一株低温碱性脂肪酶产生菌TS182的分离与鉴定研究

通过Tween-80平板初筛和摇瓶发酵复筛,从连云港海域海水及海泥样品中分离的菌株中筛选获得一株低温碱性脂肪酶高产菌株TS182。通过形态学、生理生化以及分子生物学鉴定菌株TS182为荧光假单孢菌（Pseudomonas fluorescens）。菌株TS182所产脂肪酶最适温度和最适pH分别为15℃和9．0。     

褐藻寡糖对3种水产致病菌抗菌活性研究

采用氧化法制备了褐藻寡糖,研究了褐藻寡糖对3种常见水产致病菌的抗菌活性.结果表明,褐藻寡糖对嗜水气单胞菌、白色念珠菌有较强的抗菌活性,且抗菌活性随寡糖浓度的增大而增强.褐藻寡糖对鳗弧菌在指数期前期几乎没有抗菌活性,但指数期后期表现出较强的抗菌活性,且随着寡糖浓度增大抗菌活性增强.     

深海古菌超嗜热α-淀粉酶易错PCR致突变的条件研究

采用易错PCR技术在深海古菌菌株Thermococcus siculiHJ21超嗜热α-淀粉酶基因中引入突变,研究了Mg^2＋浓度、Mn^2＋浓度、dCTP和dTTP浓度等条件对突变率的影响。结果表明,在Mg^2＋浓度为5.0 mmol/L,Mn2＋浓度为0.4 mmol/L,dTTP和dCTP浓度为1.5 mmol/L的条件下,碱基突变率为3.2%。     

一株产几丁质脱乙酰酶海洋细菌的Rhodococcus hoagii筛选、鉴定及酶学性质

从连云港高公岛海域采集的海泥中使用平板变色圈法初筛和摇瓶发酵复筛后,获得一株产几丁质脱乙酰酶的菌株MCDAⅡ-2。综合形态学特征以及16SrDNA序列分析最终将菌株MCDAⅡ-2鉴定为Rhodococcus hoagii。进而研究其酶学性质,得该几丁质脱乙酰酶最适催化温度为35℃,最适pH为8.0。Na^+、Mg^2+、Li+、Sr^2+对酶促反应起到促进作用,Ca^2+、Ba^2+、Co^2+、Cd^2+、Fe^2+及EDTA对酶促反应起到了抑制作用,而K^+对酶促反应影响较小。酶在25℃~35℃时较稳定,在中性和弱碱性条件下稳定性较好。本次研究的结果将为几丁质脱乙酰酶的工业化应用奠定基础。     

产几丁质脱乙酰酶海洋细菌的筛选鉴定及产酶条件优化

从海洋样品中筛选产几丁质脱乙酰酶的细菌,对高产菌株进行鉴定,并利用响应面法优化其发酵条件。结果表明,利用添加硝基乙酰苯胺的平板,根据黄色变色圈从海州湾海域海泥样品中筛选获得一株产几丁质脱乙酰酶的细菌MCDA3-3。通过形态学、生理生化特征以及16S rDNA序列分析,将该菌株鉴定为海洋硝酸盐还原菌（Nitratireductor aquimarinus）。利用单因素和响应面法优化菌株MCDA3-3发酵产酶培养基和培养条件,获得最佳发酵培养基配方为木薯淀粉1.1%,玉米浆1.0%,FeCl3·6H2O 0.045%,陈海水配制,pH 5.7;最佳发酵条件为接种量4%,30 ℃、180 r/min发酵48 h。在此条件下酶活为4.07 U/mL,是优化前的2.3倍。     

发酵法制备沙光鱼多肽及其抗氧化活性

将米曲霉接种到pH5.0 的沙光鱼匀浆液中进行发酵培养,利用米曲霉产生的蛋白酶水解沙光鱼蛋白。研究发酵过程中蛋白酶的产生及沙光鱼蛋白的水解动态;对发酵液进行超滤,测定不同截留分子质量的发酵液清除自由基的活性及抗氧化活性。结果表明：随着发酵时间的延长,沙光鱼蛋白的水解度和多肽得率不断增加,多肽的平均链长度降低。发酵48h 后,多肽链平均长度为14,水解度为26.6%,多肽得率最高达到8.98%,抗氧化能力较强。不同截留分子质量的多肽液中,平均肽链长度为14 个氨基酸残基的多肽超滤液体外抗氧化能力较强。     

低温α-淀粉酶产生菌GS230发酵条件与酶学性质研究

对分离自连云港海域的低温α-淀粉酶产生菌Pseudoalteromonas sp．GS230进行了产酶条件的优化和酶学性质的研究。结果表明,该酶在0．4％可溶性淀粉、0．25％牛肉膏、1．5％蛋白胨以及5％接种量、培养32h产酶量达到最高。对低温仪．淀粉酶性质进行研究发现,该酶的最适作用温度和pH值分别是30℃和pH8．0、0℃时相对酶活达28％。对酶稳定性的研究发现,该酶对热敏感,30℃半衰期为1．5h,Ca^2＋可以提高酶的稳定性;在反应体系中添加5mmol／L Ca^2＋,30℃保温1．5h,残余酶活达93％。Na^＋K^＋、Ca^2＋等对酶有激活作用,而Pb^2＋、Cu^2＋、Fe^3＋等强烈抑制酶活性。     

产抗氧化胞外多糖海洋细菌Bacillus subtilis OST23a的诱变育种

利用产生抗氧化活性胞外多糖的海洋细菌Bacillus subtilis OST23a为出发菌株进行高产菌株的诱变选育。采用紫外、硫酸二乙酯复合诱变处理后筛选得到一株高产胞外多糖的优良突变菌株UD292,发酵产胞外多糖水平达到43.92mg/L,较出发菌株提高了6.26倍,且多糖的抗氧化活性没有显著变化。对突变菌株进行连续传代实验结果表明突变菌株遗传性状稳定。     

产黑芥子酶鞘氨醇杆菌属菌株RJ35的筛选、鉴定及酶学性质

从油菜田的土壤中筛选到1株产黑芥子酶菌株RJ35,对其进行形态学与分子生物学鉴定,并对RJ35产的黑芥子酶进行纯化和酶学性质研究。菌株鉴定结果显示RJ35为鞘氨醇杆菌属。通过超滤浓缩及凝胶层析对黑芥子酶进行纯化,结果显示该黑芥子酶分子质量约为100 kDa。酶学性质研究结果显示该黑芥子酶的最适pH值和最适温度分别为7.5和40℃,且金属离子对其无显著激活作用。高效液相色谱测定结果表明该黑芥子酶可水解萝卜种子提取物产生萝卜硫素。当粗酶液在最适条件下水解萝卜种子提取物30 min时,萝卜硫素产率可达5.95 mg/g（占种子提取物质量计）。本研究结果为微生物源黑芥子酶的开发及应用奠定了实验基础。     

优良山楂酒酿造酵母菌株的筛选与鉴定

为筛选适合酿造山楂果酒的优良酿造酵母,对来自连云港花果山野生山楂样品中的酵母菌进行富集培养、稀释涂布和划线纯化,获得酵母菌株16株。通过杜氏管发酵法进行初筛,产酒精能力测试复筛,获得酵母菌株HTY06。产酒精能力测试结果表明,该酵母菌发酵10 d即可产酒精10.5%(体积分数)。并对菌株HTY06发酵力、凝聚性进行测试,结果表明该菌株发酵力较强,凝聚性强。通过形态学、生理生化及18 S rDNA序列同源性分析将菌株鉴定为酵母属(Saccharomyces)的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。