胶体金免疫层析试纸条快速检测水和玉米中阿特拉津的残留

本文以胶体金作为抗体标记物,建立了一种检测阿特拉津残留的免疫层析试纸条快速检测方法.该方法的检出限为2ng/mL,10min内可以得到检测结果.本文以自来水和玉米作为样品进行了添加回收实验,水样不需要任何前处理直接检测,水样的检出限为2 ng/mL;玉米样品经简单前处理后检测,玉米样品的检出限为40 ng/g,且该方法的检测结果与间接竞争ELISA方法的结果一致.该方法具有成本低、操作简单、灵敏度高、检测快速,结果易于判定等优点,适用于大量样品的现场筛选.     

基于Al3+与ATP协同增敏荧光法快速检测牛奶中氧氟沙星

目的 利用铝离子(aluminum ions, Al3+)与三磷酸腺苷(adenosine triphosphate, ATP)对氧氟沙星(ofloxacin, OFL)荧光的协同增强特性, 建立一种灵敏、快速、准确对牛奶中OFL进行定量检测的方法。方法 通过Al3+与ATP协同增强OFL荧光强度对OFL进行定量检测, 对荧光激发波长、pH、反应温度、反应时间等条件进行优化, 并在实际样品中牛奶中进行加标回收实验。结果 Al3+与ATP可协同增强OFL溶液荧光强度, 并使荧光发射峰红移以实现对OFL氧氟沙星选择性检测。在pH 7.0、5 min和25℃最优的条件下 , 在0.01~100 μmol/L范围内, OFL荧光强度与其浓度呈现良好的线性关系, 其相关系数r2为0.9973, 检出限为4.48 nmol/L 。加标回收率为98.59%~102.48%, 相对标准偏差小于5%。结论 本方法具有操作简便、检测灵敏、快速等优点, 并成功地用于测定牛奶中的OFL, 具有良好的回收率, 为食品牛奶中 氧氟沙星OFL的灵敏快速检测提供了一种可行的方法。     

苯脲类除草剂残留检测方法研究进展

对苯脲类除草剂在环境水、土壤和食品中的残留检测方法进行综述,概述气相色谱、高效液相色谱、传感器、毛细管电泳、薄层色谱,以及免疫学等检测方法的应用,并对各自的优缺点进行总结,最后对各种检测方法特别是免疫检测方法进行展望.     

量子点标记免疫亲和凝胶柱快速检测动物组织中恩诺沙星

目的:建立一种检测动物组织中残留的兽药恩诺沙星(ENR)的量子点标记免疫亲和凝胶柱快速检测新方法。方法:将恩诺沙星特异性抗体偶联到溴化氢活化的琼脂糖凝胶上,制备抗体胶,将抗体胶装入标准的1mL SPE固相萃取柱制成恩诺沙星免疫亲和凝胶检测柱。采用混合酸酐法制备恩诺沙星包被抗原(ENR-OVA),采用活化酯法将ENR-OVA偶联到水溶性量子点(QDs)上制备荧光信号探针QDs-OVA-ENR。将待测样品和荧光信号探针QDs-OVA-ENR分别加入检测柱中,基于抗原抗体的竞争结合反应,样品中的恩诺沙星和荧光信号探针QDs-OVA-ENR竞争结合检测柱中抗体。通过目测检测柱体的荧光强弱,定性半定量检测恩诺沙星的含量。结果:该量子点标记恩诺沙星免疫亲和凝胶检测柱的检测限(LOD)为2μg/L,对食源性动物组织样品的检测限为20μg/kg。检测过程不超过5 min。结论:该方法操作简便,灵敏度高,检测时间短,结果易于判断,可满足食源性动物组织中恩诺沙星残留的现场快速检测要求。     

呋喃它酮代谢物可视化凝胶柱快速免疫检测方法研究

本研究建立了兽药呋喃它酮代谢物(Furaltadone metabolites,AMOZ)的免疫亲和凝胶柱检测新方法,并用于动物源性食品中呋喃它酮代谢物残留的可视化快速检测。整个检测在一个标准的1 mL固相萃取(SPE)柱中进行,柱中包含两层:一个结合了呋喃它酮代谢物特异性抗体的凝胶检测层和一个结合了辣根过氧化物酶(HRP)抗体的凝胶质控层。将样品提取液与酶标抗原预混合后加入到检测柱中,基于抗原抗体的竞争结合反应和辣根过氧化物酶的酶促反应,根据检测柱的检测层颜色的深浅和有无来定性,半定量检测呋喃它酮代谢物的含量。整个检测过程可以在10 min内完成,该凝胶检测柱的检测限为20μg/L;牛肉、鲷鱼、鸡肉、虾肉、猪肉、鱿鱼、鸡肝和黄花鱼等动物源性食品中呋喃它酮代谢物的检测限为3μg/kg。该方法准确度高、特异性好、检测步骤简单,适用于大量样品中呋喃它酮代谢物残留的快速检测。     

