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目的构建大肠杆菌色氨酸操纵子基因突变株,提高邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的产量。方法利用依赖于DpnⅠ酶的PCR方法突变表达载体pET-22b(+)-Trp Operon上的关键位点,PCR扩增Trp OperonM基因,构建pET-22b(+)-Trp OperonM重组表达质粒,经酶切及测序鉴定正确后,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。制备粗酶液,经比色法测定邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的活性。结果 PCR扩增产物可见约7000bp的Trp OperonM条带;所构建的重组表达质粒经酶切及测序鉴定正确;邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的活性比大肠杆菌BL21(DE3)空菌分别提高了4.5倍和5.2倍。结论已成功构建了大肠杆菌色氨酸操纵子基因突变株BL21(DE3)/pET-22b(+)-Trp OperonM,邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的活性均有提高,为高产色氨酸基因工程菌的构建奠定了基础。 相似文献
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83.
在远距离目标轨迹测量系统中,当前的长焦相机由于CCD尺寸限制一般视场角度较小,无法实现对目标的可靠捕获。在对比当前的几种大视场拼接成像方法后,针对远距离目标测量系统的要求提出了一种通过控制单个相机进行圆锥旋转来模拟4相机阵列实现大视场成像的方法。设计了实验样机对该方法进行验证。首先根据该成像方法设计了相机运动控制方案和相应的机械结构,然后设计了相机的触发控制以及图像数据的传输和处理流程,最后使用该样机进行了实验。实验中样机经校准后采集到了相对位置正确的子视场图像,并拼接获得了大视场图像。使用视场角度为1.02°的小视角相机,实现了4个有一定程度重合的子视场2×2拼接,最终获得了1.93°的大视角。该方法为远距离目标测量系统中的目标捕获子系统设计提供了新思路。 相似文献
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为了满足田兴铁矿阶段空场嗣后充填采矿法出矿工艺需要,采用遥控铲运机进入大空区出矿,有效地解决了工作人员的人身安全问题,提高了矿山的采矿效率,降低了矿山生产运营成本。国外先进矿山已经成功实现了井下无轨设备自动化,无人采矿、自动化矿山设备在国内矿山的应用是发展趋势,同时也是势在必行的。 相似文献
85.
目的克隆人CD271基因,并在大肠杆菌中表达。方法采用RT-PCR技术从人REH细胞系中扩增CD271基因,将其克隆入pET22b表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行纯化及Western blot鉴定。结果重组表达质粒pET22b/CD271经双酶切鉴定,可见1197bp的目的基因条带。表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约75000处可见表达条带。IPTG浓度为0.5mmol/L时,目的蛋白表达量最高。纯化后蛋白纯度为82.5%。Western blot检测表明纯化后的蛋白具有良好的反应原性。结论已成功克隆了人CD271基因,并在大肠杆菌中获得表达。 相似文献
86.
以海藻酸钠水解产物聚甘露糖醛酸(PM)为原料,通过聚甘露糖醛酸-乙二胺(PM-EDA)中间体与酚酸接枝共聚,制备了8种PM的酚酸(PA)接枝共聚物酚酸-g-聚甘露糖醛酸(PA-g-PM),并探究了PA结构对8种PA-g-PM抗氧化活性的影响。在nPM:nEDA=1:1.5,PM与两种活化剂碳二亚胺(EDC)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)的摩尔比1:2:1,活化0 h,pH 8.0条件下,反应24 h,获得最高取代度(17.27%)的PM-EDA。PM的PA-g-PM接枝率在4.171±0.16 ~ 8.880±0.32 mg GA/g之间。UV-vis、FT-IR、XRD表征证实酚酸已成功接枝到PM上获得PA-g-PM。相比PM,8种PA-g-PM的对DPPH的清除率和对铁的还原力均显著提升。PA-g-PM的抗氧化性能与其中的酚羟基个数呈正相关关系,对位酚羟基PA-g-PM的抗氧化性能优于邻位酚羟基PA-g-PM的抗氧化性能,PA-g-PM中的酚羟基被甲氧基取代其抗氧化性能减弱。以期本研究结果为海藻酸钠在食品、化妆品、医药等行业高值开发利用奠定理论基础。 相似文献
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由于电厂循环水除垢处理多采用有机磷酸盐处理法,对微生物有助长作用.因此,藻类繁殖较为严重,必须对循环水进行杀菌灭藻处理.目前常用的杀菌灭藻剂为氧化型和非氧化型两种,前者主要有液氯、漂白粉、二氧化氯、臭氧等,后者主要有氯代酚类、季胺盐类和丙烯醛类等. 相似文献
89.
90.