谷氨酸生产菌S_(9114)中依赖于NADPH谷氨酸脱氢酶的纯化及性质

利用DEAE 纤维素离交柱层析、疏水柱层析和凝胶过滤层析等从谷氨酸棒杆菌S9114 中分离纯化出依赖于NADPH的谷氨酸脱氢酶 (GOH NADPH )。经HPLC测定 ,该酶的分子量为 188ku ;经SDS -PAGE电泳测得该酶的亚基分子量为 3 2ku。提示该谷氨酸脱氢酶由 6个亚基组成。该酶对NADPH具有高度专一性 ,在pH 7 5、3 7℃下 ,以α 酮戊二酸、NH4Cl和NADPH为底物时的米氏常数Km 分别为 9 2 2mmol/L、5 2 7mmol/L和 2 3 1× 10 -3mmol/L。最适反应pH为 7 5 ,最适反应温度为 42℃ ,并对热比较稳定。此外 ,KCl对GDH NADPH的活性具有激活作用。     

1,3-甘油二酯的功能性研究

研究了1,3-甘油二酯对大鼠的减肥和降血脂作用.实验分成5组:对照TAG组,3剂量组分别为100?G组、70?G组、30?G组,阳性对照30%SE组.大鼠喂养6周,每周称体重,最后腔静脉取血,检测血清中血脂水平;将大鼠内脏脂肪全部取出,计算Lee's指数和体脂比.结果表明:从第3周开始,100?G组、70?G组、30%SE组的大鼠体重明显低于对照组,而30?G组与对照组比较在大鼠体重上没有明显差异.各实验组大鼠的Lee's指数和体脂比均显著低于对照组.相比于对照组,100?G组、70?G组、30%SE组可显著降低血清中TC、TAG、LDL-C、Apo-B的水平,明显提高血清中HDLC的水平,30?G组与对照组比较,各指标均无显著差异.各实验组与对照组在血清中ALT、AST水平上无显著差异.实验结果表明,1,3-DAG在不损伤肝功能的情况下具有减肥和降血脂的功能.     

水酶法提取玉米胚芽油研究

在水酶法制取玉米胚芽的工艺中，纤维素酶和中温－α淀粉酶的复合作用能显著提高玉米胚芽油的收率。其最适参数为：料液比为１∶５；蒸汽预处理时间为２５分钟，酶的加酶量为０．８％（纤维素酶和淀粉酶的配比为５∶３），反应时间为６小时。     

稀土元素对谷氨酸发酵产酸及其谷氨酸脱氢酶的影响

以目前我国谷氨酸发酵广泛使用的谷氨酸棒杆菌S9114 为实验菌株 ,研究了稀土元素对谷氨酸发酵产酸及其谷氨酸脱氢酶的影响。结果表明LaCl3、CeCl3和NdCl3浓度分别为 0 72 0、0 0 71和 0 0 0 7mmol/L时 ,促使谷氨酸发酵产酸水平提高 6%～ 8% ,对菌体的GDH NADPH的酶活性有显著的激活作用。实验还表明 ,稀土元素对纯化GDH NADPH的活性也有一定的调节作用     

酒精蒸馏废液全循环工艺研究

研究了酒精蒸馏废液全循环对玉米粉液化、糖化和发酵的影响,结果表明,当液化酶用量达到14U/g、糖化酶用量为120U/g(玉米粉)时,蒸馏废液对液化无影响,而对糖化有促进作用;蒸馏废液能一定程度地促进酵母的生长,提高酵母耗糖速率;蒸馏废液经过25次循环发酵,酒精平均浓度在15.07%,平均糖利用率91.7%。蒸馏废液全循环工艺,解决了发酵法酒精生产中的污染问题,实现了发酵法酒精清洁生产。     

谷氨酸棒杆菌S9114中谷氨酸脱氢酶的初步研究

本研究以谷氨酸生产菌种S9114 为材料 ,对GDH的辅酶专一性、最适温度、最适pH和动力学参数进行了研究 ,结果发现谷氨酸生产菌S9114 细胞内含有两种GDH ,其GDH不仅能以NADPH为辅酶 ,而且能以NADH为辅酶 ,其Km值分别为 12 .4mmol/L和 1.5 8× 10 -3 mmol L ,Vmax分别为2 .4 8μmol min .ml和 5 .2 5 μmol min .ml,其最适反应温度为 4 2℃和 82℃ ,最适反应pH分别为 7.5和8.0 ,并对热比较稳定。经DEAE柱层析分析也表明谷氨酸生产菌S9114 细胞内同时存在两种GDH。     

基于CFD考察新型连续结晶罐的性能

运用计算流体力学(CFD)数值模拟的方法,研究了结晶罐不同功能区(混合区、结晶区)对谷氨酸结晶的影响.考察混合区和结晶区在不同搅拌转速、不同晶体粒径下,结晶罐内晶体颗粒悬浮均匀程度、溢流液与进料液量比例的变化情况.模拟结果表明:结晶罐内2个对搅拌强度不同要求的区间——混合区和结晶区在结晶过程发挥着不同的功能,混合区搅拌...     

木聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达及表达蛋白的纯化

热海栖热袍菌Thermotogamaritima是一个嗜极端高温的厌氧细菌,其产生的耐高温和热稳定性的木聚糖酶B具有很好的工业应用前景.利用PCR技术将嗜热产乙醇菌T.maritima编码高度热稳定性木聚糖酶的基因克隆至原核表达载体pET-20b,使之与组氨酸标签融合,并在大肠杆菌JM109(DE3)中得到了高效表达.最后采用金属Ni2+螯和层析柱对基因表达产物进行了纯化.     

酶法反应液中谷氨酰胺的提取工艺研究

根据谷氨酸和谷氨酰胺的电离常数的差异,针对谷氨酰胺酶法反应液的性质,采用单根强碱性阴离子Cl-型拄,从酶法反应液中提取谷氨酰胺。经预处理、脱色、离交分离、浓缩结晶,反应液中谷氨酰胺总提取收率为519%,纯度为968%,谷氨酸去除率964%。     

木薯酒精废水高温厌氧消化系统中酶的提取与分布的研究

木薯酒精废水中固形物(干基)的主要成分为纤维素和半纤维素,分别为30%和18%。由于内切-β-1,4-葡聚糖苷酶(CMC酶)和木聚糖酶在高温厌氧消化过程中对纤维素和半纤维素的水解起关键作用,作者比较了从厌氧污泥中提取CMC酶和木聚糖酶的6种方法,并分析了其在厌氧污泥中的分布情况。结果表明,用质量分数1% Triton X-100来提取CMC酶和木聚糖素酶是一种高效且温和的酶提取方法,且至少有占总酶质量90%的CMC酶和70%的木聚糖酶分布在污泥絮凝体(细胞表面或胞外聚合物)中。