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肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠致病性大肠杆菌(EPEC)、产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)和肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)是引起腹泻、危害食品安全和人类健康的4 种主要大肠杆菌。本实验基于ETEC LT 基因、EPEC bfpA 基因、EHEC O 抗原基因和EIEC 侵袭性质粒基因序列,设计了4 对特异性引物,利用聚合酶链反应(PCR)和变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)技术,通过体系优化,建立了致腹泻性大肠杆菌多重PCR-DHPLC 检测方法,达到同时检测4 种致病菌的目的。该方法灵敏度高,最低检测限为EHEC 6 × 101拷贝/μL、ETEC 1.3 × 102 拷贝/μL、EPEC 9 × 101 拷贝/μL、EIEC 7 × 101 拷贝/μL。特异性试验表明,对22种共41 株细菌进行检测,所试6 株致腹泻性大肠杆菌均为阳性。实践证明,该方法具有良好的实用性,可用于ETEC、EPEC、EHEC 和EIEC 的单一或混合感染的检测。 相似文献