基于链替代扩增-纳米金比色直观检测单链核酸方法的研究

[目的]将链替代扩增技术与核酸修饰纳米金积聚变色的光学特性相结合,设计了一种新型的直观检测3′端暴露单链核酸的方法,实现对单链核酸的高灵敏度检测.[方法]设计一条含有硫代修饰酶切位点的单链核酸(ZDNA),其酶切位点5′端是能将核酸修饰纳米金变色的Linker序列,3′端是能与Target单链核酸3′端完全互补的H序列.当无Target存在时,Linker会充分暴露,能使核酸修饰纳米金积聚呈现紫色;但是当Target存在时,会与H序列完全互补,作为ZDNA的引物进入链替代扩增循环,形成的新链不断与Linker序列互补,不能使核酸修饰纳米金积聚呈现红色,从而间接检测了Target单链核酸.[结果]通过一系列试验确定检测体系,具体为:40 μl修饰纳米金溶液(0.52 nmol/L)加入10 μl酶循环体系(ZDNA 20 nmol/L,33 mmol/L Tris-HCl(pH值7.9);10 mmol/L MgCl2;66 mmol/L NaCl;0.5 mmol/L dNTP;0.1 mg/ml BSA;0.05 U/μl klenow;1 U/μl Hinc II),直观或紫外检测并绘制Target浓度与纳米金积聚程度的标准曲线, 表明Target浓度在1～200 pmol/L的范围内呈现良好的线性关系,R2=0.946,最低检测限是1 pmol/L.[结论]链替代扩增-纳米金比色检测单链核酸方法简便、直观、成本低,与传统修饰纳米金比色检测DNA方法相比,灵敏度提高了104倍.     

梅花鹿鹿茸细胞端粒酶活性及其mRNA表达的检测

[目的]研究鹿茸生长期端粒酶的表达,为揭示鹿茸生长发育的调控机制提供了新思路.[方法]在鹿茸快速生长阶段,采用改进的TRAP(端粒重复序列扩增技术)法检测鹿茸顶端增殖区的间充质层、前软骨层和软骨层细胞及下端成熟区的端粒酶活性.同时,采用RT-PCR的方法检测各组织细胞中端粒酶催化亚基(TERT)mRNA的表达水平.[结果]在顶端增生区各组织细胞中均检测到了不同程度的端粒酶活性,间质细胞、前软骨细胞和软骨细胞中的相对端粒酶活力分别为91.2、46.4和13.7,而在成熟区组织中则检测不到端粒酶活性.RT-PCR法检测的各组织细胞中TERT mRNA的表达水平与端粒酶活性检测结果一致.[结论]在鹿茸快速生长阶段,其增殖区表达端粒酶,并且端粒酶活性随组织层细胞的分化程度的增高而逐渐降低,说明端粒酶可能在鹿茸的生长过程中起重要的调控作用.     

结合态多酚改善肠道氧化应激与肠道屏障的研究进展

食品中富含种类丰富的酚类化合物,并且酚类化合物是天然的抗氧化剂和重要的功能因子。结合态多酚是酚类化合物的一种存在形式,其存在于提取过游离态多酚的残渣中,通过酯键、糖苷键、醚苷键等形式与其他物质相结合。肠道作为人体免疫防御的最前线,易遭受外源性和代谢性氧自由基损伤,诱发肠道氧化应激。肠道氧化应激会通过多种途径破坏肠上皮细胞间的紧密连接状态,导致肠上皮屏障功能受损和肠道通透性增加,进而诱发各种疾病。结合态多酚作为一种天然的抗氧化剂,在肠道中具有较完整的结构和稳定的活性,并通过调节免疫功能,以及影响炎症因子、抗氧化酶和屏障蛋白的表达,对肠道氧化应激以及肠道屏障功能的受损均有着改善作用。     

试论城市存量划拨土地使用权改革与按揭

一在传统计划经济体制下，我国城市国有土地资源配置和使用的主要形式甚至是唯一形式就是行政划拨制，其主要特征就是依靠国家的强制力量将土地划拨给用地单位（主要是国有企业），由它们无价无限期无流动地使用，这种土地使用制度是与传统计划经济体制和外延扩大再生产方式相适应的。在实践中，它曾为我国大规模工业化和城市化提供了大量的廉价土地，避免了许多国家所经历的土地私有权对国家大规模经济发展和经济增长所产生的巨大阻碍作用。然而，这种行政划拨制的土地使用制度是历史的产物，它是在特定的历史条件下形成的，并与当时的社会…     

基于核相关滤波的多尺度绝缘子目标跟踪

针对输电线路巡检视频中的绝缘子目标跟踪背景复杂,不能适应绝缘子尺度变化的问题,提出了一种基于核相关滤波的多尺度绝缘子目标跟踪算法。该算法首先提取绝缘子Hog特征,通过最小化决策函数来训练一个分类器,得出绝缘子目标位置,最后引入多尺度估计方法,来确定绝缘子目标的大小,从而提高了绝缘子跟踪的精度。实验结果表明,本文提出的跟踪算法能够适应绝缘子尺度变化且与传统Camshift的算法相比,具有较好的跟踪性能。     

某装配整体式建筑施工特点介绍

近年来,国家、各省市、自治区不断出台推进装配式建筑发展的政策文件,大力推进装配式建筑应用,主要有全装配式和装配整体式两种,其中装配整体式建筑是目前行业中采用较多的形式。本文结合某装配整体式建筑的建设过程,对装配整体式建筑施工的相关问题进行梳理,并提出相关意见建议:应注重装配式建筑设计阶段针对PC构件应用的整体规划,以及实施阶段设计图纸的有效转化,将设计、生产、施工流程贯通,严格控制PC构件质量,方能保证装配式建筑技术的优越性得到发挥。     

含腐植酸喷施宝水溶肥料对安吉白茶产量和经济效益的影响

通过不同处理对比了含腐植酸喷施宝水溶肥料对安吉白茶产量和经济效益的影响。结果表明,使用含腐植酸喷施宝水溶肥提高了安吉白茶产量,与对照相比,含腐植酸喷施宝水溶肥使安吉白茶平均百芽重增加1.7~2 g,增产7.56%,增产效果达极显著水平;可提前茶芽采摘时间2天,平均增收670元/亩。     

工业控制以太网对外的数据安全传输

工业控制以太网作为一种特殊的网络．直接面向生产过程，肩负着工业生产运行一线测量与控制信息传输的特殊任务。但是．越来越频繁的工业控制系统入侵事件，如2010年的伊朗布舍尔核电站、2011年美国伊利诺伊州城市供水系统事件为我们敲响了警钟，黑客攻击正在从开放的互联网向封闭的工控网蔓延。     

钴基合金在阀门密封面上的应用

介绍了石化、火力发电及核能等领域阀门密封面常用堆焊钴基合金的化学成分、牌号类别、主要性能和几种常用的堆焊方法及质量控制。     

一种引擎驱动的电子政务数据交换平台

异构的业务模型、软硬件平台、数据结构和复杂网络环境下的数据交换和共享问题是长期以来困扰电子政务应用中的难题。将核心交换共享逻辑封闭在引擎中,并以此来驱动与底层无关的数据交换体系,较好地解决了电子政务交换平台上跨部门的数据交换和共享问题。实践表明,该平台系统具有较强的可扩展性、安全性和可靠性,具有推广价值。