肠致病性大肠杆菌O128∶K67（B12）的脉冲场凝胶电泳分型方法研究

目的：应用脉冲场凝胶电泳技术（pulsed field gel electrophoresis,PFGE）对由原料乳和牛粪中分离的肠致病性大肠杆菌EPEC O128∶K67（B12）进行基因分型,了解来自天津市9个奶牛场和保定市9个奶牛场的原料乳样品和牛粪样品分离株的遗传相关性。方法：对7株肠致病性大肠杆菌EPEC O128∶K67（B12）按照脉冲场凝胶电泳方法进行基因分型。结果：用XbaI限制性内切酶对分离株的基因组DNA进行酶切,经PFGE可形成17～20条清晰条带的分离株DNA指纹图谱,由聚类分析树状图可将7株分离株分为3个基因群。结论：7株肠致病性大肠杆菌EPEC O128∶K67（B12）分离株存在3个图谱类型,各型之间不紧密相关,未发现单个基因型菌株流行的迹象。研究发现,脉冲场凝胶电泳分型技术分辨率高、可靠、应用性强、技术先进,对原料乳的致病菌溯源有较大的应用前景。     

益生菌制剂及其发酵性乳制品

益生菌具有特殊的营养和生理功能作用,由于酸奶是益生菌的良好载体,因此益生酸奶的出现成为市场的新宠.本文综述了益生菌的概念和益生菌菌株的选择标准,益生菌作为新型酸奶发酵剂的使用情况,以及益生酸奶的生产与消费情况.     

AI-2的体外合成及其对植物乳杆菌KLDS1.0391细菌素合成的影响

本文采用单因素实验,优化AI-2合成的孵育温度、pH、酶浓度以及孵育时间。利用优化的合成条件,成功合成具有生物活性的AI-2,活性约为阳性对照的2倍。添加合成的AI-2到MRS培养基中,研究AI-2对植物乳杆菌KLDS1.0391生长和细菌素合成的影响,并采用实时荧光定量PCR分析培养15 h的植物乳杆菌KLDS1.0391的细菌素结构基因pln EF的转录水平。结果表明:AI-2合成的最优条件为:0.5 mg/m L Pfs蛋白、1.0 mg/m L Lux S蛋白、2 mmol/L SAH,p H7.5,37℃孵育5 h。添加合成的AI-2对植物乳杆菌的生长无明显影响;培养3 h后,相同培养时间时添加AI-2的实验组对枯草芽孢杆菌ATCC6633的抑菌圈直径显著高于空白对照和阴性对照组（p<0.01）;添加AI-2的实验组的pln EF基因的表达量上调至空白对照的2.89倍。本研究成功优化AI-2的体外合成条件;添加合成的AI-2对植物乳杆菌KLDS1.0391细菌素合成有促进作用,且这种促进作用可能与pln EF基因转录水平上调有关。      

婴儿源动物双歧杆菌消化道胁迫抗性及体外对免疫细胞活性影响的比较

以4 株婴儿源动物双歧杆菌乳亚种（Bifidobacterium animalis subsp. lactis）为研究对象,分析菌株对酸、胆盐、模拟消化道环境的耐受能力及对致病菌的黏附抑制作用,并评价体外对Caco-2细胞的黏附性。此外,测定菌株合成胞外多糖的能力,并探讨其与耐受性及黏附性的关联。经上述实验获得黏附性及抗性双优的菌株H15-2,再经脾淋巴细胞增殖实验、巨噬细胞能量代谢水平及巨噬细胞吞噬中性红能力3 个方面评价其免疫调节能力。结果表明：动物双歧杆菌H15-2对模拟胃肠道环境有较强的耐受性,对Caco-2细胞有较高的黏附能力,并对免疫细胞活性具有较好的调节作用,有应用开发潜力。     