基于寡核苷酸链信号放大快速检测谷物中赭曲霉毒素A

该研究以柠檬酸钠还原法制备粒径均一的金纳米粒子（gold nanoparticles,AuNPs）,并将AuNPs与赭曲霉毒素A（ochratoxin A,OTA）抗体通过静电吸附作用偶联,再与6-羧基荧光素（6-carboxyfluorescein,6-FAM）修饰的寡核苷酸链（single stranded DNA,ssDNA）通过金硫键偶联,制备出荧光探针,利用AuNPs近距离淬灭荧光基团信号作用和1,4-二巯基苏糖醇（dithiothreitol,DTT）解离寡核苷酸链作用,建立基于寡核苷酸链信号放大快速检测谷物中OTA的方法。经过优化试验条件,该方法的检测限为0.004 4 μg/L,特异性良好。使用该方法测定玉米、大米、燕麦3种谷物中的OTA含量,添加回收率为91.2%～102.3%,变异系数小于10%,检测结果与超高效液相色谱串联质谱检测结果接近,证明该方法能够用于检测谷物样品中OTA的含量。     

除草剂扑草净胶体金免疫层析检测试纸条的研制

制备了扑草净胶体金免疫层析检测试纸条,建立了水样中扑草净的快速检测方法.采用柠檬酸三钠还原氯金酸法制备胶体金,对胶体金免疫层析方法的工作条件(NC膜的封闭条件、金标垫的处理方法)进行优化.最终建立的方法检出限为5 ng/mL,5min内可以通过目测进行结果判断.河水样品不需要任何处理可以直接进行检测,检出限为5 ng/mL.本研究建立的快速免疫检测方法适用于水中扑草净残留的现场检测.     

中药中速灭威残留量的酶联免疫检测方法

建立了直接竞争酶联免疫法（ELISA）测定金银花、枸杞、人参、板蓝根、大青叶和圆弧止痛片为代表的中药中速灭威的残留量．金银花等经过粉碎,加入甲醇提取、旋蒸、PBS复溶等简单前处理之后,再经过适度的稀释可以达到消除基质影响,用ELISA进行测定．中药样品添加回收率为64．00％-91．30％,变异系数均小于30．12％．结果表明,该方法可以简单、快速、灵敏、准确地检测出金银花、枸杞、人参、板蓝根、大青叶和圆弧止痛片等中药中速灭威的残留量．     

间接竞争ELISA检测食品中的邻苯二甲酸二丁酯

以4-氨基邻苯二甲酸为原料,通过酯化反应合成半抗原4-氨基邻苯二甲酸二丁酯,将合成的半抗原通过重氮化反应与钥孔血蓝蛋白(KLH)进行偶联制备免疫抗原,与牛血清白蛋白(BSA)进行偶联制备包被抗原。通过免疫新西兰大白兔获得邻苯二甲酸二丁酯抗血清,利用纯化获得的抗体和包被抗原建立邻苯二甲酸二丁酯间接竞争酶联免疫检测方法(ELISA)。该方法的IC50为40.68μg/L,最低检测限IC_(15)为1.98μg/L,方法对邻苯二甲酸二丁酯具有较好的特异性。经对白酒、牛奶、食用油样品进行检测,添加回收率为84.57%～102.40%,用气相色谱—质谱法(GC-MS)进行验证,两种方法均呈现良好的线性相关性(R~2=0.990 8)。研究建立的方法可以被应用于食品中塑化剂邻苯二甲酸二丁酯的快速检测。     

荧光微球免疫层析方法定量检测水产品中4 种硝基呋喃代谢物

采用荧光微球标记抗体作为信号探针,建立荧光微球免疫层析检测方法（fluorescent microsphere immunochromatographic assays,FMICA）,并应用于水产品中4 种硝基呋喃类兽药代谢物残留量的快速定量检测。结果表明：呋喃妥因、呋喃它酮、呋喃唑酮、呋喃西林代谢物FMICA试纸条的检出限分别为0.004（以1-氨基-乙内酰脲衍生物计算）、0.01（以5-吗啉-3-氨基-2-恶唑烷酮衍生物计算）、0.008（以3-氨基-2-恶唑烷酮衍生物计算）、0.009（以氨基脲衍生物计算）μg/L;检测线性范围分别为0.005～5、0.01～10、0.01～10、0.01～10 μg/L;最佳检测时间为10 min,方法特异性良好。水产样品经衍生化处理后,经检测硝基呋喃代谢物的加标回收率在75.88%～104.81%之间,变异系数均小于15%。FMICA方法操作简单、快速、成本低,适用于水产品中硝基呋喃类兽药代谢物快速定量检测。