茶树单宁酶的原核表达及酶学性质表征

基于大肠杆菌的密码子偏好性,对茶树单宁酶基因CsTanA碱基进行优化,基因优化后GC含量为51.9%,密码子适应指数为0.8,优化前后基因序列的一致性为77.8%,以pET-30a为表达载体对优化基因进行重组表达及酶学性质分析。A600 nm约0.6的重组菌株以1 mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷在30 ℃诱导12 h,破碎上清液重组单宁酶rCsTanA比活力为0.35 U/mg,镍柱纯化后的rCsTanA比活力为1.53 U/mg,纯化倍数约为4.4。纯化重组单宁酶rCsTanA分子质量为39 kDa,其最适温度和最适pH值分别为40 ℃和7.0。不同金属离子浓度对酶活力的影响存在差异,在低浓度（1 mmol/L）条件下,K＋增强了rCsTanA 37.28%的酶活力,而Ag＋、Cu2＋和Fe3＋使该酶活力均丧失80%以上;而在高浓度（5 mmol/L）条件下,Cu2＋表现出完全抑制rCsTanA活性的特性。表面活性剂（十二烷基硫酸钠、吐温80和十六烷基三甲基溴化铵）和极性溶剂（甲醇、乙醇、丙三醇、异丙醇及丙酮）对rCsTanA活性具有较强抑制作用。本研究不仅实现了茶树单宁酶的表达和酶学性表征,同时也丰富了单宁酶资源,为植物单宁酶的进一步应用研究提供了必要的理论支撑。     

莲藕圆子及低脂藕片加工与保藏

研究了莲藕圆子和低脂藕片的水分含量、水分活度、脂肪含量以及贮藏过程中制品的脂肪氧化值.结果表明:油炸莲藕圆子及低脂藕片的水分活度都在0.9～0.94之间,脂肪含量在22%以下,且低脂藕片的脂肪含量较一般油炸制品的低20%左右.复合铝箔袋包装能减缓脂肪的氧化.上述制品的保鲜期以二个月较为适宜.     

甘露聚糖酶RmMan134B与非均相湿热技术协同制备魔芋甘露寡糖

为挖掘新型GH134家族来源的甘露聚糖酶,评价其与非均相湿热技术协同制备魔芋甘露寡糖的应用潜力,从小孢根霉GZHF10的基因组中成功获得1个新型GH134家族甘露聚糖酶（Rm Man134B）,该基因编码181个氨基酸和1个终止密码子,经分析,与已报道的GH134家族活性基因的序列一致性较低（<69.6%）。采用大肠杆菌PET表达系统对该基因进行异源表达及性质测定,结果表明,该酶最适底物为魔芋甘露聚糖,最适温度和pH值分别为40℃和5.0。将魔芋粉在115℃和0.1 MPa的条件下进行非均相湿热处理,魔芋聚糖的结构和性质发生显著改变,其中处理2 h魔芋粉的溶液的表观黏度（30 g/L）降低96.1%,粉末粒径变小,热稳定性提高,改性魔芋粉的水解率提高0.6～1倍。进一步研究发现,Rm Man134B酶解产物的主要成分为单糖（0.922 mg/L）、二糖（1.4 mg/L）和三糖（0.613 mg/L）。本研究对魔芋甘露聚糖资源的高效利用和产业化发展具有一定的推动作用。     

四苯并卟啉锌及其衍生物敏化的TiO_2光催化降解曙红B的研究

为提高TiO2纳米晶在光催化过程中对可见光的利用效率,采用化学吸附的方法分别制备了四苯并卟啉锌、中位-四(酰氯基亚甲基)苯并卟啉锌和中位-四(羧基亚甲基)苯并卟啉锌修饰的TiO2纳米晶,并将其用于氙灯辐照下曙红B的降解。由于卟啉吸收可见光后,激发态电子能转移到TiO2的导带,敏化后TiO2的光降解效率均有所提高,其中中位-四(羧基亚甲基)苯并卟啉锌因其与TiO2有效地结合,降解效率最高。     

雷山鱼酱酸中微生物多样性及品质特性分析

采用高通量测序技术对雷山鱼酱酸中的细菌16S rDNA V3-V4 区进行测序,采用固相微萃取与气相色谱-质谱联用技术检测鱼酱酸中的挥发性组分,并利用统计学分析计算其品质特性。经分析,雷山鱼酱酸中共有22个门,249个属,变形菌门(39.13%)和厚壁菌门(30.68%)是雷山鱼酱酸中的优势细菌门;节杆菌属(Arthrobacter,11.246%)和雷尔氏菌属(Ralstonia,10.929%)是优势细菌属。经测定,雷山鱼酱酸中含有萜烯类33.65%、醚类33.53%、醇类16.45%、酸类7.82%、酯类6.47%等70种挥发性成分。其中茴香脑(23.25%)、右旋萜二烯(13.12%)、4-烯丙基苯甲醚(8.52%)、芳樟醇(8.35%)、山梨酸(5.96%)为主要的挥发性成分。鱼酱酸品质分析表明,有机酸中柠檬酸含量最高为269.6 mg/kg,脂肪酸以亚油酸(0.047 g/100 g)为主,氨基酸中以鲜味氨基酸为主要呈味特征。本研究结果为探究鱼酱酸发酵机制,规范其生产和食品安全提供了理论依据。     

