蛋白质胰蛋白酶水解过程双位点漏切肽段的质谱鉴定

为说明胰蛋白酶漏切位点数目设置对蛋白质搜库结果的影响,采用基质辅助激光解吸电离 串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)高置信度地鉴定了细胞色素C和大豆脱落胁迫成熟蛋白。在细胞色素C和大豆脱落胁迫成熟蛋白的胰酶水解液中分别发现了2个和4个双胰酶漏切位点肽段,确认了文献中报道的当赖氨酸和赖氨酸相邻或赖氨酸、精氨酸各自与天冬氨酸或者谷氨酸相邻时,会引起胰蛋白酶的漏切。此外,还发现组氨酸 赖氨酸 异亮氨酸/ 丙氨酸结构也有此现象。本研究中检测出漏切肽段并没有明显提高序列覆盖率,但显著增加了蛋白质鉴定结果的确定性。在实际样品分析中如将漏切数设置为1有可能产生肽段鉴定的假阴性。     

宁波商会·国贸中心深基坑施工与监测

针对宁波商会·国贸中心深基坑所处工程场地土层的不利工程特性和错综复杂的周边环境,介绍该深基坑工程的支护技术、施工措施以及监测方案,并从工程质量和施工安全方面进行了经验总结.     

国家体育场大型空间箱形截面扭曲构件的加工技术

国家体育场钢结构工程,构件弯扭,建筑造型复杂,加工制作难度非常大。本文通过对构件形成的原理与规律的研究,为工程加工制作的顺利进行奠定了基础,开发了三维特形构件软件,提高了生产效率,并对弯扭构件的加工、制作全过程进行了总结。     

基于ARM11电力载波视频监控服务器设计与实现

针对视频监控架设受环境和空间影响,视频数据线布线复杂与布线成本较高的问题。设计了一种基于电力载波的视频监控服务器,采用嵌入式处理器S3C6410作为控制核心,INT6400和INT1400组成电力载波传输模块,传输视频信号。该服务器具有体积小、功耗低、安装方便等优点,有广阔的市场应用前景。     

利用质谱分析法从酶谱鉴定嗜热真菌木聚糖酶

通过对前期筛选到的一株嗜热真菌Talaromyces thermophilus WYN9进行产木聚糖酶的诱导和非诱导培养。诱导培养的上清液中可以检测到木聚糖酶酶活。在非变性胶和变性胶SDS-PAGE中,诱导和非诱导的酶谱条带差异明显。以非诱导酶谱为对照,将诱导酶谱中与其有显著差异的条带切下,回收蛋白,测定酶活。将有木聚糖酶酶活的蛋白通过SDS-PAGE进一步分离纯化,切胶后使用胶内酶切法进行预处理,使用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF）进行分析。结果表明该蛋白与拟青霉属Paecilomyces sp. J18的内切木聚糖酶高度同源。根据质谱分析结果设计兼并引物,通过交错式热不对称PCR（thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR）扩增,获得了TtXynA基因全长。根据Kimura双参数模型用临近相邻法构建了TtXynA及其同源蛋白的进化树。     

H420型气动夯管锤在武汉铺设φ820钢管

本文介绍了H420型气动夯管锤首次在武汉地区成功地铺设了φ820钢管,穿越距离达65.8m,口径大,距离长。文中总结了方案的选择与施工方法,旨在为困难铺管条件下选用夯管法提供借鉴。     

H420型气动夯管锤在武汉铺设Ф820钢管

本文介绍了H420型气动夯管锤首次在武汉地区成功地铺设了Ф820铜管,穿越距离达65.8m,口径大,距离长.文中总结了方案的选择与施工方法,旨在为困难铺管条件下选用夯管法提供借鉴.     

水平定向钻施工中地表隆起和劈裂冒浆计算分析及对策

地表隆起和劈裂冒浆是关系到水平定向钻施工环境安全的一种典型问题,控制不当往往引发上覆土层及地面变形破坏、污染环境等施工事故.通过钻井液压作用条件下的上覆土层受力状态分析,对地表隆起和劈裂现象的形成机理进行剖析,找到这种现象产生的根本原因和主要影响因素,为水平定向钻工艺设计和施工环节防止发生地表隆起和劈裂破坏提供思路和依据,从而有效降低此类事故的发生几率和损失.     

大跨钢桁架高空滑移安装施工技术

结合某工程实例,在分析常规安装方法缺点的基础上优选高空滑移法,并详细介绍了此施工技术的工艺原理和施工工艺流程,总结了主要质量和安全控制要点,指出该施工安装技术的诸多优点在类似工程中具有良好的推广应用前景。     

亚胺及其相关离子在区分赖氨酸和谷氨酰胺残基中的应用

完全从头测序要求区分肽段中的同量异序氨基酸谷氨酰胺和赖氨酸,而这通常需要借助高分辨质谱。谷氨酰胺和赖氨酸都可以产生m/z 101亚胺离子和m/z 84亚胺相关离子,尽管已知赖氨酸亚胺离子m/z 101有时强度较弱,以及m/z 84离子可预示赖氨酸的存在,但该特征能否用于区分赖氨酸和谷氨酰胺仍存在争议。本工作以合成肽段和蛋白质胰酶水解肽段为研究体系,利用基质辅助激光解吸电离的高能碰撞诱导解离模式产生的亚胺及其相关离子的相对强度区分这两种氨基酸。结果表明：谷氨酰胺更易产生m/z 101离子,而赖氨酸更易产生m/z 84 和m/z 129离子。对于不同时含有赖氨酸和谷氨酰胺的肽段,使用m/z 84离子与亚胺离子m/z 101的相对强度比值,而非它们的绝对强度,以及m/z 101离子的测量值,可以直接判断序列中存在的是赖氨酸还是谷氨酰胺。对于含有谷氨酰胺,并以赖氨酸结尾或含有漏切赖氨酸的肽段,该强度比可为序列中谷氨酰胺的个数和位置提供参考。因此,低质量区提供的亚胺及其相关离子信息有助于区分赖氨酸和谷氨酰胺。