酸枣叶黄酮的提取工艺优化 及其抗秀丽隐杆线虫氧化损伤活性

运用响应面法优化酸枣叶黄酮的超声辅助提取工艺,并探究其抗氧化活性。在单因素基础上,筛选出液料比、乙醇浓度、超声功率和超声时间并设计响应面实验。结果表明最优工艺条件为,液料比30.25:1 mL/g、乙醇浓度79.00%、超声功率301.00 W、超声时间32.00 min,酸枣叶黄酮实际提取率4.21%,与预测值4.51%相比,相对误差为6.65%,证明模型理论预测值与实际值拟合效果良好。制得的酸枣叶黄酮对DPPH自由基、ABTS自由基、羟自由基的半数清除浓度(IC₅₀)分别为111.51、23.06和253.73 μg/mL,具有较强的还原力。酸枣叶黄酮能有效增强秀丽隐杆线虫对热应激、H₂O₂氧化应激的抗性,抑制氧化损伤导致的线虫体内GSH-Px、SOD酶活力的降低,抑制MDA含量的增加,具有良好的抗氧化损伤作用。     

高效液相色谱法测定玉米须中芹菜素的含量

目的:建立玉米须中芹菜素的含量测定方法。方法:运用高效液相色谱法测定,色谱柱为HypersilC18（4.6mm×250mm,5μm）,流动相为甲醇-0.1%磷酸（55∶45）,流速0.8mL.min-1;检测波长254nm。结果:芹菜素在2.1～21μg/mL线性关系良好,r为0.9996。平均回收率为97.52%,RSD为1.80%。结论:本方法方便、准确,可以用于玉米须药材的质量控制。      

桔梗多糖提取、分离纯化以及生物活性研究

目的：优化复合酶法提取桔梗多糖工艺,并初步分析桔梗多糖的结构和体外抗氧化活性。方法：分别考察酶添加量、料液比、酶解时间、酶解温度对桔梗多糖提取率的影响,采用响应面法进行提取条件优化,利用高效液相色谱法（HPLC）测定多糖的分子量和单糖组成,应用核磁共振（NMR）和扫描电镜（SEM）对多糖的糖苷键和形貌进行分析,并对多糖清除自由基的能力和还原力进行研究。结果：桔梗多糖的最佳提取工艺为纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶的添加量为2%,酶解时间90 min,料液比1:30 g/mL,酶解温度50 ℃,在此条件下,多糖实际提取率为9.01%±0.07%,多糖含量达92%±0.76%。纯化后得到桔梗多糖组分PGP-W-1,分子量为6.2 kDa,由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖按照摩尔比4.9:4.3:7.9:7.8:4.8:18.6组成,是一种具有α型糖苷键和β型糖苷键的吡喃型多糖。体外抗氧化试验显示PGP-W-1对DPPH自由基、ABTS⁺自由基和羟基自由基清除率IC₅₀值分别为2.14、2.25、0.78 mg/mL。结论：本研究优选出的桔梗多糖提取工艺切实可行,多糖提取效率高并表现出良好的体外抗氧化活性。     

姬松茸多糖诱导巨噬细胞释放NO的机制

以小鼠巨噬细胞RAW264.7为研究对象,研究姬松茸多糖对其NO释放和iNOS表达的作用,并通过检测IκBα蛋白磷酸化水平的变化来探究姬松茸多糖诱导巨噬细胞释放NO的分子机制。结果表明,姬松茸多糖可剂量依赖性增强RAW264.7细胞NO的释放与iNOS蛋白的表达,且两者趋势一致。此外,25μg/mL姬松茸多糖能够增强RAW264.7细胞中p-IκBα蛋白的表达量,且在45min时达到最高,证明其能够激活NF-κB信号转导通路。综上,姬松茸多糖通过NF-κB途径上调巨噬细胞iNOS的表达,进而促进NO释放。     

生物电子舌及其在味觉测定中的应用

味觉评估涉及酸、甜、苦、鲜、咸5种基本味觉,是哺乳动物感受外界环境的基础。味觉感受系统能够快速、灵敏、特异性地从复杂混合物中获得味觉信息,被认为是自然界性能最好的“化学检测器”之一。生物味觉与生俱来的优势为仿生味觉传感技术的发展提供了灵感,基于味觉系统的生物电子舌已被广泛用于食品安全、药物开发和疾病诊断等领域。本文结合近年来的研究成果,针对味觉传导机制以及生物电子舌的研发情况进行综述,总结基于味觉系统的生物电子舌在味觉测定中的应用,展望其未来发展和应用前景。     

HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中酸枣仁皂苷A含量及其药动学研究

建立高效液相色谱-质谱串联(HPLC-MS/MS)法检测大鼠血浆中酸枣仁皂苷A的含量,并应用于药动学研究。大鼠静注(4 mg/kg)或灌胃(20 mg/kg)给药,不同时间取血,血浆样品经处理后,采用HPLC-MS/MS法测定酸枣仁皂苷A含量,色谱柱为Waters YMCTM ODS-AQ S-5 120A(2.0×100 mm)分析柱,以电喷雾离子化串联质谱(ESI)及多反应监测扫描模式(MRM)进行检测,流动相为甲醇-水(0.1%甲酸)=50∶50,流速为0.3 m L/min,柱温为30℃,根据测定结果求算药物的药动学参数。酸枣仁皂苷A在40 ng/m L~4 000 ng/m L的浓度范围内线性关系良好(r2=0.999 1),各浓度水平的精密度及稳定性的RSD均小于15%,提取回收率均大于85%。大鼠注射给药后主要药动学参数分别为Ke0.28/h,t1/22.55 h,AUC0→t2 839.89 h·ng/m L,AUC0→∞3 201.51 h·ng/m L,灌胃给药后主要药动学参数分别为Ke0.51/h,t1/21.35 h,AUC0→t206.02 h·ng/m L,AUC0→∞211.13 h·ng/m L。经计算,酸枣仁皂苷A在大鼠体内的生物利用度为1.32%。本试验所建立的检测方法快速简便、精密度好、灵敏度高及稳定性好,适用于酸枣仁皂苷A在大鼠体内血药浓度测定及药代动力学的研究。     

