柚苷酶产生真菌的复筛及菌种初步鉴定

对前期分离获得的柚苷酶产生真菌进行复筛,从56株柚苷酶产生真菌中复筛出了8株脱苦能力较强的真菌,其中,实验室编号为4-4-1的菌株对柚皮苷的分解率为99%.对菌株4-4-1进行形态鉴定,结果表明,该真菌培养基中菌丝呈棉絮状,分生孢子梗单生,粗短,为轮辐状排列的瓶形小梗,分生孢子微弯、镰刀形,参照真菌鉴定手册第610页的描述鉴定为小型茄腐皮镰孢霉.     

琯溪蜜柚果皮提取物抑制亚硝化反应的研究

本实验以乙醇、丙酮和水作为提取剂,对柚皮中的活性物质进行提取,通过正交试验确定出最佳提取条件;在模拟人体胃液环境条件下,采用比色法和紫外光解法分别测定了柚皮提取液对亚硝酸根的清除作用和对亚硝胺合成的阻断作用。结果表明,以乙醇为提取剂的最佳提取条件为:90%乙醇、60℃水浴冷凝回流,提取时间1h;提取液对亚硝胺、亚硝酸钠的最大阻断率和清除率分别为95.5%和91.8%。同时比较了柚皮提取物阻断亚硝胺合成及消除亚硝酸钠的效果。     

枯草芽孢杆菌JMUKC2 产肌苷摇瓶发酵培养基的优化

利用单因素试验和正交试验对肌苷生产菌枯草芽孢杆菌JMUKC2的摇瓶发酵培养基进行优化,优化后的最佳发酵培养基配方为葡萄糖140g/L、玉米浆20g/L、酵母膏17g/L、尿素7g/L、硫酸铵20g/L、MgSO4 ·7H2O 1g/L、KH2PO4 7g/L、CaCO3 20g/L。培养基经优化后,生物量比优化前提高了40.67%,肌苷产量比优化前提高了46.57%。     

单宁酶对绿茶水浸出物中儿茶素及抗氧化活性的影响

采用高效液相色谱法(HPLC)分析绿茶水浸出物及单宁酶水解物中儿茶素成分的变化,通过DPPH、ABTS自由基和·OH清除率试验测定抗氧化活性,以透光率为指标评价澄清度,探讨单宁酶对绿茶儿茶素的转化作用及对其抗氧化活性和澄清度的影响。试验结果表明,在绿茶水浸出物中添加单宁酶,可有效分解其酯型儿茶素(EGCG,GCG,ECG),从而增加非酯型儿茶素(EGC,GC,EC)和没食子酸(GA)的含量。经单宁酶处理后,绿茶水浸出物对DPPH、ABTS自由基和·OH的清除能力均有所增强,其IC50分别降低了23.8%,17.5%和59.2%。此外,经单宁酶酶解处理后的茶水浸出物的储存稳定性和澄清度显著提高。单宁酶可高效水解绿茶水浸出物中酯型儿茶素,从而提高绿茶的抗氧化活性以及茶汤的澄清度和稳定性。     

辛烯基琥珀酸酯化琼脂对海藻酸钠微胶囊包埋效果的改善作用

将辛烯基琥珀酸酯化琼脂(OSAR)与海藻酸钠(Alg)混合,作为复合壁材用于制备大豆油微胶囊.考察了改性琼脂占比、芯材添加量、乳化温度、氯化钙浓度等因素对微胶囊载油率的影响,并研究复合壁材对大豆油微胶囊包埋产率、乳液与微球性质和形态、体外消化释放率及氧化稳定性的影响.结果表明:复合壁材载油率随改性琼脂占比(OSAR:A...     

黑曲霉DB056发酵α-鼠李糖苷酶和柚苷酶培养基的优化研究

目的:优化黑曲霉DB056产α-鼠李糖苷酶和柚苷酶的培养基,提高这两种醇的产量.方法:以α-鼠李糖苷酶活力和柚苷酶活力为指标,研究碳源、氯源和乳化剂Triton X-100对α-鼠李糖苷酶活力和柚苷酶活力的影响,优化黑曲霉DB056摇瓶发酵α-鼠李糖苷酶和柚苷酶的培养基.结果:碳氮源的种类与浓度,乳化剂Triton X-100的浓度对黑曲霉DB056产α-鼠李糖苷酶和柚苷酶有重要影响;黑曲霉DB056产酶的优化培养基是:柚皮苷3.5 g/L,玉米浆4g/L,MgSO4·7H2O 1.0g/L,KH2PO41.0g/L,KCl 0.5 g/L,无水CaCl20.1 g/L,乳化剂Triton X-1001.0%.此时α-鼠李糖苷酶活力和柚苷酶活力分别为994U/mL和276U/mL,分别比发酵初始培养基提高了42.3%和147.8%.结论:通过培养基优化,大幅度提高了黑曲霉DB056液态深层发酵α-鼠李糖苷酶活力和柚苷酶活力.     

