手性农药兽药免疫分析研究进展

手性药物对映异构体在生物体内的代谢转化和毒性作用等具有立体选择性差异,因此从对映体形态水平上加强手性农药兽药的分析研究十分必要。免疫分析法简单快捷、特异性高、灵敏度高,因而成为手性农药兽药分析研究的热点。本文介绍了近年来免疫分析法在手性农药兽药分析检测方面的应用情况,综述了抗体立体选择识别性、分子模拟技术及定量构效关系等在手性药物免疫识别机制研究中应用,并展望手性免疫分析技术的研究和应用发展趋势。     

食品安全信息获取渠道的选择影响分析

目的探讨消费者对食品安全信息传播方式的选择倾向及其影响因素。方法对全国7个地区消费者进行调查,运用SPSS软件对调查数据进行二元logistic回归模型分析。结果消费者对食品安全信息传播方式的选择有待多样化;性别、婚姻、居住地、年龄、学历等消费者个体因素及其食品安全关注度、食品安全信息信任度、对认证产品的认知、咨询主动性、维权意识、政府信息留意等因素对消费者的食品安全信息获取渠道均有显著性影响,但具体的传播渠道间的显著影响因素存在区别。结论不同的传播渠道要考虑不同的受众,政府发布的信息需要通过多渠道进行传播,并且科学家、食品领域专家、媒体需紧密合作,以促进食品安全信息的广泛传播。     

基于最大类间方差自适应阈值的五花肉肥瘦自动识别方法

对五花肉的检测常使用化学检测或人工检测方法,但这两种常用方法都需要花费较大的成本和检测时间,且误差较大。为了提高识别准确度,降低检测成本,实现自动化检测。本文以猪肉腹部的五花肉为研究对象,使用最大类间方差自适应阈值法对图像R基色图层进行背景分离,并对图像进行中值滤波处理,从而获取图像的五花肉区域。针对五花肉图像中肥肉与瘦肉对比度不强的特点,采用有限对比度自适应直方图函数来增强肥瘦肉之间的对比度,再使用最大类间方差自适应阈值法分割五花肉图像的肥肉与瘦肉区域。通过实际图像样本的实验结果表明,本文方法比传统新近方法的识别准确率高。这说明本文方法通过自动阈值进行图像滤波处理方法可以有效区分肥肉和瘦肉区域,对其进行有效检测和识别。     

酱油发酵过程中融合魏斯氏乳酸菌促进瓜氨酸的积累

氨基甲酸乙酯是一种广泛存在于发酵食品中的2A级致癌物,除了酒类,发酵豆制品中也有检出。本文以EC含量较高的高盐稀态发酵酱油为主要研究对象,分析了发酵过程中EC形成与尿素和瓜氨酸之间的关系,并探讨了酱油乳酸发酵时期融合魏斯氏乳酸菌(Weissella confusa)积累EC前体瓜氨酸的情况。结果显示酱油发酵液p H为4.8时EC开始形成,且与瓜氨酸含量显著相关,分离该阶段酱醪的乳酸菌发现Weissella confusa为主要菌株,其积累瓜氨酸能力差异很大。瓜氨酸在不含Na Cl培养基中主要在稳定期后释放,而在含18%Na Cl培养基中在生长过程中不断积累。盐胁迫是Weissella confusa积累瓜氨酸的主要原因,适宜的p H和高浓度的葡萄糖也能促进Weissella confusa积累瓜氨酸。     

间接竞争化学发光酶联免疫分析法检测番茄酱和果汁中异细交链孢菌酮酸

针对番茄酱和果汁中链格孢霉菌毒素污染问题,建立异细交链孢菌酮酸(iso-tenuazonic acid,ITe A)间接竞争化学发光酶联免疫分析法。通过棋盘法和单因素试验确定最佳包被原质量浓度为15.6 ng/m L、抗体质量浓度为稀释96 000倍、缓冲体系pH 7.4、竞争反应时间和二抗反应时间分别为40 min和50 min。方法IC50为2.13 ng/m L,线性范围为0.50~9.12 ng/m L,检测限为0.10 ng/m L,与结构功能类似物交叉反应率均小于0.1%,样品添加回收率在78.60%~110.83%之间,变异系数均小于15%。本方法适用于样品中ITe A污染的特异性快速筛查。     

