降胆固醇乳酸菌的筛选及其降胆固醇活性研究

为了得到一株高效降胆固醇的乳酸菌并研究其降胆固醇的特性,本研究通过体外筛选得到一株降胆固醇能力为41.87%的乳酸乳球菌乳亚种Q,并用该乳酸菌发酵酸奶饲喂高脂模型大鼠,研究其对血清总胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)、血清高密度脂蛋白(HDL-C)、血清总胆酸(TBA)、肝脏总胆固醇(TC)、粪便总胆固醇(TC)、粪便总胆酸(TBA)以及体重和肝、肾、脾重量的影响.结果发现28d后,实验组大鼠血清中TC、TG、TBA和肝脏中TC含量明显下降(P＜0.05),粪便中TC和TBA含量也降低.各组间大鼠的HDL-C、体重、肝重/体重、肾重/体重、脾重/体重无显著差异.     

抗氧化活性乳酸菌的筛选

以获得高抗氧化活性乳酸菌菌株为目的,从泡菜汁、鹅肠、鸡嗉囊等材料中分离获得20株乳酸菌。以对DPPH自由基和O2－ ·的清除率为初筛指标,总抗氧化(T-AOC)能力和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力为复筛指标,筛选得到两株具有较高抗氧化活性的菌株L8和L17。利用糖发酵实验、生理生化实验和16S rDNA序列比对的方法对其进行鉴定,发现它们均为干酪乳杆菌。     

嗜酸乳杆菌细胞壁蛋白酶的提取优化

为了获得较高酶活力的嗜酸乳杆菌细胞壁蛋白酶(CEP),对嗜酸乳杆菌CEP的提取方法进行优化。经过比较超声波破碎法、Ca2+-free法、溶菌酶裂解3种方法,确认溶菌酶裂解法结合使用非离子清洁剂破壁是提取嗜酸乳杆菌CEP的最佳方法。在单因素试验的基础上,采用正交试验对嗜酸乳杆菌CEP的提取工艺进行优化,得出嗜酸乳杆菌CEP的最佳提取方法：用裂解液(50mmol/L Tris-HCl、100mmol/L NaCl、TritonX-100添加量1%、1.5mg/mL溶菌酶,pH 7.8)悬浮菌体(20mL/g),37℃保温3h,4℃、4500r/min离心20min,取上清液。溶菌酶裂解法提取CEP过程中各因素对CEP提取效果的影响依次为：溶菌酶质量浓度＞裂解pH值＞TirtonX-100添加量＞保温时间。     

鸭脂氧化及其挥发性香气成分气相色谱-质谱分析

以过氧化值、p-茴香胺值、酸值表示鸭脂的氧化状态,通过单因素试验和感官鉴定研究氧化温度和时间对 鸭脂氧化的影响,确定以制备鸭肉香精前体物为目标的鸭脂氧化条件为氧化温度120 ℃、时间4 h。在此条件下,鸭 脂的过氧化值为22.30 meq/kg,p-茴香胺值为7.04,酸值为0.93 mg KOH/g,具有强烈的脂肪香气以及轻微的油炸气 息。通过固相微萃取-气相色谱-质谱分析氧化前后鸭脂的挥发性香气成分,氧化后鸭脂共检测出32 种化合物,与氧化前相 比,种类及含量均有所增加,其中醛类物质11 种,含量为42.29%,其中己醛含量高达29.40%。另外还检测出烃类、呋喃、 醇类、羧酸类等多种呈香化合物,为后期以氧化鸭脂为原料进行Maillard反应制备鸭肉香精的技术开发提供参考。     

水苏糖-植物乳杆菌合生元对小鼠免疫功能的影响

以免疫力低下的小鼠为研究对象,研究水苏糖-植物乳杆菌合生元对小鼠的单核巨噬细胞吞噬功能,绵羊红细胞所致小鼠迟发型超敏反应(DTH),血清溶血素(HC),免疫器官指数(脾脏、胸腺),血清中IL-10、IL-12、IgG及TNF-α水平等免疫指标的影响。试验结果表明,合生元能显著提高小鼠单核巨噬细胞吞噬功能,增强迟发型超敏反应,显著增加脾脏和胸腺指数和血清中IL-10、TNF-α、IgG的含量,对血清中IL-12含量没有显著影响。水苏糖-植物乳杆菌合生元能显著改善免疫力低下小鼠的特异性细胞免疫、体液免疫和非特异性免疫功能,提高血清中部分免疫因子水平,增强免疫力低下小鼠的免疫功能。     

