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建立高脂饮食诱导金黄地鼠血脂紊乱模型,从肠道菌群和胆汁酸代谢关系角度探究魔芋葡甘露聚糖(konjac glucomannan,KGM)降脂机理。5 周龄地鼠随机分为Control组、高脂饮食(high fat diet,HFD)组、2%(质量分数,下同)KGM组、6% KGM组和10% KGM组,干预5 周后测定血清和肝脏脂质水平,并分析KGM对肠道菌群及其代谢物胆汁酸代谢的影响。结果表明,6%和10% KGM干预可显著降低血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)浓度以及肝脏中TC浓度。HFD组分别与Control组、KGM组比较后共筛选出51 种差异代谢物,经类别富集分析后发现,胆汁酸类物质种类在所有代谢物类别中占比最高(24%)。此外,京都基因与基因组百科全书代谢物通路富集分析显示初级胆汁酸合成代谢途径存在差异。盲肠内容物肠道菌群分析及胆汁酸测定结果表明,6%和10% KGM干预后嗜胆菌属(Bilophila)以及具有胆盐水解酶(bile salt hydrolase,BSH)活力的双歧杆菌属(Bifidobacterium)和乳杆菌属(Lactobacillus)相对丰度显著下降,且脱氧胆酸(deoxycholic acid,DCA)和石胆酸(lithocholic acid,LCA)含量降低。此外,在6% KGM干预组中,肝脏中胆汁酸合成关键酶胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)的基因表达上调。综上,KGM可通过降低具有BSH活力的肠道菌群和嗜胆菌属相对丰度及上调CYP7A1基因表达调节机体胆汁酸水平,从而改善机体脂质代谢紊乱。 相似文献
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采用重叠延伸的方法成功将抗孔雀石绿(malachite green,MG)单克隆细胞的轻链VL和重链VH用连接肽(Gly4Ser)3连接,形成单链抗体(single chain variable fragment,scFv)基因,并将其酶切连接进入含有碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,PhoA)基因的载体plip6/GN中,成功构建重组质粒plip6/GN-MG-scFv。随后重组质粒转入大肠杆菌BL21,经诱导表达后,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blotting鉴定结果表明所获得的融合蛋白scFv-PhoA大小约72 kD。利用scFv与MG特异性结合的活性和PhoA催化对硝基苯磷酸二钠的显色机制,经过直接竞争酶联免疫吸附法测定融合蛋白scFv-PhoA的IC50为9.81 ng/mL。本方法操作简单、灵敏度高且检测时间短,这为进一步进行MG免疫法快速检测提供了参考。 相似文献
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辐照处理对魔芋葡甘聚糖肠道益生作用的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
为探究辐照改性技术对魔芋葡甘聚糖(konjac glucomannan,KGM)肠道益生性的影响,以60Co为辐射 源制备0、10、20、30 kGy辐照剂量的KGM样品,采用健康志愿者粪便体外厌氧发酵,比较不同辐照剂量KGM 体外发酵液pH值、短链脂肪酸含量、有益菌及有害菌数目、双歧杆菌数量/大肠杆菌数量(B/E值)、益生元指数 (prebiotic index,PI)的差异。结果表明:相对于葡萄糖阳性对照,不同辐照剂量KGM均能有效降低发酵液pH 值,维持酸性环境,促进短链脂肪酸生成,同时改善发酵液微生物构成,提高B/E值及PI。在0~30 kGy辐照范围 内,随辐照剂量增大,KGM发酵液短链脂肪酸生成量增加,PI升高,0、10、20、30 kGy KGM的PI分别为0.48、 0.61、0.76、0.78。综上,KGM具有良好的肠道益生元作用,γ-辐照改性有助于进一步提高KGM的肠道益生性,综 合考虑辐照效率及KGM肠道PI,推荐20 kGy作为制备KGM低聚糖的适宜辐射剂量。 相似文献
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采用时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)建立简便、快速、灵敏的盐酸克伦特罗(clenbuterol hydrochloride,CBL)检测方法。以自制盐酸克伦特罗单克隆抗体包被96 孔微孔板作为固相抗体,Eu3+ 标记抗原与样品中的CBL 竞争结合抗体,建立直接竞争荧光免疫分析体系。猪尿、组织样品添加回收率实验表明:方法灵敏度为0.02μg/L,样品回收率为91%~101%,与沙丁胺醇、莱克多巴胺等结构类似物的交叉反应率均小于1%。建立盐酸克伦特罗铕标抗原直接竞争时间分辨免疫检测方法,方法灵敏度高、特异性强,且操作简单,完全可以满足现有实际检测需求。 相似文献
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混合酶在澄清荔枝汁中的应用研究 总被引:7,自引:2,他引:7
采用正交设计研究了果胶酶、纤维素酶、木瓜蛋白酶和α-淀粉酶联合使用对荔枝果汁澄清度、稳定性与营养成分的影响。结果表明,混合酶用于澄清荔枝汁的最优工艺条件是纤维素酶量600U/100g,果胶酶量1000U/100g,α-淀粉酶量250U/100g,木瓜蛋白酶量10000U/100g,酶解温度60℃,酶解时间4h,PH4.0,且pH为主要影响因素。与原汁相比,经混合酶处理后的荔枝澄清汁的稳定性得到提高,且可溶性固形物、总糖、还原糖、总酸和氨基酸含量也明显得到提高。 相似文献