假单胞菌的聚-β-羟基丁酸酯聚合酶基因的克隆与表达

根据Gen Bank上公布的假单胞菌属的phb C基因设计引物。以假单胞菌UVCN18基因组DNA为模板,成功克隆了菌株假单胞菌UVCN18中的PHB聚合酶基因phb C。生物信息学方法分析表明,该基因全长1 704 bp,编码567个氨基酸。通过Blast P序列对比发现,该基因所表达的氨基酸属于PHA聚合酶家族。将获得的基因序列提交到Gen Bank,得到登录号为KT716020。采用MEGA5.1软件构建系统发育树,显示该基因编码的氨基酸序列与菌种恶臭假单胞菌所表达的氨基酸序列的同源性较高。同时构建工程菌大肠杆菌BL21-p ET-28a(+)-phb C,经IPTG诱导过量表达,表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定结果与PHB聚合酶分子质量63 ku理论相符合,证明实现了异源蛋白表达。     

磷酸化黑木耳多糖脂质体的表征和抗氧化能力

该研究以黑木耳（Auricularia auricula）子实体为原料,制备磷酸化黑木耳多糖脂质体（phosphorylated Auricularia auricula polysaccharide liposome,P-AAPL）,探究磷酸化黑木耳多糖脂质体的结构表征和流变学特性,对比磷酸化修饰前后脂质体的体外抗氧化性。结果显示,磷酸化黑木耳多糖脂质体包封率为83.26%,平均粒径为（122.42±1.41）nm,电位主要分布在-61.74 mV～-32.04 mV范围内,多分散指数为0.298±0.035,具有较好的稳定性。流变学试验结果显示,脂质体包封前后多糖均表现出典型的非牛顿行为和明显的剪切稀化现象,均为假塑性流体。体外抗氧化能力结果表明,磷酸化黑木耳多糖（phosphorylated Auricularia auricula polysaccharide,P-AAP）的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-dipheny1-2-picryl-hydrazyl,DPPH）自由基清除率明显高于黑木耳多糖（Auricularia auricula polysaccharide,AAP）,且脂质体包封后的多糖DPPH自由基清除率始终低于包封前。因此,磷酸化修饰能够提高AAP的体外抗氧化能力且脂质体的包封可以有效防止P-AAP的氧化。     

微生物来源的β-葡萄糖苷酶在食品工业中应用进展

β-葡萄糖苷酶是一种用于改善食品风味或生产活性单体成分的重要酶制剂,广泛应用于食品、药品、保健品等领域。微生物来源的β-葡萄糖苷酶数量庞大,价格低廉,制备容易而且用途广泛,与植物来源的β-葡萄糖苷酶相比更容易获得高纯度的酶制剂。近年来微生物来源特别是食品微生物来源的β-葡萄糖苷酶受到广泛关注。本文主要综述了霉菌、酵母菌、乳酸菌和其他微生物来源的β-葡萄糖苷酶的生产菌株以及不同微生物生产的β-葡萄糖苷酶的理化性质、底物特异性,并总结和展望了β-葡萄糖苷酶在食品工业中的应用及其发展趋势,为微生物来源的β-葡萄糖苷酶工业化生产提供技术导向和理论依据。     

高剪切分散乳化法提高蛋清蛋白质的热稳定性

本文通过对高剪切分散乳化法提高蛋清蛋白质热稳定性的研究,以测定蛋白质的分散性指数PDI(Protein dispersibility index)值为依据并通过单因素试验结果做四因素三水平正交试验。结果表明:在蛋白液浓度为5%、剪切时间为20min、剪切转速为16 000r/min和剪切温度为40℃的条件下,蛋白液的组织状态最好。通过高剪切分散乳化物理改性修饰技术既可提高蛋清蛋白质的溶解性、乳化稳定性又可提高蛋白质的分散性、热稳定性。不但改善了蛋腥味,同时也使蛋清蛋白质的热凝固温度提高到115℃以上。为鸡蛋的深加工拓宽了应用领域,有利于鸡蛋的进一步加工。     

微波和超声波方法提取荞麦愈伤组织D-手性肌醇的研究

利用植物组织培养方法,获得了荞麦愈伤组织。愈伤组织中的D-手性肌醇含量为荞麦种子中含量的7倍;进一步利用微波法和超声波法对荞麦愈伤组织中的D-手性肌醇提取方法进行了分析比较研究,结果表明超声波法优于微波法。超声波法的最佳提取工艺条件为：使用50%乙醇为溶剂、料液比为1∶15、提取时间为30min、浸提温度为50℃时DCI提取率为84.59%。     

