高致病性猪繁殖与呼吸系统综合症病毒荧光定量PCR检测方法的建立

为了对当前爆发流行的高致病性猪繁殖与呼吸系统综合症病毒建立快速准确的检测方法,根据该类病毒在Nsp2基因1594-1680处缺失87个碱基的特点,设计了一对特异性引物和一个Taqman探针,通过对反应条件的优化,建立了荧光定量PCR检测方法.该方法特异性强,灵敏度高,能很好地区分高致病性猪繁殖与呼吸系统综合症病毒和其它病毒,没有发现假阳性和假阴性现象,检测病毒滴度达到1TCID50.用该法对38份疑似样本进行检测,阳性率60.5%,与常规PCR法符合率100%.     

玫瑰茄花色苷的降解动力学及抗氧化性

以玫瑰茄花色苷为原料,研究了不同pH、温度和稳定剂条件下花色苷的降解动力学,并研究了热处理过程中玫瑰茄花色苷抗氧化能力的变化。结果表明:玫瑰茄花色苷的降解符合一级反应动力学模型,pH<3条件下花色苷的热稳定性比pH≥3条件下强;同一pH下,花色苷的降解速率k随着温度升高而增大,降解半衰期t_1/2则随之减小。在pH2.0、80 ℃和pH5.0、100 ℃时,花色苷分别有最低的降解速率常数(0.2539 h^-1)和最高的降解速率常数(0.6547 h^-1),以及最大半衰期值(2.73 h)和最小的半衰期值(1.06 h)。在80、90和100 ℃条件下,花色苷的降解速率常数均随着CMC和海藻酸钠添加量的增加而减小。同时,在80、90和100 ℃条件下加热2.5 h后,玫瑰茄花色苷的体外抗氧化能力均显著降低(p<0.05)。添加CMC和海藻酸钠能显著地提高花色苷的氧化稳定性,且添加海藻酸钠比添加CMC的效果更好。     

单增李斯特菌非可培养状态的诱导与PMA-qPCR检测

在9%（w/v）NaCl条件下,通过温度、pH两种因素诱导一株单增李斯特菌进入\     

超声波辅助提取芸豆种皮水溶性多糖的优化工艺研究

对超声波辅助提取芸豆种皮水溶性多糖的优化工艺进行研究。在将芸豆种皮进行乙醇回流处理后,根据中心组合设计原理,在单因素基础上,选定pH、液料比、超声波功率和超声提取时间为实验因素,以芸豆皮水溶性多糖得率为目标建立回归数学模型,通过实验结果进行方差分析及对数学模型进行优化得到芸豆皮水溶性多糖的优化提取条件。实验结果表明,当pH为4.63、液料比为20∶1(mL∶g)、超声波功率为238W、超声提取时间为59min时,芸豆种皮水溶性多糖的理论得率为10.38%,验证值为10.43%。      

黄豆发芽过程中Zn、Co和Se的富集及交互作用

本研究以黄豆发芽为手段,采用具有交互关联功能的均匀设计U10(103)表设计并实施了Zn、Co、Se三种人体微量元素在黄豆芽菜生长过程的生物富集实验,评价了芽菜样品的Zn、Co和Se富集量以及有机化富集量,研究了不同Zn、Co、Se外源浓度组间样品生物富集量与各元素外源浓度的回归关系,发现了各元素外源浓度对Zn、Co和Se富集的交互作用以及Zn、Co和Se的富集规律。结果表明：交互作用发生在芽菜生长后期（30 h后）,[Zn×Co]和[Co×Se]呈现协同作用,外源Se通过双重协同作用促进芽菜吸收Zn,[Zn×Se]和[Zn×Co×Se]呈现拮抗作用,外源Zn通过双重拮抗作用抑制芽菜对Se的吸收;芽菜生长前期（30 h前）元素的有机转化率低,元素的富集是以物理渗析吸收为主,生长后期（30 h后）则通过各元素外源浓度的交互作用产生有机化富集,综合评价结果表明处理方案3、6和9对获得富Zn、Co和Se的芽菜特别有效,特别是处理方案3（Zn2+、Co2+混合液：[Zn2+]=1200 μg/L,[Co2+]=30 μg/L;Se4+溶液：[Se4+]=180 μg/L）45 h的样品达到了最优综合Zn、Co和Se富集：Zn2+ =8.58 mg/kg,Co2+=63.10 μg/kg,Se4+=48.30 μg/kg,有机化率分别为Zn 49.50%,Co 25.94%,Se 56.25%,三个元素的富集总量基本同时达到了Zn、Co和Se在中国膳食指南中推荐摄入量,对于Zn、Co和Se多元富集健康蔬菜的生产实际具有直接的参考作用。     