酸乳中抗高血压肽的分离及其特性研究

本研究通过四步反相高压液相色谱从Lactobacillushelveticus和Lactobacilluscaseisubsp.casei制作的酸乳中分离到对ACE活性具有较强抑制作用并具有较强降高血压效果的活性肽VPP和IPP。它们抑制ACE活性的IC50分别为8.89和5.17mol/L;给高血压老鼠灌胃试验结果显示,VPP在0.90、1.80、3.60mg/kg体重/天剂量下,其最大降血压值分别为12.3±3.7、17.9±4.2和25.3±4.3mmHg,呈极显著性差异(p<0.01),IPP在0.60、1.20、1.80mg/kg体重/天剂量下,其最大降血压值分别为16.8±3.4、25.5±4.6和29.1±3.5mmHg,呈极显著性差异(p<0.01)。     

不同来源乳酸菌的药敏试验

从不同来源的材料中分离并鉴定12株乳酸菌菌株,并进行10种常用抗生素药敏检测。结果表明:耐药率较高药物为阿米卡星(100%)、氟哌酸(83.33%),敏感率最高是氯霉素(100%),中介率最高为氟哌酸(16.67%)。不同来源的乳杆菌药敏性各不相同,其中新疆来源的菌株对阿米卡星和氟哌酸的耐药率为100%。不同菌种的药敏性也有差异:干酪乳杆菌的耐药性较广,为33.33%～91.67%。所有菌种均对氟哌酸和阿米卡星有耐药性,对氯霉素敏感。在不同来源和菌种这两种因素中,来源是影响菌株药敏性的更主要因素。乳酸乳球菌乳亚种LQ-12、瑞士乳杆菌15019、戊糖乳杆菌SC-1、布氏乳杆菌SC-2、干酪乳杆菌S1、发酵乳杆菌A1、发酵乳杆菌B3、发酵乳杆菌B5含有质粒,这几株乳杆菌可能含有可转移抗药性基因。本试验结果为所分离到的乳酸菌应用于生产实践及合理地使用抗生素提供了指导意义。     

产超氧化物歧化酶乳酸菌的筛选及发酵条件优化

从不同地区的传统发酵食品中筛选出104株菌落形态各异的乳酸菌,通过过氧化氢抗性试验筛选出20株具有抗氧化能力的乳酸菌,并测定其产SOD的能力。结果表明,20株乳酸菌中C8的SOD活性最高,达349.62 U/mg。通过革兰氏染色、过氧化氢酶试验和16S rRNA基因序列分析,构建系统发育树,根据同源性分析确定C8为乳酸乳球菌。为提高菌株产SOD的能力,通过单因素实验探究培养温度、初始接种量、初始pH值和灌装量对乳酸乳球菌产SOD的影响,并通过正交试验进一步优化菌株的发酵条件。最终确定最佳发酵条件为:发酵温度37℃,初始接种量3%,初始pH 7.5,灌装量75mL。在此培养条件下,乳酸乳球菌的SOD活性达93.95 U/mL,与优化前相比提高了2.2倍,为后期乳酸乳球菌在发酵产业的应用奠定基础。     

产丁二酮乳酸菌的筛选及其发酵条件的优化

从传统发酵食品中分离筛选出1株高产丁二酮的乳酸菌菌株,其丁二酮的产量为16.287 mg/L.经生理、生化特性和16S rDNA鉴定,为戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus),并对其生物学特性进行了研究.采用单因素及响应面试验,优化其产丁二酮条件为:在12％脱脂乳培养基中添加葡萄糖9％、柠檬酸铵0.5％、牛肉浸膏3％时,37℃培养24h,产丁二酮量为41.657 mg/L,比优化前的产量高150％.     

大孔树脂筛分马兰中活性组分及体外抗脂质过氧化测定

通过大孔树脂富集马兰粗提液中黄酮及三萜类化合物并对其进行体外抗脂质过氧化测定。比较了15种树脂的静态吸附和解吸附,以及吸附动力学、吸附等温线等性能,从中筛选出兼具富集黄酮类和三萜类化合物的最佳树脂AB-8。进而选择AB-8柱动态富集马兰中活性组分并对其进行活性组分的抗脂质过氧化测定。通过不同体积分数乙醇溶液洗脱显示：20%洗脱组分中黄酮类化合物含量最高,达到62.7%,同时含有19%的三萜类化合物,其总得率达到51.5%,60%洗脱组分中三萜类化合物含量最高,达到58.5%,总得率达到22.3%。同时,对所得主要组分进行抑制过氧化脂质活性实验,结果表明：两主要组分对体外组织(心、肝、肾、脑)的脂质过氧化均有一定的抑制效果,其中对肝脏的抑制效果最为明显。