Vif-△N28和Cullin5-N138蛋白的表达及纯化

目的 获得高纯度的Vif-△N28和Cullin5-N138蛋白.方法 以Vif/VR1o12质粒为模板,PCR扩增出Vif-△N28基因并插入pRSETB质粒.将构建的原核表达载体Vif-△N28/pRSETB以及已有的Cullin5-N138/pRSETB质粒分别转化大肠杆菌BL21（DE3）,经IPTG诱导表达,产物经Ni-NTA离子纯化柱纯化、复性.结果 所表达的Vif-△N28和Cullin5-N138蛋白约占各自菌体总蛋白的20%,纯化后蛋白纯度均可达90%以上.结论 已成功构建了Vif-△N28原核表达质粒,并在大肠杆菌中高效表达,获得了可溶性的纯化的Vif-△N28和Cullin5-N138蛋白.     

人乳头瘤病毒16型晚期蛋白真核表达质粒的构建

目的克隆宫颈癌病理组织中人乳头瘤病毒16型(HPV16)晚期蛋白(L1)的基因,并构建真核表达质粒,为制备预防性疫苗奠定基础。方法采用PCR法从宫颈癌病理标本中扩增出HPV16-L1基因,与pMD18T载体连接,测序并构建真核表达质粒(pVAX1L1),瞬时转染Cos7细胞,利用免疫组化技术检测表达产物。通过小鼠淋巴细胞转化试验检测免疫原性。结果所得L1基因的序列与GenBank中序列比较存在若干变异,并由此引起相应的氨基酸发生变化。pVAX1-L1瞬时转染Cos7细胞,经免疫组化技术检测到棕黄色免疫复合物的形成,说明有表达产物L1蛋白产生。淋巴细胞转化试验结果显示,试验组与对照组差异有显著意义。结论宫颈癌病理组织中HPV16L1基因序列存在一定程度的变异,所得L1基因表达产物具有生物学活性。     

纤维掺量及长度对水泥净浆失水率的影响

为了解纤维对水泥砂浆塑性收缩开裂的影响机理,采用改进过的滤纸法探究了不同聚丙烯纤维掺量(0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1%,质量分数)、不同纤维长度(3mm、6mm、9mm、12mm)对水泥净浆失水率的影响。研究结果表明,在纤维长度3mm、6mm、9mm时,随着掺量的增加,水泥浆有着基本的失水规律即先增大再减小再稍增大,并总是存在着失水率最大的纤维掺量(0.6%～0.8%),且最大失水掺量随着纤维长度的不同而不同。而在长度12mm时却出现了反常,在0.6%处有着最小失水率。3mm、12mm纤维的保水性较6mm、9mm强,3mm、12mm的失水率低于空白样,6mm、9mm部分掺量有保水性,这与纤维的表面效应、堵孔效应、界面效应相关。     

基于SimMechanics的三自由度并联打磨机构动力学分析与仿真

针对一种新型三自由度并联打磨机构进行了运动学和动力学分析,并借助于MatLab/SimMechanics 工具箱的系统动态建模功能,搭建了一精确的仿真平台.结果表明:当并联打磨机构末端受广义力矢量作用时,在仿真平台上对系统进行Lagrange方法的动力学仿真分析,示波器跟踪动平台中心点的位置、速度及加速度,从而获得驱动...     

WARPDS基准站数据传输体制的设计与分析

WARPDS 系统可以极大的满足高精度用户的需求，其基准站观测数据的及时上报直接决定了 WARPDS 系统服务的实时性和完好性，由于 WARPDS 系统基准站数据的上报采用地面网络的方式，因此合理的网络架构对于保证数据上报时延满足 WARPDS 系统的延迟指标精度有着决定性的意义。通过对基准站布局特性的分析，设计了基于国防主干网的组网架构，对京-沈哈干线的网络传输时延进行了理论分析和实际测试，并推广到该系统中传输距离最远的喀什站， 结果表明设计的网络架构能够满足 WARPDS 系统上报数据延迟的指标要求。     

螺旋输送器叶片冷轧工艺试验研究

本文叙述了冷轧叶片成形原理及冷轧工艺参数的确定,如叶片展开尺寸的计算;轧制变形区的确定;原材料尺寸和压下量的确定;冷轧工艺对原材料的要求等。同时对冷轧机工作辊的锥角选择,分导机构的结构进行了一定的分析,为叶片冷轧工艺及轧机结构设计提供了重要的技术参数。     

分光光度法快速测定磷石膏的溶解度

磷石膏主要成分为二水硫酸钙,硫酸钙溶解后溶液中含有大量的硫酸根,通过测定硫酸根的含量,可以计算出溶液中磷石膏的含量,进而求出磷石膏对应的溶解度。用铬酸钡分光光度法测定磷石膏的溶解度,在420nm波长处,硫酸钙为0～0.50mg/mL时与铬酸根吸光度呈线性关系。通过与传统的分析方法对比,可以验证实验结果的可靠性。该方法简单、快速、可行性强,可用于测定磷石膏的溶解度,可以满足测定要求。     

齿轮环类模锻件冲孔连皮的设计及应用

对汽车齿轮环类模锻件冲孔连皮形状设计的工艺合理性进行了分析研究；提出了大尺寸冲孔连皮材料的综合利用方案。     

HIV-1 DNA疫苗的构建及免疫原性

目的构建稳定表达HIV-1Gag-Pol蛋白的DNA疫苗,提高目的基因的表达效率。方法对HIV-1野生型Gag-Pol基因序列进行优化,使用本室构建的表达载体VR,构建重组质粒VR-GPCINS。将构建的重组质粒VR-GPCINS转染HEK293细胞,Western blot鉴定表达产物。用构建的DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,Western blot检测体液免疫反应。结果成功构建能稳定高效表达HIV-1Gag-Pol蛋白的VR-GPCINS质粒,Western blot在免疫小鼠的血清中检测到抗p24的特异性抗体。结论含优化Gag-Pol基因序列的质粒DNA疫苗VR-GPCINS在细胞表达和体液免疫方面均明显优于含野生型Gag-Pol基因序列的质粒DNA疫苗VR-GP。