双歧杆菌对肠上皮细胞粘附作用的研究状况

双歧杆菌是一种重要的生理性细菌，它对肠上皮细胞的粘附是其发挥生理作用的前提，也是评定益生菌剂效效果的主要指标之一。综述了目前双歧杆菌粘附作用的几个研究阶段，粘附作用的特点-种属特异性、宿主行异性和可逆性，粘附素-受体理论研究状况以及影响粘附作用的几个因素，并展望了未来双歧杆菌粘附作用的研究趋势。     

嗜酸乳杆菌增菌培养基的优化

针对嗜酸乳杆菌的营养需要,采用正交实验优化基础培养基及增殖因子的用量,得出最佳基础培养基配比是:大豆蛋白胨0.6%,胰蛋白胨0.6%,蛋白胨0.6%,牛肉浸膏1.2%,葡萄糖1%,低聚糖0.5%,乳糖0.5%,酵母浸出粉0.5%;最佳增殖因子添加量是:胡萝卜汁15%,西红柿汁15%,黄豆芽汁15%,11°啤酒5%。最后使用优化出的增菌培养基测定生长曲线,同时测定pH和滴定酸度的变化,确定增菌培养终止时间为10h,通过平板菌落计数,此时菌数可达6.8×109cfu/ml。     

乳杆菌对小鼠脾脏淋巴细胞增殖的影响

目的：体外评估7 种乳杆菌的免疫作用,探讨小鼠离体脾脏淋巴细胞在筛选免疫活性乳酸菌中应用的可行性。方法：用MTT 法观察不同种属、不同剂量的活性和热致死乳杆菌对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力的影响。结果：活性和热致死乳杆菌单独作用都能促进体外淋巴细胞增殖且均表现出剂量依赖关系,当活性和热致死乳杆菌剂量为107CFU/mL 时(即细菌与细胞的比例为10:1)的效果最为明显(P＜ 0.05),且活菌制剂的免疫调节作用优于热致死菌体 (P ＜ 0.05),其中活性罗伊氏乳杆菌、约氏乳杆菌和发酵乳杆菌刺激淋巴细胞的增殖指数(PI 值)明显较ConA诱导组高(P ＜ 0.05)。结论：正常离体小鼠脾脏淋巴细胞可用于体外初步筛选具有潜在免疫活性的乳杆菌,从而缩小用于动物实验的目标菌株的范围。     

乳酸菌细菌素分类与作用机制

乳酸菌细菌素作为天然的食品防腐剂,可抑制或杀灭食品中致病微生物和腐败微生物从而保护食品的安全。文中介绍了乳酸菌细菌素传统分类方法和新提出的分类方法,并且综述了乳酸菌细菌素的作用机制。     

羧甲基纤维素钠及酸性乳饮料加工工艺对其稳定性及粒径分布的影响

研究了羧甲基纤维素钠（CMC）及酸性乳饮料加工工艺对其稳定性及粒径分布的影响。通过离心沉淀法检测酸性乳饮料的稳定性．对影响稳定效果的主要加工工艺进行了试验。同时测定了这些加工工艺对产品粒径分布的影响,并分析了体系粒径分布与产品稳定性之间的关系。结果表明,CMC添加量、pH值、均质压力、调酸温度等因素都会影响酸性乳饮料的稳定性和粒径分布,其中CMC添加量和均质压力对结果影响明显,调酸温度次之,pH值对结果影响最小。     

脱脂乳粉为壁材通过喷雾干燥法制备微胶囊的技术研究

采用脱脂乳粉为壁材,色拉油为芯材,通过正交实验,根据芯材的滞留率确定微胶囊化的最佳工艺条件。实验结果表明:采用脱脂乳粉、色拉油、2%吐温-20乳化剂水溶液和水的质量比为40:10:10:90,在8000r/min条件下乳化15min,之后在进风温度为140±2℃、出风温度为80±2℃条件下喷雾干燥,色拉油滞留率接近60%。可见,此种方法制作的微胶囊包埋效果较好。