抗克伦特罗单链抗体基因构建及蛋白结构模拟

目的：构建抗克伦特罗单链抗体(scFv)基因cbl,进行蛋白质结构模拟并对其理化特性进行分析。方法：采用重叠延伸PCR 方法,以能特异性分泌抗克伦特罗mAb 的杂交瘤细胞株5D1 为原料,构建抗克伦特罗scFv 基因cbl,进行测序,采用生物信息软件对氨基酸序列推导并进行结构预测,同时对理化性质进行分析。结果：抗克伦特罗scFv 基因cbl 全长720bp,对应225 个氨基酸,单链抗体分子量约为25826.6,等电点预测值8.78,为碱性蛋白质;二级结构显示抗克伦特罗单链抗体含α螺旋20 处,β折叠99 处,β转角28 处,随机卷曲93 处。cbl 三级结构建模显示重链(VH)和轻链(VL)形成一个疏水的" 口袋",Linker 游离于此结构之外,符合scFv 的结构特点,明显具有抗原结合位点的空间构象,理论上应该具有良好的抗原结合活性。结论：构建一个抗克伦特罗scFv 基因cbl,应用信息学技术所获得的预测和分析结果为抗克伦特罗单链抗体的进一步表达、纯化和活性研究提供信息。     

微波消解-石墨炉原子吸收光谱法连续测定水果和蔬菜中铅铬镉

建立了用微波消解样品,石墨炉原子吸收光谱法在同一体系中连续测定水果和蔬菜中重金属铅(Pb)、铬(Cr)、镉(Cd)的方法。研究了消解试剂、消解温度和时间对样品消解效果的影响,优化了石墨炉原子吸收光谱法测定条件。在最佳实验条件下,Pb、Cr、Cd 的线性范围分别为0 ～40、0 ～80、0～3μg/L,检出限分别为0.293、0.037、0.850μg/L,相对标准偏差为2.1%～5.3%,回收率为95.0%～101.9%。用于实际样品测定结果令人满意。     

从三聚氰胺事件谈食品质量控制

三聚氰胺是一种用途广泛的有机化工原料,其含氮量达66%左右,一些不法企业在饲料和食品中大量添加,造成产品中粗蛋白质虚高的假相,严重威胁人类健康。本文分析了三聚氰胺的性质、假蛋白原理及在食品中添加的危害等,从而找出食品质量控制的方法,以期为提高动物产品的质量和食品安全性提供参考。     

体外模拟胃肠消化中山楂多酚及抗氧化活性的变化

本实验研究了山楂多酚、黄酮及抗氧化活性在体外模拟胃肠道环境下的变化规律,并利用高效液相色谱法测定了胃肠消化对山楂中5 种主要单体酚类化合物的影响。结果表明：山楂多酚在模拟胃液消化中稳定性较好,总多酚、黄酮含量及抗氧化能力均无显著性变化（P＞0.05）;而在模拟肠液消化中山楂多酚易发生降解,总多酚、黄酮含量在0.5 h内分别降低16.26%和7.46%,抗氧化能力也随之降低10.25%。高效液相色谱测定结果显示,5 种单体酚类化合物含量在胃液消化中无显著性变化（P＞0.05）;而在肠液消化中变化情况不相一致,其中金丝桃苷和异槲皮苷含量无显著性变化（P＞0.05）,表儿茶素在0.5 h内完全降解,绿原酸和原花青素B2在0.5 h内分别显著下降40.78%和28.99%（P＜0.05）。     

环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法的建立与应用

建立基于时间分辨荧光免疫分析技术的环丙沙星(CPF)间接竞争检测方法。将环丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF标准品或样品中CPF与CPF包被原(CPF-OVA)共同竞争限量的CPF抗体,用铕标羊抗兔IgG示踪,建立环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法(CPF-TRFIA);考察包被质量浓度、抗体稀释液、反应时间等对方法灵敏度的影响。结果表明：在优化条件下,该方法的检测限为0.5μg/L,半抑制质量浓度(IC50)为4.32μg/L,线性范围(IC20～IC80)为1.14～28.85μg/L;该方法对蜂蜜中CPF平均回收率为80.66%～100.30%,对牛奶中CPF的平均回收率为76.30%～95.22%,两者的平均批内和批间变异系数分别为7.42%和10.92%。CPF-TRFIA间接竞争法测定环丙沙星具有灵敏度高、特异性好、性能稳定的优点,适于高通量筛查。