植物油DNA提取和基因检测研究进展

基因检测方法以其快速、高效、灵敏、准确的特点而广泛应用在植物油真实性和转基因成分鉴定中。但植物油大都经过精制加工,DNA含量极少且完整度低,这对植物油的基因提取和检测造成了极大的困扰。本文对植物油DNA提取和基因检测进展进行了综述,并对以后的发展进行了展望,以期为研究者提供一定的理论参考。     

超高压液相色谱-串联质谱法测定乳制品中性激素类兴奋剂多残留的研究

随着生活水平的提高, 乳制品已是人们生活中不可缺少的一部分.乳制品中的性激素类兴奋剂残留的检测和判定, 近年来已成为国内外广泛关注的一个热点.本研究在运用农业部标准方法的同时, 对其样品前处理方法中存在的缺陷进行了改进, 优化并选择了质谱分析的仪器条件, 尤其是锥孔电压和碰撞能量的选择, 建立了同时测定乳制品中7种性激素的超高压液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法.样品经过匀浆, 乙腈和乙酸乙酯提取, 固相萃取柱净化, 液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱, 正离子多反应监测(MRM)模式进行测定.采用BEH C18色谱柱, 以含0.1 %甲酸的水和乙腈为流动相进行梯度洗脱.实验结果表明, 7种性激素的方法检测限为0.2～0.4 μg/kg, 基质加标回收率为65～72 %, 相对标准偏差为12.5～24.2 %.实际样品的分析表明, 该法可实现对样品进行快速、灵敏、准确的定性定量分析, 尤其适合于脂肪和蛋白含量较高的含乳制品.     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定葡萄酒中甜味剂、防腐剂和色素

建立了高效液相色谱-串联质谱仪(HPLC-MS/MS)同时测定葡萄酒中甜味剂(安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖、纽甜、阿力甜和甜菊糖苷)、防腐剂(脱氢乙酸)和色素(诱惑红、赤藓红、苋菜红、胭脂红、柠檬黄、日落黄、亮蓝)含量的新方法。样品经超纯水稀释5倍,微孔滤膜过滤后直接进样,用HPLC-MS/MS进行定量分析。Acquity UPLC HSS T_3柱为分析柱,甲醇-10 mmol/L乙酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源(ESI)正负离子切换多反应监测模式(MRM)检测,外标法定量。结果表明,16种添加剂在相应的浓度范围内线性关系良好(相关系数r~20.995),方法检出限在0.2～3μg/L之间,在3个不同浓度的添加水平下,平均回收率为89.1%～106.4%,相对标准偏差≤9.7%,满足日常检测的要求。该方法前处理简单,测定快速、准确、灵敏度高,适用于葡萄酒中16种添加剂的快速筛查和定量分析。     

人造奶油中反式脂肪酸含量分析

采用氢氧化钠-甲醇对样品中的脂肪酸和反式脂肪酸进行甲酯化处理,气相色谱仪测定,以十一碳酸甘油三酯为内标进行定量。分析测定了国内5家知名焙烤企业抽检的41种不同用途的人造奶油中反式脂肪酸含量,通过分析发现:不同用途的人造奶油脂肪酸含量和组成有所差异,而反式脂肪酸的组成基本一致:主要是C18:1 6t、C18:19t、C18:1 11t和C18:2 9c12t、C18:2 9t12c。反式脂肪酸含量范围为0.271%反式脂肪酸含量(占总脂肪酸)8.245%。其中反式脂肪酸含量(占总脂肪酸)1%的共有35种,占总抽检数的85.4%;含量3%的有两种,占总抽检数的4.88%。本次研究较客观地反映了目前国内主流市场上人造奶油中反式脂肪酸含量情况,为国家风险管理部门进一步加强政策引导和宣传力度,引导消费者培养和强化消费前阅读营养标签的习惯提供数据依据。     

SPE-PTV-GC-FID法定量分析食用植物油中的饱和烃类矿物油

建立了固相萃取柱(SPE)结合大体积进样-气相色谱-氢火焰离子检测器(PTV-GC-FID)定量分析食用植物油中饱和烃类矿物油(MOSH)的方法。样品经异辛烷提取,自制分子筛-硝酸银硅胶SPE复合柱净化,氮吹浓缩后用程序升温进样口大体积进样分析,外标法定量。重点考察了填料类型、填料用量、洗脱体积等因素对提取效率的影响。结果表明,在优化的条件下,液体石蜡标准溶液在10.0~500.0 mg/L范围内呈良好线性关系,R~2为0.9991,方法检出限和定量限分别为0.3 mg/kg和1.0 mg/kg,样品在30.0、50.0、100.0 mg/kg 3个水平下的加标回收率为95.7%~102.5%,相对标准偏差(RSD)范围为2.64%~4.93%。运用本方法对10个市售食用植物油样品进行了测定,MOSH含量在15.4~80.7mg/kg之间。本方法净化效果好、试剂消耗量少、检出限低且分析成本低,适用于食用植物油中饱和烃类矿物油残留的定量分析,具有较好的推广应用价值。     

