产果糖基转移酶米曲霉菌株的选育

通过紫外线、紫外线和氯化锂复合、微波、微波和氯化锂复合4种诱变方法，对米曲霉GX-0010菌株进行了诱变，选育得到果糖基转移酶酶活高于GX-0010菌株的突变株8株，其中UVLi-3突变株的酶活最高，比GX-0010菌株高45．4％。     

野油菜黄单胞菌胞内粗酶液催化合成α-熊果苷

利用野油菜黄单胞菌（Xanthomonas campestris pv.campestris）8004胞内粗酶液生物催化合成α-熊果苷,考察了对苯二酚浓度、反应物摩尔比、缓冲溶液pH值、反应时间、菌体浓度等因素对反应的影响。确定最佳反应条件为：反应温度35℃、摇床转速180r.min-1、对苯二酚浓度40mmol.L-1、对苯二酚与蔗糖的摩尔比1∶30、缓冲溶液pH值7.0、反应时间36h、菌体浓度80mg.mL-1,在此条件下,α-熊果苷含量达到6.58mg.mL-1、对苯二酚选择性为66%、对苯二酚转化率为91%。     

辐射法合成高强吸水剂交联聚丙烯酸钠

利用^60Co辐照引发丙烯酸钠聚合,制得高强吸水剂交联聚丙烯酸钠。研究了单体浓度,中和度．交联剂,辐照剂量等因素对交联聚丙烯酸钠吸水性的影响。结果表明,辐射剂量为20kGy,中和度为70％。单体浓度为16．7％时．交联聚丙烯酸钠具有较高的吸水率,吸生理盐水(0．9％NaCl水溶液)可达128倍．吸自来水可达干重的252倍,吸去离子水可达干重的2096倍。     

米曲霉β-呋喃果糖苷酶基因克隆及生物信息学分析

β-呋喃果糖苷酶水解蔗糖和低聚果糖,酶法生产高纯度低聚果糖,必须抑制或消除β-呋喃果糖苷酶的水解活性.本研究以工业生产低聚果糖的米曲霉菌株GX0015为研究材料,采用RT-PCR技术,克隆获得β-呋喃果糖苷酶基因(GenBank登录号:EU130944).利用生物信息学手段对β-呋喃果糖苷酶基因进行分析得知:该酶为456个氨基酸组成的亲水性膜外蛋白;功能域分析结果显示:该酶从第52个至第456个氨基酸残基之间序列属于糖苷酶32家族特征序列,并具有糖苷酶32家族酶活性中心的(N/G)DP(C/N)G和RDP保守序列;米曲霉β-呋喃果糖苷酶在进化树上的位置处于酵母菌的转化酶和细菌的六磷酸蔗糖水解酶之间.     

重组葡萄糖脱氢酶酶学性质研究

葡萄糖脱氢酶可用于高纯度低聚果糖和葡萄糖酸钙的生产，一种重组葡萄糖脱氢酶表达、纯化后，对该酶酶学性质进行了研究。最适反应pH值8．4，最适反应温度37℃，在温度低于45℃条件下，酶活力稳定性好。在最适温度和pH条件下，以葡萄糖为底物时葡萄糖脱氢酶的米氏常数Km=20．09mmol／L，以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP）为底物时的米氏常数Km=0．10mmol／L。     

醋杆菌GX-0013菌株的葡萄糖脱氢酶部分酶学性质研究

对产葡萄糖脱氢酶醋杆菌GX-0013菌株的超声波破碎条件进行了优化，并对酶反应的最适宜pH值，温度以及反应的进程曲线进行了研究，发现醋杆菌GX-0013茸株所产的葡萄糖脱氢酶是位于细胞膜上，且发现超声波方法以菌体浓度（w/v）为1，900W破壁60min效果最好；粗酶液转化葡萄糖的最适温度为30℃左右，最佳pH值为6．0。     

辐照法制备壳聚糖接枝DMDAAC共聚物及其絮凝性能研究

在60Co的γ射线辐照下,壳聚糖与二甲基二烯丙基氯化铵(DMDAAC)发生接枝共聚反应,研究了壳聚糖与DMDAAC的配比、辐照剂量、pH值对接枝率的影响,用傅立叶红外光谱法(FTIR)、X-射线衍射法(XRD)表征了接枝产物,并进行了接枝产物对膨润土模拟废水和洗米水的絮凝实验.结果表明,该接枝产物具有优良的絮凝性能.     

巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium NCIB 8508蔗糖磷酸化酶的分离鉴定

对巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium NCIB 8508蔗糖磷酸化酶进行了分离鉴定。结果表明,该酶催化可逆反应,分子量大小约为56 kDa,最适pH值为7.5,最适温度为50℃。为利用巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium NCIB 8508以蔗糖为原料直接合成蔗糖-6-乙酸酯提供了新的研究思路。     

米曲霉GX0011β-果糖基转移酶的性质研究

β-果糖基转移酶是酶法由蔗糖生产低聚果糖所必需的酶,本文对从米曲霉GX0011分离纯化得到的β-果糖基转移酶性质进行了研究。结果表明,该酶催化蔗糖转化成蔗果三糖的Km和Vmax分别为0.319mol/L和0.713mol/min/L,最适pH和最适温度分别为5.0～6.0和45℃。葡萄糖是该酶的竞争性抑制剂,其抑制常数Ki=0.608mol/L。经苯甲磺酸氟(PMSF)、N-溴代二酰亚胺(NBS)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)和间硝基苯磺酸钠(TNBS)对酶进行化学修饰及底物保护实验,推测该酶活性中心可能包括丝氨酸/苏氨酸、色氨酸、天冬氨酸(谷氨酸)残基,而赖氨酸残基可能与维系酶活性中心构象有关,但不是酶活性必需基团。实验还表明,超声波能在一定程度上提高酶活力,在300W功率下作用5min可提高酶活12%左右。低浓度乙醇对酶活影响并不十分显著,乙醇浓度达20%时,酶活仅损失19%。     

固定化磷酸盐选择性催化合成2-O-己二酸单乙烯基蔗糖酯

因为蔗糖含有8个反应活性相近的羟基,蔗糖与脂肪酸酯的转酯化反应很难得到单一的产物,本研究以固定化磷酸盐作催化剂可以选择性地催化蔗糖和己二酸二乙烯酯(Divinyl adipate,DVA)的转酯化反应.方法是在含有磷酸盐的丙酮中加入酸洗过的硅藻土,振荡1 h,可制成固定化磷酸盐;取0.01 mol蔗糖和0.02 mol DVA,加入固定化磷酸盐10 g,以100 mL DMF为溶剂,在50℃、220 r·min~(-1)的恒温摇床中连续反应1 d,可以选择性地获得蔗糖单酯产品.转酯化反应的转化率和产率分别达到60.0%、54.8%.经过MS和~(13)C-NMR鉴定,转酯化位置为蔗糖基的C-2位,合成产物为2-O-己二酸单乙烯基蔗糖酯.