治疗性乙型肝炎病毒载体疫苗的构建

目的研制治疗慢性乙型肝炎的重组修饰的Ankara痘病毒(MVA)载体疫苗。方法将HBV的表面抗原基因克隆到MVA病毒的重组载体pSC11上,重组质粒与空MVA病毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),进行同源重组。经过10轮筛选,挑选出阳性的重组MVA病毒。经PCR鉴定,感染不同细胞系,确定病毒表达量。结果获得目的重组MVA病毒,ELISA检测到表面抗原在不同细胞系中的表达。结论已成功地构建了表达HBV表面抗原的重组MVA病毒。     

纤维对薄层砂浆早期塑性收缩的影响

提出了一种利用视频显微镜技术来测量薄层砂浆早期塑性收缩的新方法,研究了纤维种类、聚丙烯纤维掺量及长度、纤维几何形态对薄层砂浆早期塑性收缩的影响。结果表明随着聚丙烯纤维掺量的增加,砂浆的塑性收缩值有所减小,说明聚丙烯纤维的掺入可以有效地抑制砂浆的塑性收缩;3mm、12mm长的聚丙烯纤维较6mm、9mm长的聚丙烯纤维对砂浆塑性收缩的抑制作用大;在抑制砂浆收缩性能上圆形截面纤维优于Y形截面纤维;掺聚丙烯纤维试样的塑性收缩较掺玄武岩纤维试样小,但两者的差距不大。     

水利工程施工管理中存在的问题与改进措施

水利工程施工管理的重要性出发,首先分析水利工程施工管理的内容,结合多年的工作经验总结目前水利工程施工管理中存在问题,对影响水利工程施工质量的原因进行分析,并提出了一些合理化建议,最后针对存在的问题,提出相应的改进措施,采取行之有效的改进手段,为水利工程施工的顺利进行提供了坚实的基础。     

基于双混频时差法实现时域频率稳定度测量

在对基于DDS技术的公共振荡器设计、高速数据传输设计以及基于数字测频技术改进等技术难点分析的基础上,论述了基于双混频时差法的时域频率稳定度测量方法.该方法可同时测量短期和长期频率稳定度,测量精度高,并可进行无间隙测量.     

面向聊天机器人的多注意力记忆网络

如何对多轮的对话历史进行建模和推理是构建一个智能聊天机器人的主要挑战之一.基于循环或门控的记忆网络已经被证明是进行对话建模的有效方式.然而,这种方式有两个缺点,一是使用复杂的循环结构,导致计算效率较低;二是使用代价较大的强监督信息或先验信息,不利于扩展和迁移应用到新的领域.针对上述问题,本文提出了一种端到端的多注意力记忆网络.首先,该网络采取结合词向量和位置编码的方式对文本输入进行表示;其次,使用并行的多层注意力在不同子空间捕获对话交互中的关键信息来更好地建模对话历史;最后,通过捷径连接的方式叠加多注意力层管理信息流,实现对建模结果的多次推理.在bAbI-dialog数据集上的实验表明,该网络可以有效地对多轮对话进行建模和推理,而且具有较好的时间性能.     

促凋亡蛋白BID多克隆抗体的制备与鉴定

目的制备抗BID的多克隆抗体,用于检测凋亡信号转导过程中BID蛋白的表达。方法采用PCR技术合成编码BID特异性肽段的基因,构建GST融合基因表达载体,在E.coli BL21中诱导表达GST-BID多肽的融合蛋白,经Glutathione Sepharose 4B纯化后免疫家兔,免疫血清经纯化后,得到抗BID的多克隆抗体,经Western blot鉴定其特异性。结果通过PCR扩增获得了BID肽段的编码基因;pGEX-6P-1-BID多肽重组质粒经酶切鉴定及测序证明构建正确;在E.coli BL21中表达了GST-BID多肽融合蛋白;纯化后蛋白纯度达95%;制备的抗BID多克隆抗体能够特异地识别BID蛋白。结论所制备的抗BID多克隆抗体可特异性检测BID蛋白。     

HIV-1中和抗体检测方法的建立

目的以荧光素酶作为报告基因,表达假病毒,建立快速、有效的HIV-1中和抗体检测方法。方法将HIV-1中国流行株B/C重组亚型和C亚型Envelope基因的真核表达质粒分别与带有荧光素酶报告基因的pNL4-3.Luc.R-E质粒共转染293T细胞,培养48h后收获含有假病毒的上清液,感染表达CD4受体和一个辅助受体CCR5的HOS细胞,培养72h后,裂解细胞,检测荧光素酶含量。结果HIV-1的B/C重组亚型和C亚型Envelope基因真核表达质粒分别与pNL4-3.Luc.R-E质粒共转染的293T细胞,均有HIV-1结构蛋白Gagpol和Env的表达,相对分子质量分别为55000和160000,用产生的假病毒感染HOS-CD4-CCR5/CXCR4细胞后,产生的荧光素酶含量明显高于对照组。结论已建立了瞬时转染检测HIV-1中和抗体的方法,为今后抗体样本及病毒样本的检测提供了参考。     

诗经的魅力——浅谈诗经的现实主义传统对中国文化的影响

<诗经>是我国最早的一部诗歌总集,共收录周代诗歌305篇.原称"诗"或"诗三百".<诗经>是中国韵文的源头,是中国诗史的光辉起点.<诗经>先秦称为<诗>,或取其整数称<诗三百>.西汉时被尊为儒家经典,始称<诗经>,并沿用至今.<诗经>是一部伟大的文学作品,也是一部人们的生活史诗,从"关关雎鸠,在河之洲.窈窕淑女,君子好逑"到"有狐绥绥,在彼淇梁.心之忧矣,之子无裳".在"蒹葭苍苍,白露为霜.所谓伊人,在水一方.溯洄从之,道阻且长.溯游从之,宛在水中央"感受对爱情的最真挚描绘,感受最质朴和贴切人心的爱情;"采薇采薇,薇亦柔止.     

辊锻新工艺在煤矿机械制造中的应用和发展

<正> 当前,企业更新设备,改进生产工艺,节约能源,降低材料消耗,提高产品性能和质量,是现有企业进行技术改造的方向。因此在煤矿机械制造中必须广泛采用新设备,新工艺。一、辊锻工艺特点辊锻是一种先进的锻压工艺,是锻造生产中重要的工艺方法之一。辊锻过程是坯料在一对旋转的辊锻模中通过,借助模槽对金属的压力,使其产生塑性变形,从而获得所需要的锻件或锻坯(见图1)。     

稳定表达HIV-1病毒样颗粒的293细胞系的筛选及其稳定性

目的获得高效、稳定表达含有HIV-1主要结构蛋白gag、pol和env的病毒样颗粒的293细胞系。方法选择合适的真核细胞表达质粒与带有抗性基因的载体,共转染293真核细胞,用含有抗性的培养基筛选出稳定表达细胞株。结果HIV-1的gag、pol和env蛋白均在293细胞中获得了表达,且不同代次的293细胞中蛋白表达情况无明显差异。结论成功筛选了稳定表达HIV-1病毒样颗粒的293细胞系,为进一步开发艾滋病疫苗奠定了基础。