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利用高效液相色谱—蒸发光检测法(HPLC-ELSD)建立基于指纹图谱分析的低聚半乳糖成分比较与组分含量推算方法。采用该方法对11个匿名食品级低聚半乳糖产品进行含量分析与比较。研究结果表明,现阶段食品级低聚半乳糖产品组成接近,非有效组分主要由葡萄糖、半乳糖和乳糖构成;有效组分色谱峰个数1~2个,质量浓度范围为73.65~100.00g/100g,主要由聚合度大于3的低聚半乳糖混合构成,部分产品中有效组分仅为异乳糖。通过该方法的建立与应用,可实现对低聚半乳糖产品质量差异的有效评价。 相似文献
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将嗜热脂肪芽孢杆菌来源的耐热β-半乳糖酶基因bgaB分别插入穿梭质粒pKLAC1、pPIC9k的α-因子信号肽下游,构建bgaB基因的乳酸克鲁维酵母真核表达载体pKLAC1-bgaB及毕赤酵母真核表达载体pPIC9k-bgaB。载体经酶切线性化后采用电击方法分别转化到乳酸克鲁维酵母K.lactis GG799及毕赤酵母GS115中,并通过同源区各自整合到宿主基因组中。重组酶进行镍柱纯化、Western Blot杂交鉴定及酶学性质分析。结果表明,耐热β-半乳糖苷酶在酵母表达系统中可以实现外源表达且热稳定性保持良好,但不能被酵母系统有效分泌。 相似文献
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该研究以GH42家族嗜热脂肪芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)来源耐热β-半乳糖苷酶BgaB为研究对象,针对其转糖苷活性弱的问题,采用定点突变与化学修饰相结合的方法,对其预测亲核催化位点Glu303进行了功能研究与分子改造。所得突变体Ox-E303C与野生型酶相比,可将低聚半乳糖合成量由0%提高到11. 5%。研究结果表明对耐热β-半乳糖苷酶BgaB亲核催化位点进行半胱氨酸亚磺酸(—SOO-)替换,能够提高其转糖苷催化活性。该研究对GH42家族β-半乳糖苷酶转糖苷催化功能的分子改造具有广泛的参考价值。 相似文献
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针对嗜热脂肪芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)来源耐热β-半乳糖苷酶Bga B底物结合位点构建突变体,研究底物结合位点累积突变的功能进化及水解活性的变化规律。实验结果表明:Y272A与E351R的累积突变体比酶活为野生型酶的3.67倍,为单点突变体Y272A的2倍;Y272A/E351R突变体的Km值增大,其对乳糖的亲和力下降,但由于Kcat值增大,使累积突变体Y272A/E351R催化效率提高为野生型酶催化效率的7.8倍。本研究结果表明底物结合位点间的累积突变可改变底物亲和性,并对水解催化活性进化起到正向促进作用。 相似文献
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以养心草为研究对象,利用其富含钙的营养特性,采用过量有机酸对钙的结合与稳定作用,以及添加低聚半乳糖作为营养强化剂,研制开发了一款易被人体吸收的植物源钙饮料。经优化得到最佳工艺条件为:将干制养心草与水以料液比1∶40(g∶mL)的比例混合,在90℃条件下浸提45 min后,添加4.60 mg/mL过量乳酸、6.45 mg/mL低聚半乳糖以及150 mg/mL蔗糖。所得优化产品中的乳酸钙结合率达92%,钙的质量浓度高达701.48 mg/L,显著高于复原乳中钙含量。该研究结果表明养心草是优良的植物钙来源,可用于功能食品开发。 相似文献
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滁州地区薄荷种植历史悠久,面积广泛,具有薄荷蜂蜜开发的资源优势。通过对理化成分的测定分析及对比研究,初步探讨了滁州薄荷蜂蜜的品质特性。研究表明滁州薄荷蜂蜜不仅主要理化成分达到行业一级标准,而且具有高成熟度、高果糖含量(48. 42 g/100 g)和低葡萄糖含量(27. 89 g/100 g)的食用特性。与常见蜂蜜品种相比,滁州薄荷蜂蜜颜色极深,并呈现出总酚酸含量高、抗氧化性强及风味独特的品质优势。其总酚酸含量为120. 83 mg/100 g,是对照组洋槐蜂蜜的6. 53倍,相同质量浓度的自由基清除率为对照品洋槐蜂蜜的1. 65倍。研究中还发现,与蜂蜜通常具有的成熟度高则其酸度低的规律不同,滁州薄荷蜂蜜同时具有高酸度和高成熟度的特性。作为特色品种蜂蜜,滁州薄荷蜂蜜不仅具有市场开发潜能,其高酸度的形成机理及食用功能性也有待深入探讨。 相似文献
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建立了一种测定制麦中阿魏酸含量的高效液相色谱法。选用色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-冰醋酸体系(60∶40,pH3.0),流速1.0ml/min,柱温35℃,紫外检测器波长320nm,进样量为20μl,对制麦中阿魏酸含量进行测定分析。结果表明:该方法条件下阿魏酸浓度在0.25~200μg/g时,线性关系良好(R2=0.999 9)。制麦过程中阿魏酸含量显著升高(P0.05),麦芽阶段含量最高。所建方法分析速度快、操作简便、结果的精密度与重现性好,可作为制麦中阿魏酸含量的测定方法。 相似文献