雌激素拮抗剂ICI-182780对ZDY101调节 CHOm2细胞M2受体密度的影响

CHOm2细胞加雌二醇、ZDY101或等体积溶媒DMSO培养后通过3H-NMS结合反应测定M受体密度,并与同时加雌激素受体拮抗剂ICI-182780的细胞作对比.结果显示雌二醇组M受体密度为(123.7±23.9)fmol@mg-1,加ICI-182780后为(84.8±19.8)fmol@mg-1;相应的DMSO对照组为(89.6±22.9)fmol@mg-1,加ICI后为(66.9±22.5)fmol@mg-1;雌二醇组加ICI-182780后M受体密度降低的幅度远大于DMSO对照组.ZDY101组M受体密度为(147.3±36.9)fmol@mg-1,加ICI-182780后为(120.8±40.4)fmol@mg-1;相应的DMSO对照组为(95.9±24.0)fmol@mg-1,加ICI-182780后为(77.0±22.3)fmol@mg-1.表明雌激素和ZDY101都具有的提高M受体密度的功效,雌激素的药效可被ICI抑制,而ZDYl01的药效不被ICI抑制,说明ZDYl01有不同于雌激素的作用机制.     

YSJ-76液闪计数仪配接AppleⅡ微机

1976年我们与上海交大微机研究室合作成功地实现了YSJ-76液闪仪与Mic-80微机的配接工作,使仪器具有了数据处理和自动控制的功能。随着近年来放射免疫分析法和放射配基受体分析法的进展,对数据处理、质量控制提出了更高的要求。原来的液闪仪Mic-80系统的功能就显得有所不足,主要是数据不能保存,数据处理不够完善,此外操     

M2受体cDNA转染CHOm2细胞的某些药理学和生物学特性

转染ｍ１、ｍ２和ｍ４ ｃＤＮＡ的ＣＨＯ细胞膜受体与＾３Ｈ－ＱＮＢ结合,能给出典型的的饱和曲线,Ｈｉｌｌ系数接近１。单位点竞相结合表明,对ＰＺＰ抑制能力为ＣＨＯｍ１〉ＣＨＯｍ４〉ＣＨＯｍ２,对ＭＥＴＨ抑制强度为ＣＨＯｍ２〉ＣＨＯｍ４〉ＣＨＯｍ１。与药理学ＰＺＰ对Ｍ１受体的亲和力最高和ＭＥＴＨ对Ｍ２的亲和力最高是一致的。ＣＨＯｍ２对Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ和Ｃａｒｂａｃｈｏｌ影响ｃＡＭＰ的结果,证明该Ｍ受体     

ZMS对老年大鼠脑M受体与G-蛋白偶联活性的影响

以非ＧＴＰａｓｅ水解性的［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ在激动剂Ｃａｒｂａｃｈｏｌ作用下和Ｇ－蛋白不可逆结合,检测大鼠脑Ｍ受体与Ｇ－蛋白偶联活性,同时观察不同剂量ＺＭＳ对其活性和学习记忆的影响。结果老年组Ｇ－蛋白活性低于青年组,中、大剂量组优于老年组,并能改善学习记忆能力。Ｔａｃｒｉｎｅ无明显作用。提示老年大鼠Ｍ受体与Ｇ－蛋白偶联可能有障碍,ＺＭＳ对大鼠学习、记忆的促进作用可能与提高Ｍ受体与Ｇ－蛋白偶联活性有     

[35S]-甲硫氨酸掺入法测定某些补益药活性成分对 Aβ分泌速率的影响

[35S]-甲硫氨酸掺入法测定细胞Aβ分泌速率,观察知母活性成分ZMS和黄芪活性成分AST和HT,及两药合用对Aβ生成速率的影响.用[35S]-甲硫氨酸标记转染APP695基因的细胞,所获细胞上清以Aβ22-35单克隆抗体进行免疫共沉淀,结合Western印迹法,以配对对照(加载体)的Aβ条带灰度值为l,计算各用药组灰度的相对强度.本方法能稳定地测到细胞在24-72 h内分泌的Aβ量,同一受试样品在不同批实验中的变异(CV)在17%-32%之间.在培养液中中药活性成分的浓度为1×l0-5mo1/L时,受试物质中AST及ZMs AST合用对Aβ的分泌速率有明显抑制作用(P＜0.01).另两种受试物则无作用.黄芪活性成分AsT有抑制Aβ分泌的作用,ZMs与AST两药合用作用更为显著.     

稳定同位素稀释－质谱分析法用于肝硬化病人血浆α－酮异己酸的定量分析

用稳定核素稀释－质谱分析法对２０例肝硬化病人和３０例正常人血浆α－酮异己酸（ＫＩＣ）含量进行了测定，结果病人和正常人分别为２１．４１±１．６４、４４．０７±１．５１μｍｏｌ／Ｌ（±ＳＥ），团体ｔ检验差异非常显著（Ｐ＜０．００１）。对肝硬化时这一变化的意义及可能原因作了简要讨论。     

稳定同位素稀释一质谱技术分析KIC的负化学电离法

α－酮异己酸（ＫＩＣ）是亮氨酸在体内经转氨后的产物，本文以Ｄ３－ＫＩＣ为同位素稀释内标准物，经α－Ｂｒ－五氟苯酯化后，用ＧＣ／ＭＳ负化学电离法测定血浆ＫＩＣ的浓度。分析精度：批内ＣＶ为０．７９％，批间ＣＶ为０．７８％，对１０例正常人血浆分析结果，平均含量为４４．０７±２．８７μｍｏｌ／Ｌ。     

METABOLIC KINETICS OF BRAIN MUSCARINIC CHOLINERGIC RECEPTORS IN NORMAL AND HYPOTHYROID MICE

A technique for studying in vivo the production rate and turnover rate constant of mouse brain M-receptors was established. A single injection of 25 mg / kg of Benzilylcholine Mustard to living mice resulted in 90 % irreversible block of brain M-receptors. The time course of the receptor density was then monitored by 3H-QNB binding assay and the production rate and turnover rate constant were calculated from the time course curve with a computer program. It was found that in normal mice the turnover rate constant was about 0.035 h-1 (half-life was about 20 h) and the production rate was 30-42 fmol / (h ·mg protein). Parallel experiments revealed a significant slow down of the turnover of brain M-receptors in hypothyroid mice (turnover rate constant was 0.0257±0.0012 h-1 in hypothyroid vs. 0.0356±0.0021 h-1 in normal) while the production rate was not changed significantly. The results suggest that thyroid hormones have a regulatory action on the turnover of brain M-receptors and the elevation of brain M-receptor density together with slow down of the turnover of brain M- receptors is probably one of the important mechanisms relevant to the brain dysfunction in hypothyroidism.     

β-肾上腺素受体放射配基分析法的条件探讨

本文对β-肾上腺素受体放射配基分析法中的缓冲液、膜受体制备条件、胰蛋白用量、结合与游离配基的分离方法及非特异性结合的控制等方面作了探讨和改进,使方法的稳定性和可靠性有了明显的提高,并对所建方法进行了较完整的考核。