荧光免疫层析法检测粮食谷物中重金属铅的前处理研究

基于时间分辨荧光纳米微球的重金属铅快速定量检测卡，通过对样品前处理的研究，确定了最佳提取液为0.5～1 mol/L HCl，最佳螯合剂为1～2 mmoL/L ITCBE，提高了粮食谷物中重金属铅的检测灵敏度，使得检测卡能满足粮食谷物中重金属铅快速检测的需求。并对重金属铅荧光定量检测卡的性能进行检测，其最低检出限LOD为7.428μg/kg,最低定量限LOQ为20.830μg/kg,线性范围为25～1 000μg/kg,线性范围内的添加回收率为96.43%～108.34%, 5次重复的变异系数在10%以内，其准确性和可靠性均可以满足欧盟和我国对重金属铅的分析标准的技术要求，且该方法具有简便快速、准确可靠、重复性好等特点，可用于不同粮食谷物中重金属铅的快速定量检测分析。     

尽快改革新股发行的方式

当前,改革新股发行方式,最主要的是要解决一级市场的无风险利润和一、二级市场的价差太大,以及操纵股价、中小投资者利益受损、股市动荡问题。网下机构询价申购+(账户摇号抽签+市值配售)的发行方式,能够使长期以来存在的申购新股无风险的状况得到改变,使申购新股建立在论质定价和承担风险的基础上,有利于鼓励二级市场投资,鼓励价值投资、长期投资,对股票市场的稳定健康发展有重要作用。     

烟碱对大鼠脑内蛋白激酶A 和C活性的影响

目的: 观察烟碱对脑内蛋白激酶A 和C 活性的影响。方法: 在烟碱诱导N 受体处于激动态、亚急性失敏、急性失敏和慢性失敏态时, 处死大鼠取全脑匀浆。分别加入PKA 特异性生物素化底物Kemptide和PKC 特异性底物生物素化Neurogranine, 用³²P掺入底物法测定大鼠全脑中蛋白激酶A 和C 的活性。利用基因芯片技术检测慢性失敏时PKA 和PKC 相关基因表达的变化。结果: N 受体激动状态下对PKA 和PKC 的活性没有影响;N 受体亚急性、急性和慢性失敏时使PKA 和PKC 的活性降低。慢性失敏时,PKC Ⅲ基因表达增加, 而PKC 中α、γ、ζ等基因表达没有变化;cAMP 反应元素结合蛋白、cAMP反应元素调节因子、cAMP 磷脂酶、cAMP 依赖性蛋白激酶Ⅱ等6 种基因表达无明显改变。结论: 烟碱作用使N 受体失敏耐受时, 可降低脑内PKA 和PKC的活性, 使脑内信号转导通路发生适应性改变, 这些变化可能是烟碱耐受的重要生化基础。     

实时荧光环介导等温扩增技术检测猪肉中的假单胞菌

根据假单胞菌16S rDNA基因序列设计引物,并向反应体系中加入饱和型核酸染料Eva Green,利用实时荧光检测仪,建立假单胞菌属实时荧光环介导等温扩增技术(LAMP)。研究中对62株假单胞菌的16S rDNA基因通过DNAMAN软件进行序列比对后,针对共有片段设计扩增引物。对扩增体系进行了优化,优化结果经电泳鉴定。通过12株假单胞菌和23株非假单胞菌进行特异性验证,并比较了实时荧光LAMP与普通LAMP的灵敏度,对人工污染样品的检出限进行了测定。结果表明,特异性验证中12株假单胞菌为阳性,23株非假单胞菌为阴性。实时荧光LAMP检测纯菌的灵敏度为36 CFU/mL,是普通LAMP灵敏度的10倍。人工污染样品的检出限为1.73×10~3 CFU/g。本研究中建立了一种检测冷鲜猪肉中假单胞菌属的方法,实现了多个菌种的同时检测,避免了单一菌种检测的局限性,该方法快速、准确、灵敏度高,可在2 h内完成冷鲜猪肉中假单胞菌的检测。     

双酚A完全抗原的制备

采用重氮化法在双酚A(BPA)上引入羧基,将其与牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备双酚A完全抗原BPAH-BSA.紫外扫描光谱和红外光谱实验表明偶联成功,为进一步制备抗BPA抗体提供了良好的免疫原.     

