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Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白基因的克隆和原核表达 总被引:1,自引:1,他引:1
目的重组表达Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白(Surfaceimmunogenicprotein,SIP)基因,为进一步免疫学研究提供目标蛋白。方法用PCR的方法从GBSⅡ型标准株的基因组DNA中扩增出SIP基因,用T/A克隆法将其插入pMD18T载体,构建原核表达载体pET32aSIP,用BL21(DE3)/pET系统表达TrixSIP融合蛋白,SDSPAGE和质谱分析鉴定表达产物,并对表达蛋白进行初步纯化。结果PCR扩增产物经测序,证实与GenBank中Ⅰa/c型GBS的SIP的基因序列同源性为99%。SDSPAGE显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET32aSIP总蛋白中出现一条相对分子质量为66000的新蛋白带。质谱分析和蛋白质库的比较证实其为B族链球菌表面免疫相关蛋白(SIP)的可能性分数为74。结论已成功表达并初步纯化SIP,为SIP在细菌致病中的作用研究以及相关疫苗的制备奠定了基础。 相似文献
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基于量子化学理论,采用真实溶剂似导体模型(COSMO-RS)模拟了二元混合制冷剂R1234ZE+R290,R290+R227ea气液相平衡性质,该模型通过对单个分子的量子化学计算来预测多元体系的相平衡。将模拟的结果的饱和蒸汽压、气相组分的摩尔数及共沸点与文献提供的实验值比较,误差最大不超过4%,证明有很好的一致性。表明运用COSMO-RS模型预测混合制冷剂的气液相平衡是可行的。 相似文献
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首先考察了不同金属卤化物对乙醇一步液相氧化合成1,1-二乙氧基乙烷(DEE)的催化性能。结果表明,RuCl_3催化性能最好。然后考察了反应条件的影响,结果表明,以50 mL无水乙醇(0.86 mol)为反应物时,最佳催化反应条件为:反应温度120℃、氧气压力2MPa、反应时间3h、催化剂用量0.004%(以乙醇的物质的量为基准,下同)、搅拌速度600 r/min,此时乙醇转化率达到38.2%,DEE选择性达到78.9%。并且发现,Ru~(3+)不但对乙醇氧化成乙醛具有较高的催化活性,同时RuCl_3是一种温和的路易斯酸,可以较好地催化乙醇与乙醛的缩合反应。最后对RuCl_3催化剂的重复使用性进行了考察,催化剂重复使用20次后,依然有较高的催化活性。 相似文献
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采用^11B-NMR,^29Si-NMR和FT-IR对熔融法和溶胶-凝胶法制备的玻璃膜聚合结构进行了研究。结果表明;两种方法制备的玻璃膜结构中,硼离子以三配位和四配位两种方式存在,且存在多种结构单元,而「SiO4」四面体的聚合度则组成中硅含量的增加而提高。 相似文献