微波法提取姬松茸多糖的工艺研究

采用微波法对姬松茸多糖进行提取工艺研究.以子实体粒度(目数)、料液比、微波功率、提取时间为考察因素,多糖得率为指标,采用正交实验法对多糖提取工艺进行优化.确定了微波提取的最佳工艺参数为:粒度(目数)为60目,料液比为1∶80(g/mL),微波功率为640W,提取时间为8min.按此优化条件,多糖得率可达9.04％,可显著提高姬松茸多糖的得率,工艺简单,成本较低.     

响应面法优化超声辅助提取酸枣仁中阿魏酰斯皮诺素

研究旨在优化酸枣仁中阿魏酰斯皮诺素的超声提取工艺。在单因素试验基础上,选取时间、功率、溶剂体积分数和料液比为自变量,以阿魏酰斯皮诺素提取率作为响应值,设计四因素三水平Box-Behnken响应面试验,优化提取工艺。结果表明,各因素对阿魏酰斯皮诺素提取率的影响大小顺序为:溶剂体积分数时间料液比功率,其中时间和料液比的交互作用对提取率影响较显著。最佳提取条件:功率415 W,料液比1︰15.75 (g/mL),时间61.50 min,溶剂体积分数71.5%,提取率为0.445%,与预测值0.447%接近,证明响应面模型与实际情况拟合良好,能较好地预测阿魏酰斯皮诺素提取率。因此试验建立一种高效提取酸枣仁中阿魏酰斯皮诺素的方法。     

食用酸枣仁多糖的小鼠肠道菌群培养上清液对Caco-2细胞吸收相关蛋白表达的影响

为了探究食用酸枣仁多糖(ZSSP)的小鼠肠道菌群培养上清液是否会调节Caco-2细胞中外排转运蛋白、紧密连接蛋白和Ⅱ相代谢酶的表达水平。将20只C57BL/6小鼠随机分为对照组和ZSSP组,分别灌胃超纯水和酸枣仁多糖水溶液(100 mg/kg·d^-1)14 d,收集小鼠粪便制备肠道菌群培养上清液。采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测肠道菌群培养上清液对Caco-2细胞活力的影响,采用免疫印迹(western blot,WB)法检测Caco-2细胞中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)、咬合蛋白(Occludin)和闭合蛋白1(Claudin-1)的表达水平,用酶联免疫检测(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒测定磺酸基转移酶(sulfotransferase,SULT)和尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶(UDP-glucuronosyltransferase,UGT)的含量。结果表明,ZSSP组的肠道菌群培养上清液能显著降低Caco-2细胞中外排转运蛋白(P-gp和MRP2)的表达水平(P<0.05),显著升高UGT的表达水平(P<0.05),但对紧密连接蛋白(Occludin和Claudin-1)和SULT没有显著影响(P>0.05)。由此可知,食用酸枣仁多糖的小鼠肠道菌群培养上清液能调节Caco-2细胞中的外排转运蛋白和Ⅱ相代谢酶的表达水平。     

五味调与营养平衡及其信号传导

“五味调”是中国餐和烹饪的基本理论和原则。一直以来,很多人认为中国餐虽然讲究色、香、味,但是不讲究营养,而有关味觉和嗅觉受体与相应的配体相互作用研究表明,味觉和嗅觉所传感的正是机体所需要的营养成分,并构成营养体内平衡的分子结构识别机制和生理调节与代谢基础,五味调和在机体生命活动和营养体内平衡中具有重要作用。味觉和嗅觉受体以G蛋白偶联受体超家族为主体,构成机体对营养物质的结构与功能、定量与定性的传感系统。该传感系统不仅分布在舌和鼻咽部的味蕾处,而且遍布整个消化道系统,以及神经信号传导系统,在外周系统和大脑之间构建起通讯联系和“编码系统”。大量研究表明,在漫长的进化中,人和动物已经形成了一个从看到食物开始,一直到食入、咀嚼、消化、吸收、排泄等各个关键环节的时序控制及其复杂的信号级联激活和传递系统。机体通过味觉和嗅觉系统从饮食的形态、质构到分子结构与功能等进行严格的识别和筛选,系统地控制各种营养成分的消化和吸收,并同时以严格的时序性信号传递与级联,从神经信号的快速传递到神经和体液混合传递,再到体液传递相互配合,构成食品营养与安全的交响乐式的信号传递与控制过程,决定了机体的营养吸收、防御、体内平衡、生理活动、代谢与健康。本文在综述这些进展的基础上提出：五味调和是健康饮食的基础,通过味觉和嗅觉受体及其与配体的相互作用的研究,不仅可以为嗅觉和味觉测定开辟新的方法和途径,而且为调味品的研究和健康饮食,控制现代文明病的发生和发展提供科学依据。