酶联免疫法检测呕吐毒素的方法研究

目的:利用抗呕吐毒素的特异性单克隆抗体和包被抗原,建立间接竞争酶联免疫法(ELISA)来检测谷物及其制品中呕吐毒素含量。方法:通过方阵滴定实验确定呕吐毒素最佳抗体浓度和最佳包被抗原浓度,应用酶联免疫测试盒对谷物及其制品中的呕吐毒素进行定量检测的方法学评价,来确立该方法的各项技术指标。结果:方法的最低检测浓度10μg/L;平均RSD为5.8%;回收率平均值为104%;用该方法研制的测试盒在4℃环境下可稳定6个月以上;检测时间小于2h;结论:该方法简便、安全、灵敏度高、重复性好、特异性强、能定性和定量检测谷物及其制品中的呕吐毒素含量。     

苹果渣饲料中展青霉素生物脱除的条件优化及脱除前后饲料中营养物质评价

为降低苹果渣中展青霉素的含量,以一株对展青霉素有降解能力的黑曲霉FS10为发酵菌株对展青霉素污染的苹果渣进行发酵脱毒。以展青霉素降解率为指标,通过单因素实验对接种量、料水比、发酵时间和发酵温度四个影响苹果渣固态发酵的因素参数进行优化,然后利用响应面法筛选最优发酵条件,并对最优发酵条件下苹果渣发酵产物的营养物质进行评价。结果表明,接种量10%,发酵温度31 oC,发酵时间4 d,料水比1:3.2（g:mL）为黑曲霉生物发酵苹果渣的最优发酵条件,在此条件下展青霉素可被完全脱除。该验证结果与理论值相对误差为1.67%,说明该优化参数可行,具有实际应用价值。相较于发酵前而言,发酵后苹果渣中粗纤维含量从20.26%降低17.32%,粗蛋白含量从 8.16% 提高至10.08%,粗脂肪含量从3.32%提高至4.06%,总氨基酸含量从64.43 mg /g提高至73.78 mg/g。该研究不仅能够完全脱除受污染苹果渣中的展青霉素,还可有效改善苹果渣的营养价值,为开发安全营养的苹果渣饲料提供了有力的技术支持。     

黑曲霉降解黄曲霉毒素B1的研究及转录组分析

为探究黑曲霉FS10对AFB_1的降解机制,使用黑曲霉FS10的不同组分(菌悬液、发酵液、孢子、菌丝体)对AFB_1进行降解,并研究了AFB_1刺激对黑曲霉FS10降解效果的影响;利用扫描电子显微镜观察降解过程中黑曲霉菌丝体的形态变化;用转录组学技术探究AFB_1可能的降解机理。结果表明:黑曲霉FS10能有效降解AFB_1,72 h时菌悬液的对AFB_1脱除率高达98.65%;黑曲霉FS10孢子对AFB_1无明显脱除作用,但菌丝体对AFB_1有一定的吸附能力,发酵液对AFB_1有明显脱除效果;经过AFB_1诱导刺激后黑曲霉FS10降解效果有明显提升,表明AFB_1处理能显著提升黑曲霉FS10对AFB_1的降解能力。微观结构分析表明AFB_1处理在一定程度上影响黑曲霉FS10的形态,但随着时间的延长这种影响逐渐减小。此外,转录组学分析表明AFB_1处理降低了一些能量代谢基因的水平,这可能是黑曲霉FS10的一种自我保护机制,同时蛋氨酸的合成基因上调,推测AFB_1的降解可能与蛋氨酸的合成有关。     

藻毒素的危害及分析方法进展

随着水休污染和富营养化程度的加剧，藻类“水华”危害日趋严重，本文简述了淡水中藻毒素的产生、化学结构及毒性机理，重点综述了检测藻毒素的各类分析方法以及最新的研究进展，尤其对目前国内外广泛应用的灵敏、高效的色谱分析方法(如HPLC／MC，GC／TMS／MS／CE)和更快速、更有效的免疫分析方法进行了详细的综述，提出了开发更新的仪器分析技术、生化分析技术、生物传感器等，及操作更简便、特异性更强、检测速度更快捷的免疫检测技术是今后藻毒素分析方法的发展方向。     

纳米金溶胶形成过程的可见光吸收光谱研究

利用紫外 可见吸收光谱研究了金溶胶的形成过程,制备了10～50nm不同粒径的金溶胶,研究了不同粒径金溶胶的可见吸收光谱变化和分散稳定性.研究结果表明:平均粒径为14nm的金溶胶在生成的初级阶段,首先形成大的团状聚集体,随反应时间的延长,紫外吸收降低,可见光吸收逐步增强,最大吸收波长逐渐向短波方向蓝移,在反应时间为5min左右时形成稳定分散的金胶.随着粒径的增大,反应过程加快,金溶胶的分散稳定性显著降低.金溶胶的可见吸收光谱还具有一定的尺寸效应,在平均粒径大于25.1nm时,最大吸收峰值和峰宽随粒径的增大而增大;当平均粒径小于25.1nm时最大吸收峰值和峰宽随粒径的减小而增大.