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定 大米中无机砷

目的建立高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定大米中无机砷的分析方法。方法采用两种前处理方法对大米中的无机砷进行提取,经高效液相色谱分离后,利用电感耦合等离子体质谱进行测定。同时对大米样品进行微波消解后测定其中的总砷,通过无机砷及有机砷的总和计算两种前处理方法的回收率,从而对前处理方法进行比较。对磷酸二氢铵、碳酸铵以及磷酸氢二铵等缓冲盐进行选择,并对p H值进行优化,确定最优的流动相条件。结果以12.5 mmol/L磷酸氢二铵作为流动相,调节流动相p H为8.5,流速为1 m L/min,可以将5种无机砷形态完全分离。对两种前处理方法进行比较,发现两种前处理方法的提取效率均大于87.5%,其中酸-热辅助提取法的提取效率相对更高。结论该方法准确、简单,适合大米中无机砷的测定。     

气相色谱法测定焙烤食品中反式脂肪酸含量

反式脂肪酸是一种具有反式构型的不饱和脂肪酸,摄入量过多会对人体健康造成一系列不良影响。采用气相色谱法测定、内标法定量,对面包、饼干、蛋糕等11种市售常见焙烤食品中的反式脂肪酸含量进行测定分析。试验结果表明,13种反式脂肪酸甲酯异构体的分离良好,11种样品中反式脂肪酸含量为0.10%～2.81%,其中丹麦小牛角面包最高,为2.81%;若以占脂肪的比例计,则反式脂肪酸含量为1.18%～10.75%,其中以trans C18∶1为主要的反式脂肪酸,占所测总反式脂肪酸含量的46.59%～80.65%。     

QuEChERS结合高效液相色谱-串联质谱法测定粮谷中16种真菌毒素

建立了QuEChERS结合高效液相色谱-串联质谱仪(HPLC-MS/MS)同时测定粮谷中16种真菌毒素残留量的方法,样品经乙腈-水-乙酸(84∶15∶1,v/v)溶液超声提取,提取液采用C18、MgSO4净化,净化液过0.22μm微孔滤膜,用HPLC-MS/MS分析检测。Acquity UPLC BEH C18柱为分析柱,甲醇/乙腈(4+6)-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾正负离子(ESI+、ESI-)模式同时电离,多反应监测(MRM)模式检测,外标法定量。结果表明,16种真菌在相应的浓度范围内线性关系良好(相关系数r2>0.995),方法定量限为0.3~3.5μg/kg,在低、中、高3个不同浓度的添加水平下,平均回收率为90.6%~106.5%,相对标准偏差≤8.8%(n=6),满足日常检测要求。该方法前处理简单,测定快速、准确,灵敏度高,适用于粮谷中16种真菌毒素残留的定性和定量分析。     

微波消解-ICP-MS法测定富硒大米中5种元素的含量

建立了电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定富硒大米中Pb、As、Cd、Hg、Cr含量的方法,样品经微波消解后,直接用ICP-MS同时测定上述5种元素。结果显示,5种元素的检出限在0.009μg/L~0.038μg/L之间,标准曲线线性相关系数均大于0.999 5,方法精密度RSD5.7%,加标回收率在76.5%~108.1%之间,同时,用大米国家标准物质GBW10010对方法的准确性进行了确认。本文用建立的方法对富硒大米中铬、铅、镉、汞、砷的含量进行了测定,并对富硒大米的重金属残留作了初步调查。     

超高效液相色谱-质谱/质谱法快速测定饮料中8种甜味剂

建立了超高效液相色谱-质谱/质谱(UPLC-ESI-MS/MS)同时测定饮料中8种甜味剂含量的分析方法。碳酸饮料、果汁果味饮料和凉茶样品经蒸馏水简单稀释后,过0.22μm微孔滤膜,直接进入UPLC-MS/MS中分析检测;蛋白饮料经沉淀蛋白后,离心取上清,过0.22μm微孔滤膜,进入UPLC-MS/MS中分析检测。Waters Acquity HSS T3色谱柱为分析柱,0.1%乙酸水(V/V)-甲醇溶液为流动相,梯度洗脱。结果表明该方法在5-500μg/L的范围内线性关系良好(相关系数r>0.9965),方法的检出限、定量限均可达到饮料中甜味剂的检测要求。样品中添加5-50μg/L水平的甜味剂时,回收率范围为85%-107%,相对标准偏差小于12%(n=6)。该方法样品处理简单,测定快速、准确、灵敏度高,非常适合饮料中多种甜味剂的快速检测和定量分析。