家蝇乙酰胆碱酯酶基因密码子优化及酶学特性表征

基于密码子通用性及不同物种密码子使用频率差异原则,对家蝇乙酰胆碱酯酶的基因序列进行优化,旨在提高其在毕赤酵母中的表达量,增强其应用前景。将基因序列中的低频密码子更换为毕赤酵母偏好的密码子,同时调整乙酰胆碱酯酶各区段GC含量至45%~55%。将优化的家蝇乙酰胆碱酯酶连接至表达载体pPIC9K并转入毕赤酵母GS115中,摇瓶培养。以改进的Ellman法测定重组家蝇乙酰胆碱酯酶（mdAchE）酶学性质,通过有机磷及氨基甲酸酯类农药抑制试验分析重组酶mdAchE的生物活性。家蝇乙酰胆碱酯酶密码子优化后在毕赤酵母中实现高效表达,酶活力约8.82 U/mL。抑制试验显示,重组酶mdAchE能够被马拉硫磷等7种有机磷农药,克百威等8种氨基甲酸酯类农药抑制,最低抑制浓度IC15值为1.83×10-15 μg/mL,远远低于其它诸如气相色谱法、生物传感器等方法测得的最低检测限（0.01 μg/mL,4.14×10-6 μg/mL）。本试验结果表明,重组乙酰胆碱酯酶mdAchE在有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的检测领域具有较大的应用潜力。     

酸奶后酸化中保加利亚乳杆菌关键基因表达分析

酸奶中的乳酸菌能将大分子蛋白质分解成人体易吸收的小分子营养物质,这对人体具有很重要的保健功能,然而酸奶的后酸化问题不仅严重影响风味,还大大缩短了酸奶的货架期,阻碍了我国酸奶行业的发展。研究证明,控制保加利亚乳杆菌在酸奶发酵后期的生长代谢,是解决酸奶后酸化的关键。本文在研究模式菌株保加利亚乳杆菌ATCC 11842在复原脱脂乳培养基中生长和产酸特性的基础上,利用半定量RT-PCR技术,分析酸奶后酸化中保加利亚乳杆菌不同时期关键基因表达的差异,选取后酸化过程中表达变化明显的丙糖异构酶基因,通过对该基因的过量表达,探究该基因在酸奶后酸化过程中的功能。结果表明,大多数关键基因受到后酸化的影响而上调或下调,其中丙糖异构酶基因过量表达后影响菌株产酸和生长。     

金属非金属共掺杂TiO_2光催化材料的研究进展

TiO_2作为一种新型环保材料具有广泛的应用前景。针对其缺陷,对比金属离子掺杂、非金属离子掺杂及金属非金属共混掺杂,使用金属非金属共混掺杂改性的方式互补性最大,能弥补单一掺杂的不足,具有更高的光催化活性。     

皂角米多糖的提取、改性及其寡糖的抗氧化活性分析

皂角米多糖是一种新型功能多糖,在食品工业中应用潜力巨大。采用水提醇沉法提取皂角米多糖,探讨非均相湿热改性技术对皂角米多糖的理化性质、寡糖制备效率和抗氧化活性的影响。结果表明:从皂角米中获得多糖,提取率为17.4%。经非均相湿热技术改性后,皂角米多糖溶液(10 g/L)表观黏度显著降低,由834 mPa·s降至97 mPa·s;热稳定性显著提高,且多糖微观形貌变得更光滑、平整,粒径显著变小,比表面积增大为0.245 m2/g。改性后多糖的水解率(40 g/L)提高了17.4%,且低分子质量(<5 ku)的寡糖产物含量显著增加,总抗氧化活性明显增强。结论:非均相湿热技术可用于皂角米多糖的寡糖的制备,研究结果可为皂角米的开发应用提供一定的理论参考。     

双金属氧化物TiO_2基催化剂的氧化还原性能

以金属硝酸盐为前驱物,乙二胺四乙酸为助剂,采用正交实验设计和浸渍法制备Cu-Ni、Cu-Fe和Ni-Fe系列TiO_2基双金属氧化物催化剂,通过XRD和H_2-TPR进行表征,评价其氧化还原性能。结果表明,活性组分为Cu和Fe、物质的量比为0.2∶0.2、pH为8.0和400℃焙烧的5#催化剂具有优良的氧化还原性能,起始还原温度148℃条件下,耗氢量达80.72 mmol·g-1。活性组分、物质的量比、pH值和焙烧温度等催化剂制备参数影响氧化还原反应的难易(起始还原温度)和强弱(耗氢量),Cu和Fe物质的量比为0.2∶0.2的催化剂由于协同效应具有最低的起始还原温度和很高的耗氢量。较低物质的量比含Ni活性组分的催化剂由于形成复合金属氧化物固溶体而难以在较低温度被还原,中性或碱性条件下通过氢氧化物脱水生成金属氧化物有助于提高催化剂的耗氢量,400℃足以形成适宜的晶型以提高催化剂氧化还原性能。