酱油发酵过程中融合魏斯氏乳酸菌促进瓜氨酸的积累

氨基甲酸乙酯是一种广泛存在于发酵食品中的2A级致癌物,除了酒类,发酵豆制品中也有检出。本文以EC含量较高的高盐稀态发酵酱油为主要研究对象,分析了发酵过程中EC形成与尿素和瓜氨酸之间的关系,并探讨了酱油乳酸发酵时期融合魏斯氏乳酸菌(Weissella confusa)积累EC前体瓜氨酸的情况。结果显示酱油发酵液p H为4.8时EC开始形成,且与瓜氨酸含量显著相关,分离该阶段酱醪的乳酸菌发现Weissella confusa为主要菌株,其积累瓜氨酸能力差异很大。瓜氨酸在不含Na Cl培养基中主要在稳定期后释放,而在含18%Na Cl培养基中在生长过程中不断积累。盐胁迫是Weissella confusa积累瓜氨酸的主要原因,适宜的p H和高浓度的葡萄糖也能促进Weissella confusa积累瓜氨酸。     

间接竞争化学发光酶联免疫分析法检测番茄酱和果汁中异细交链孢菌酮酸

针对番茄酱和果汁中链格孢霉菌毒素污染问题,建立异细交链孢菌酮酸(iso-tenuazonic acid,ITe A)间接竞争化学发光酶联免疫分析法。通过棋盘法和单因素试验确定最佳包被原质量浓度为15.6 ng/m L、抗体质量浓度为稀释96 000倍、缓冲体系pH 7.4、竞争反应时间和二抗反应时间分别为40 min和50 min。方法IC50为2.13 ng/m L,线性范围为0.50~9.12 ng/m L,检测限为0.10 ng/m L,与结构功能类似物交叉反应率均小于0.1%,样品添加回收率在78.60%~110.83%之间,变异系数均小于15%。本方法适用于样品中ITe A污染的特异性快速筛查。     

抗克伦特罗单链抗体基因构建及蛋白结构模拟

目的：构建抗克伦特罗单链抗体(scFv)基因cbl,进行蛋白质结构模拟并对其理化特性进行分析。方法：采用重叠延伸PCR 方法,以能特异性分泌抗克伦特罗mAb 的杂交瘤细胞株5D1 为原料,构建抗克伦特罗scFv 基因cbl,进行测序,采用生物信息软件对氨基酸序列推导并进行结构预测,同时对理化性质进行分析。结果：抗克伦特罗scFv 基因cbl 全长720bp,对应225 个氨基酸,单链抗体分子量约为25826.6,等电点预测值8.78,为碱性蛋白质;二级结构显示抗克伦特罗单链抗体含α螺旋20 处,β折叠99 处,β转角28 处,随机卷曲93 处。cbl 三级结构建模显示重链(VH)和轻链(VL)形成一个疏水的" 口袋",Linker 游离于此结构之外,符合scFv 的结构特点,明显具有抗原结合位点的空间构象,理论上应该具有良好的抗原结合活性。结论：构建一个抗克伦特罗scFv 基因cbl,应用信息学技术所获得的预测和分析结果为抗克伦特罗单链抗体的进一步表达、纯化和活性研究提供信息。     

微波消解-石墨炉原子吸收光谱法连续测定水果和蔬菜中铅铬镉

建立了用微波消解样品,石墨炉原子吸收光谱法在同一体系中连续测定水果和蔬菜中重金属铅(Pb)、铬(Cr)、镉(Cd)的方法。研究了消解试剂、消解温度和时间对样品消解效果的影响,优化了石墨炉原子吸收光谱法测定条件。在最佳实验条件下,Pb、Cr、Cd 的线性范围分别为0 ～40、0 ～80、0～3μg/L,检出限分别为0.293、0.037、0.850μg/L,相对标准偏差为2.1%～5.3%,回收率为95.0%～101.9%。用于实际样品测定结果令人满意。     

从三聚氰胺事件谈食品质量控制

三聚氰胺是一种用途广泛的有机化工原料,其含氮量达66%左右,一些不法企业在饲料和食品中大量添加,造成产品中粗蛋白质虚高的假相,严重威胁人类健康。本文分析了三聚氰胺的性质、假蛋白原理及在食品中添加的危害等,从而找出食品质量控制的方法,以期为提高动物产品的质量和食品安全性提供参考。     