三磷酸肌醇清除自由基的作用

采用电子自旋共振波谱仪检测了三磷酸肌醇（IP3）清除羟基自由基（·OH）和超氧阴离子自由基（O）的作用。结果表明：利用Fenton反应体系,酵母和植酸酶制备的IP3对基自由基（·OH）的清除率各达75．34％和73．29％,样品浓度分别为6mg／ml和9mg／ml;利用次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系,酵母和植酸酶制备的IP3对超氧阴离子自由基（O）的清除率达72．76％和53．84％,样品浓度分别为18mg／ml和9mg／ml。同时认为IP3之所以对多种疾病具有预防、减轻和治疗效果,主要是因为IP3具有比较强大的清除自由基的功能。     

养殖大黄鱼脱脂脱腥处理前后挥发性成分的变化

采用不同方法对养殖大黄鱼进行脱脂脱腥处理,并用固相微萃取和气质联用法分析和鉴定养殖大黄鱼脱脂脱腥处理前后挥发性成分的变化。经NIST质谱数据库检索和文献对照,脱脂脱腥前的大黄鱼检测出48种成分,其中以羰基化合物和醇类为主,腥味成分主要为己醛、2,4-癸二烯醛、1-戊烯-3-酮、3,5-辛二烯-2-酮、1-戊烯-3-醇和1-辛烯-3-醇。碱法处理和碱盐结合法处理后的大黄鱼分别检测出24和18种成分。结果表明,碱法和盐法不仅有效得降低养殖大黄鱼的脂肪,还能促进鱼体内腥味成分的析出,从而改善养殖大黄鱼的肉质、风味等品质。     

PMA-qPCR方法用于监测超声波灭菌效率的适用性及其应用

为研究PMA-qPCR方法的适用性问题,本文以超声波制备膜损伤细菌,用PMA-qPCR方法进行检测,并与平板计数的结果进行比较,证明该方法适用于监测超声波法灭菌率的监测.将该方法用于检测不同因素对超声波灭菌效率的影响,表明在温度和超声频率一定的条件下,处理时间和功率对灭菌效率的影响比较明显,而占空比对其影响较小.     

腾冲嗜热厌氧菌耐热解旋酶Tte-uvrD的克隆表达及粗酶的初步应用

以腾冲嗜热厌氧菌(Thermoanaerobacter tengcongensis)基因组DNA为模版,通过PCR克隆编码解旋酶Tte-uvrD的基因tte-uvrd,将该基因插入原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达载体pET-32a(+)-tte-uvrd,转入E.coli BL21中,经蓝白斑筛选和双酶切法筛选阳性重组转化子,挑取测序正确的单个阳性菌落,在IPTG诱导下表达出重组蛋白Tte-uvrD。诱导后的菌体经超声破碎和离心,上清液用硫酸铵沉淀法初步纯化,透析除盐,冻干复溶后得到粗酶液。用tHDA反应来验证Tte-uvrD粗酶液的活性,比较不同储存温度下粗酶液酶活保持的时间,并比较-20℃下储存两个月的粗酶液与商品化纯酶的tHDA反应灵敏度。结果表明,用本研究建立的克隆方法可成功克隆出耐热解旋酶TteuvrD,其粗酶液能用于tHDA反应,说明粗酶液具有解旋活性;粗酶液在-20℃下第80d酶活仍能保持稳定,4℃下则只能保持酶活约一周;-20℃下储存两个月的粗酶液能达到与商品化纯酶相当的灵敏度。     

菲丁生产工艺的研究

本文对由脱脂米糠经酸浸取碱中和的菲丁生产工艺进行了详细的条件试验，并研究了采用离子交换树脂提取菲丁的条件。酸浸取碱中和菲丁提取率达９０％～９３％，离子交换法菲丁提取率稍低，为８８％，但菲丁中糖类、蛋白质含量低，利于进一步制备肌醇。