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人溶菌酶是一种天然广谱抑菌物质,在食品和医药工业有潜在应用前景。为获得高活性的人溶菌酶制剂,采用乳酸克鲁维酵母表达系统,对经密码子优化的人溶菌酶基因(h LYZ)进行分泌表达。将人工合成h LYZ插入到乳酸克鲁维酵母表达载体p KLAC1,构建重组载体p KLAC1-h LYZ,并用电脉冲法将SacⅡ线性化的重组质粒转化到乳酸克鲁维酵母GG799中。通过全细胞PCR鉴定,最后获得了一株多拷贝整合的基因工程菌h LYZ1。工程菌可以分泌表达分子量约14 ku的目的蛋白质,与预期大小相符。摇瓶发酵培养128 h,酶活最高达到1430 U/mL。抗菌活性检测结果显示,重组人溶菌酶对溶壁微球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌有较好的溶菌活性。本研究成功地在乳酸克鲁维酵母中表达了重组人溶菌酶,表达的蛋白具有较高的酶活性,试验结果为利用乳酸克鲁维酵母表达系统规模化生产重组人溶菌酶奠了基础。 相似文献
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采用等体积浸渍法制备了一系列不同载体的HgCl2催化剂,利用BET、原子荧光光谱仪(AFS)、元素分析仪(EA)等对样品进行了表征,考察了催化剂在固定床反应装置上进行乙炔氢氯化反应的性能,同时对催化剂失活原因进行了初探。结果表明,不同载体催化剂催化性能和失活原因差异很大,其中以AC-2(沥青基球形炭)为载体的HgCl2/AC-2催化性能最佳,当HgCl2含量为5%(质量分数)、乙炔空速36 h-1、温度140 ℃ 、n(HCl)∶n(C2H2)=1.05~1.1时,其初始转化率>99%(比HgCl2/AC-1提高39%),选择性接近100%,寿命可达3168 h,催化性能优于现有工业高汞催化剂。 相似文献