体外模拟胃肠消化中山楂多酚及抗氧化活性的变化

本实验研究了山楂多酚、黄酮及抗氧化活性在体外模拟胃肠道环境下的变化规律,并利用高效液相色谱法测定了胃肠消化对山楂中5 种主要单体酚类化合物的影响。结果表明：山楂多酚在模拟胃液消化中稳定性较好,总多酚、黄酮含量及抗氧化能力均无显著性变化（P＞0.05）;而在模拟肠液消化中山楂多酚易发生降解,总多酚、黄酮含量在0.5 h内分别降低16.26%和7.46%,抗氧化能力也随之降低10.25%。高效液相色谱测定结果显示,5 种单体酚类化合物含量在胃液消化中无显著性变化（P＞0.05）;而在肠液消化中变化情况不相一致,其中金丝桃苷和异槲皮苷含量无显著性变化（P＞0.05）,表儿茶素在0.5 h内完全降解,绿原酸和原花青素B2在0.5 h内分别显著下降40.78%和28.99%（P＜0.05）。     

环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法的建立与应用

建立基于时间分辨荧光免疫分析技术的环丙沙星(CPF)间接竞争检测方法。将环丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF标准品或样品中CPF与CPF包被原(CPF-OVA)共同竞争限量的CPF抗体,用铕标羊抗兔IgG示踪,建立环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法(CPF-TRFIA);考察包被质量浓度、抗体稀释液、反应时间等对方法灵敏度的影响。结果表明：在优化条件下,该方法的检测限为0.5μg/L,半抑制质量浓度(IC50)为4.32μg/L,线性范围(IC20～IC80)为1.14～28.85μg/L;该方法对蜂蜜中CPF平均回收率为80.66%～100.30%,对牛奶中CPF的平均回收率为76.30%～95.22%,两者的平均批内和批间变异系数分别为7.42%和10.92%。CPF-TRFIA间接竞争法测定环丙沙星具有灵敏度高、特异性好、性能稳定的优点,适于高通量筛查。     

几种物质对龙眼果肉中过氧化物酶和脂肪氧合酶的影响

采用单因素及均匀设计多因素实验 ,研究究了蔗糖、CaCl2 、柠檬酸、抗坏血酸、没食子酸对龙眼果肉中过氧化物酶 (POD)、脂肪氧合酶 (LOX)的影响。结果表明 :上述试剂达到一定浓度时均对POD、LOX产生抑制作用 ,其中柠檬酸、抗坏血酸和没食子酸之间存在协同增效作用 ,当 3者的质量浓度分别为 6 .1、0 5、0 0 5g/L时 ,龙眼果肉中POD、LOX相对酶活分别为 16 7%、0 0 5 % ,抑制率分别为 83 3%、99 5 %     

基于树状分子提高AMOZ半抗原免疫原性的研究

3-氨基-5-吗啉甲基-2-恶唑烷酮(AMOZ)是抗生素呋喃它酮的代谢产物,具有潜在致畸、致癌性。由于分子量太小,其特异性抗体制备尚未突破,无法建立直接检测的免疫分析方法。为了制备针对AMOZ的特异性抗体,本研究首次尝试采用赖氨酸树状分子(G5)替代传统载体蛋白,将AMOZ的乙醛酸衍生半抗原AMOZA直接偶联到G5分子上制备免疫原(AMOZA-G5),免疫Balb/c小鼠,收集抗血清并进行间接竞争酶联免疫分析(ci ELISA)测定。结果发现:传统免疫原AMOZA-BSA对应的抗血清无法特异性识别游离AMOZ,而AMOZA-G5对应的抗血清则可以特异性识别游离AMOZ,在ci ELISA实验中,1μg/m L AMOZ对抗体活性的抑制率为35%,说明以赖氨酸树状分子为载体可以有效提高小分子半抗原的免疫原性。本研究对于制备其他小分子半抗原的特异性抗体提供了方法借鉴。     

食品质量与安全专业的发展及构想

食品质量与安全直接关系公众的健康,与之紧密相关的食品质量与安全专业随着社会对食品安全的关注以及公众对生活质量的追求而成为当前的热门专业,其发展之快在中国高教历史上实属罕见。通过专业调查资料,分析全中国及中国华南农业大学食品质量与安全专业的现状,指出专业建设中存在的问题,并对专业发展提出相应的策略和思路。