生姜泥关键加工处理对品质的影响

生姜泥作为生姜的加工产品,在一定程度上保持了鲜姜的风味。其作为调味品,在佐餐和中式菜肴工业化生产中具有广泛的应用。对生姜进行不同方式的热烫处理,探究其对生姜的钝酶效果及品质的影响。研究结果表明:沸水热烫60 s,既能钝化生姜中的内源酶,又能很好地保持生姜的色泽和总酚、姜辣素等营养成分。对生姜泥采用不同条件的超高压处理,当超高压500 MPa、10 min处理时,可以达到良好的灭菌效果,且不同压力处理对生姜泥的颜色、总酚、姜辣素含量有一定影响。     

以豆渣为原料的素肉产品挤压前后营养因子含量变化

以豆渣为主要原料,采用单螺杆挤压机在豆渣含量(0%、15%、30%、45%),物料水分(40%),挤压温度(二区:140℃~150℃,三区:170℃~180℃)条件下挤压制备组织蛋白。采用三价铁沉淀法、福林酚法、芦丁标品法、酶-重量法、消化法、国标法分别测定植酸、总酚、总黄酮、胰蛋白酶抑制剂活性、体外消化率及可溶性膳食纤维含量,比较挤压前后产品各种营养因子的含量变化。结果表明:豆渣非膨化挤压后植酸、可溶性膳食纤维含量增加,总酚、总黄酮、胰蛋白酶抑制剂活性降低,体外消化率增加,各营养因子之间的相关系数挤压后降低。     

黑木耳多糖的磷酸化修饰及其抗氧化活性研究

本研究对黑木耳胞外多糖(Auricularia auricular polysaccharide,AAP)进行磷酸化修饰,通过响应面法优化了磷酸化修饰黑木耳多糖的工艺条件,并对磷酸化黑木耳多糖(phosphorylated auricularia auricula polysaccharide,P-AAP)进行抗氧化活性研究。结果显示磷酸化修饰黑木耳多糖的最佳条件为磷酸化试剂中三聚磷酸钠(sodium tripolyphosphate,STPP)与三偏磷酸钠(sodium trimetaphosphate,STMP)质量比为5:2,反应温度88℃,反应时间5 h,反应pH为8.6,此条件下多糖中磷酸根含量为9.93%。抗氧化活性试验结果表明,与AAP相比,经过DEAE-Sepharose Fast Flow柱及葡聚糖凝胶G-100柱纯化后的P-AAP1对DPPH自由基的清除率提高了34.37%,半抑制浓度(IC₅₀)为1.07 mg/mL;对羟基自由基的清除率提高了30.39%,IC₅₀值为0.91 mg/mL;对超氧阴离子自由基的清除率提高了26.40%,IC₅₀值为0.41 mg/mL。因此,黑木耳胞外多糖通过磷酸化修饰后其抗氧化活性能被显著提高。     

海藻糖对防止鲤鱼鱼糜蛋白质冷冻变性的研究

以冻藏鱼糜盐溶性蛋白含量、巯基含量及肌原纤维蛋白Ca2+-ATP 酶活性为指标, 探讨冷冻鲤鱼鱼糜在冻藏过程中添加海藻糖对蛋白质变性作用的影响。结果表明：5%海藻糖溶液浸渍处理组,冻藏7周后,盐溶性蛋白含量、巯基含量分别比空白组高16.16%和8.8%;5%海藻糖溶液浸渍处理组,冻藏30d后,肌原纤维蛋白Ca2+-ATP 酶活力的下降率比空白组低29.6%。可见添加海藻糖能有效地防止蛋白质变性,提高冷冻鲤鱼鱼糜的品质。     

水生栖热菌海藻糖合成酶基因的克隆及真核表达

通过基因工程技术合成海藻糖合酶Tres 全基因,插入到毕赤酵母菌表达载体pPICZα中。电转化毕赤酵母菌GS115 后,经Zeocin 抗性筛选阳性菌株。用PCR 和全基因测序鉴定目的基因的表达。通过诱导表达目的蛋白,并以SDS-PAGE 和Western blotting 进行鉴定。成功地构建了pPICZα-Tres 重组质粒,并证明目的基因已整合于毕赤酵母菌的基因组。