黑曲霉DB056分泌的柚苷酶分离纯化及酶学性质研究

对黑曲霉DB056发酵产生的柚苷酶进行分离纯化并研究其基本特性。粗酶液经硫酸铵沉淀、离子交换层析和凝胶过滤层析分离,所得柚苷酶的比活力为1716.41U/mg蛋白,纯化倍数为17.52倍。柚苷酶具有4个相对分子质量的组分,较适pH值范围4.0～5.0,最稳定的pH4.5;该酶适宜的作用温度范围45～55℃,温度50℃时酶活力最大,45℃和50℃条件下可以分别稳定4h和2h,55℃时柚苷酶1h失活50%;Ag+、Hg2+对柚苷酶具有强烈的抑制作用,其它金属离子对柚苷酶的影响随离子浓度的不同而不同,如0.1mmol/LCa2+、K+、Al3+、Mn2+、Cu2+可提高柚苷酶的活力,而5.0mmol/LFe2+、Al3+对柚苷酶显示抑制作用。     

聚乙烯醇和海藻酸钠固定化柚苷酶的制备及其性质

以聚乙烯醇、海藻酸钠为载体,固定化柚苷酶;以戊二醛为交联剂,考察固定化工艺条件对酶活的影响,研究固定化酶的部分酶学性质。用高效液相色谱法分析柚苷酶的α-L-鼠李糖苷酶和柚苷酶活力,结果表明:最佳载体组合为11%聚乙烯醇与0.5%海藻酸钠;当缓冲液p H 4、戊二醛含量1%、交联时间0.5 h、吸附时间3 h、加酶量141 U/m L、硼酸4%、Ca Cl21%时,固定化酶活力达到最大值。柚苷酶固定化后,α-L-鼠李糖苷酶和柚苷酶活力的最适温度提高5℃,最佳活性p H值提高1.0,p H稳定性基本不变,温度稳定性下降5℃。α-L-鼠李糖苷酶、柚苷酶的米氏常数(Km)固定化后都增大;α-L-鼠李糖苷酶的最大反应初速度(Vmax)经固定化后减小,柚苷酶的Vmax增大。将固定化柚苷酶重复使用7次后,它的α-L-鼠李糖苷酶和柚苷酶残余活力分别保持71%与80%。     

细胞生长、葡萄糖代谢及副产物重新利用对法夫酵母虾青素合成的影响分析

以两株产虾青素法夫酵母菌株为研究对象,分别在不同摇床转速、初始葡萄糖浓度、乙醇的存在与否等培养条件下,考察葡萄糖浓度、添加乙醇及溶氧状况对法夫酵母细胞生长、代谢副产物产生的影响及其与虾青素合成之间的关系,进一步阐明法夫酵母虾青素合成的机理。实验结果表明:法夫酵母JMU-VDL668菌株的生长速率、葡萄糖代谢速率和乙醇积累量均高于法夫酵母JMU-MVP14菌株,但前者的虾青素合成速率却远低于后者;当发酵液中的葡萄糖含量降低时,酵母细胞对糖代谢副产物进行二次利用,导致有利于虾青素合成的情况出现,虾青素产量得到进一步提高;在初始培养基中添加1 g?L?1乙醇能够在一定程度上促进虾青素的合成。     

单宁酶固体酶制剂制备及贮藏性能研究

首先建立了单宁酶固体酶制剂的制备工艺流程,利用缓冲液对单宁酶固态发酵后的培养基进行浸提,得到的粗酶液经过滤、脱色、除菌、超滤浓缩和喷雾干燥后,即可得到单宁酶固体酶制剂。然后对制备得到的单宁酶固体酶制剂的贮藏稳定性进行考察,发现温度、空气和湿度对单宁酶固体酶制剂的贮藏稳定性影响较大,而光照对其影响不明显,紫外线照射50min酶活损失也很小。单宁酶固体酶制剂在贮藏过程中表现出良好的稳定性,其中在-20℃、真空、避光条件下保存单宁酶固体酶制剂90d后,酶活保留率可达98.9%。