原核表达制备的抗克伦特罗重组单链抗体具有较好的抗原结合活性及特异性,为进一步开展克伦特罗的免疫快速检测研究奠定基础. 相似文献
72.
73.
张宏斌 《河南水利与南水北调》2013,(13):13-14
1水利概况洛阳市地处豫西丘陵山区,人多水少,全市水资源总量28.09亿m3,人均水资源量不足450m3,约为全国人均占有量的1/5。建国以来,特别是改革开放以来,洛阳市的水利建设事业蓬勃发展,成就斐然。目前,全市境内共建成各类水库156座,总库容157.18亿m3,修筑河道堤防约900km,其中重点堤防537km,初步形成了城乡防洪安全保障体系;全市已建成万亩以上 相似文献
74.
75.
张宏斌 《西北水资源与水工程》2001,12(3):49-52
本文采用自然正交函数分析法对黄河、洛河、渭河洪水在三门峡库区遭遇进行分析探讨,得出只要预测未来时间系数就可预测未来洪水相遇的可能性大小,并得到了比较可靠的结果,在三门峡库区及其它河流的洪水遭遇分析具有重要的实用价值。 相似文献
76.
钻孔灌注桩技术在基础工程领域中占据了主导地位。钻孔灌注桩是采用不同的钻孔方法,在地层中按要求形成一定形状(断面)的进孔,达到设计标高后,将钢筋骨架放入孔中,再灌注混凝土,成为桩基础的一种工艺,从成孔质量保证、混凝土配合比优化设计等几方面对桥梁钻孔灌注桩质量保证措施进行阐述。 相似文献
77.
混凝土桥梁耐久性影响因素及工程实践分析 总被引:1,自引:0,他引:1
根据混凝土桥梁耐久性研究进展,结合近年来桥梁工程建设实践,从设计、施工,以及外部环境等方面,分析了混凝土桥梁耐久性的主要影响因素,并提出改善混凝土桥梁耐久性能的具体措施. 相似文献
78.
79.
ⅠB磨辊剥刮率的大小及ⅠB磨辊的齿角、齿数、斜度、排列、转数等技术参数对小麦出粉率和动耗有直接影响;不同粉路、不同原粮、清理流程、工艺操作、重筛设置等诸多因素对ⅠB磨辊的影响,也间接影响小麦出粉率: 相似文献
80.