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目的 建立实时荧光环介导等温扩增技术(real-time fluorescence loop-mediated isothermal amplification, RF-LAMP)快速检测大肠杆菌(Escherichia coli, EHEC)O157的分析方法。方法 针对大肠杆菌O157编码O抗原的rfbE基因设计引物。对该方法进行特异性验证, 同时对大肠杆菌O157:H7纯培养物的灵敏度和人工污染牛肉的检出限进行测定, 对61份牛肉样品进行RF-LAMP检测, 并与GB 4789.36-2016方法进行比较, 评价RF-LAMP方法的敏感性、特异性和准确度。结果 10株大肠杆菌O157呈阳性结果, 21株非大肠杆菌O157呈阴性结果, 该方法特异性良好。纯培养物检测的灵敏度为5.1 CFU/mL, 人工污染的牛肉样品的检出限为5.1 CFU/g。结论 本研究建立的RF-LAMP技术特异性好、灵敏度高、操作简单, 可实时监测扩增反应, 避免了繁琐的电泳过程, 实现了对大肠杆菌O157的快速检测, 对大肠杆菌O157引起的食源性疾病的预防和控制具有重要意义。 相似文献
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用同位素稀释电感耦合等离子体质谱法测定海水中的痕量铅 总被引:3,自引:0,他引:3
5 -磺基 -8-羟基喹啉用作微柱流动注射在线分离、富集和电感耦合等离子体质谱分析流程中的螯合剂 ,与铅反应生成铅螯合物被硅酸镁吸附剂吸附 ,实现痕量铅的分离、富集。对联用系统的参数如螯合剂用量、淋洗条件、洗脱条件和进样量等进行最优化 ,测定标准水样和加标海水的铅回收率分别为 1 0 1 %和 97.9% ,相对标准偏差为± 0 .98% ,检测限为 0 .2 0 4 μg/ L。可应用于生物、环境等高盐样品中铅的在线分离测定 相似文献
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采用双功能螯合剂[(R)-2-氨基-3-(4-氨基苯基)丙基]-(S-S)环己烷-1,2二乙三胺五乙酸(P-Nh2-Bn-Chx-A"-Dtpa)制备重金属铅全抗原,分别用戊二醛法、重氮化法、将螯合剂与牛血清蛋白(BSA)连接,再将合成的蛋白螯合剂复合物与铅离子螯合得到两种铅全抗原BSA-P-Nh2-Bn-Chx-A"-Dtpa-Pb,蛋白与铅的偶联比分别为1:15.64与1:42.95。针对戊二醛法偶联率偏低的问题,研究进行了戊二醛法制备抗原方法的优化,将戊二醛法制备的蛋白螯合剂复合物与铅离子进行两步螯合得到两步螯合法的戊二醛法抗原BSA-P-Nh2-Bn-Chx-A"-Dtpa-Pb,其偶联率提高到1:20以上。将以上三种抗原用于小鼠免疫实验并检验其免疫效果,结果表明两步螯合法的戊二醛法抗原BSA-P-Nh2-Bn-Chx-A"-Dtpa-Pb,免疫原性最好,免疫小鼠效价可达1:102400以上。 相似文献
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建立了稀释酸微波消解处理茶叶样品的新方法,并结合国外方法 EPA6020对仪器和测定过程进行校准。采用微波消解-ICP-MS测定了8种红茶茶叶中16种微量元素(V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、As、Se、Sr、Ag、Cd、Cs、Ba、Pb)的质量分数,运用主成分分析法和箱线图研究16种微量元素的分布特征。结果表明,当微波消解酸为6 mL浓度2.1±0.2 mol/L的硝酸和2 mL 30%的双氧水溶液时,16种元素的回收率变化范围为90%~110%,线性相关系数R20.999 5,RSD5%,而且检出限低,说明该稀释酸体系可以替代浓酸体系。Fe、Zn、Mn等大量人体必需微量质量分数均符合国家标准,但是有害重金属元素As质量分数均高于限量值,除了S1样品中Ba、Sr,S6样品中Se和S8样品中Ag质量分数表现异常外,16种微量元素质量分数在样品中整体分布较为集中。此外,已报道Cd元素的质量分数值是测定平均值的43.53倍,As元素质量分数平均值是已报道值的12.53倍,结果说明在红茶茶叶的生产过程中As元素污染严重,有轻度的Cr污染,而Cd元素在红茶茶叶的种植、采摘、加工和运输过程中得到了很好的控制。研究也表明V、Sr、Cr、Ba、Fe、As和Zn为红茶茶叶的主成分元素,同时对8种红茶茶叶做出了综合评价得出S1为最佳选择。 相似文献