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沙丁胺醇单克隆抗体的制备及间接ELISA方法的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
制备抗沙丁胺醇单克隆抗体,鉴定其特异性并建立间接竞争ELISA检测方法.以合成的沙丁胺醇完全抗原免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤技术进行细胞融合,筛选克隆得到稳定分泌抗沙丁胺醇抗体的单克隆杂交瘤细胞,命名为4E4和3A2.经鉴定,两个抗体亚类都为IgG,,其腹水纯化后效价分别达到2.56 ×105和1.28 ×105.以效价高且特异性较好的4E4细胞株获得的抗体建立间接竞争ELISA方法,经条件优化后得到标准曲线,检测范围为4.76~84.99ng/mL,IC50为20.12ng/mL,检测限为3.25ng/mL,与克伦特罗交叉反应率为253.62%,与其它结构类似物没有明显交叉反应.本研究制备的单克隆抗体和建立的间接ELISA方法,可用于开发同时检测沙丁胺醇和克伦特罗的试剂盒. 相似文献
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本实验以硫藏橄榄为对象,研究不同功率及频率超声波处理的脱硫效果,并利用二次响应面法优化温度、换水周期、pH 值三个工艺参数。结果表明:超声波处理能显著强化硫藏橄榄的脱硫效果。二氧化硫脱除率与超声波功率呈正相关。频率25~60kHz 范围内,二氧化硫脱除率与超声波频率呈负相关,25kHz 处理效果佳,依次为40、60kHz。25、40、60kHz 两两双频复合脱硫结果显示:双频处理未见协同增效作用,仅表现出简单的叠加效果。二次响应面试验表明:在频率25kHz、功率250W 的超声波协助处理下,温度、pH 值、温度与pH值交互项对二氧化硫含量影响极显著,优化的脱硫参数为:温度60℃,换水周期6h/ 次,pH3。 相似文献
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目的比较3种测定桉叶精油微胶囊包埋油含量的方法,为包埋油含量的测定提供科学依据。方法采用干燥失重法、挥发油测定法和紫外分光光度法对桉叶精油微胶囊包埋油含量进行测定,并对这3种方法进行对比分析。结果 3种方法的RSD值均不超过5%,加标回收率均在90%~120%之间,均具有良好的精密度和准确度。干燥失重法测定结果偏高。紫外分光光度法操作复杂,相对成本较高,但检测速度快。挥发油测定法操作简便、成本低,但耗时较长。结论 3种方法均适合包埋油含量的测定,但挥发油测定法和紫外分光光度法精密度和准确度更高。 相似文献
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建立沙丁胺醇的直接竞争ELISA(dcELISA)快速检测方法,采用高碘酸钠法制备辣根过氧化物酶标记沙丁胺醇单克隆抗体,棋盘滴定法确定包被抗原质量浓度和抗体稀释倍数,通过单因素试验,考察反应体系中表面活性剂、离子浓度、甲醇体积分数、pH 值因素对dcELISA 性能的影响,确定最优检测条件,同时考察方法的特异性。结果表明:酶标抗体克分子比为2.1 时偶合物的滴度最高,最佳反应条件为包被抗原质量浓度1μg/mL,酶标抗体稀释2560 倍,0.01mol/L、pH7.4 的磷酸盐抗体稀释液(PBS)中含体积分数0.05% 的Tween-20、0.5mol/L NaCl溶液和体积分数5% 的甲醇时dcELISA 具有最高的灵敏度和最好的稳定性,所建立方法的IC50 为10.3ng/mL,检测限为0.049ng/mL,线性范围0.3~76.30ng/mL,批内变异系数13.8%,批间变异系数为22.38%,与克伦特罗交叉反应率为321.18%,与溴布特罗交差反应率为29.09%,与其他结构类似物没有明显交叉反应。本研究所建立的dcELISA 可用于沙丁胺醇和克伦特罗的多残留检测。 相似文献
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