灰树花菌丝体抗肿瘤糖肽GFPS1b结构的研究

以体外抑制肿瘤细胞增殖的活性作为筛选导向，从灰树花深层发酵培养菌丝体中提取、分离纯化得到一酸性糖酞GFPS1b．HPGPC法测得其重均相对分子质量为21000．蛋白质质量分数16．60％，糖质量分数为81．32％。利用化学方法（单糖组成分析、部分酸水解、甲基化分析）和仪器方法（GC、GC—MS、红外吸收光谱、核磁共振）分析GFPS1b的糖链结构，结果表明其单糖组成主要有G1c、Ga1、Ara和少量的糖醛酸，其糖链主链由两个α-D—G1c（1→3）、α-D—Ga1（1→4）、α-D—G1c（1→3，6）和α-D—Ga1（1→6）组成的，其中葡萄糖基的6位发生取代，取代侧链主要为α-L—Ara-（1—4）-α-D—Glc（1→。可以认为GFPS1b为一新糖肽。     

Bacillus pumilus WL-11蛋白酶对其木聚糖酶合成的影响

研究了不同的营养条件下短小芽孢杆菌WL-11产蛋白酶和木聚糖酶的情况。结果表明,碳源对WL-11木聚糖酶的合成具有诱导或抑制作用,对其蛋白酶的合成影响并不显著;氮源对WL-11木聚糖酶的合成不具有直接的调节作用,而可能通过调节其蛋白酶的合成量来间接影响其木聚糖酶的合成,且两者的合成量之间存在一定的正相关。     

固态发酵食醋有机酸组成分析中样品预处理方法的研究

比较了4种大分子杂质沉淀方法和4种小分子杂质去除方法对食醋有机酸HPLC分析结果的影响 结果表明,亚铁氰化钾-硫酸锌法可有效地沉淀食醋样品中的生物大分子物质,Sep-Pak C18固相萃取小柱可有效的去除样品中色素等小分子杂质 该方法简单、操作方便,成功地排除了食醋中蛋白、色素等复杂成分对有机酸HPLC分析的干扰.     

产细菌纤维素菌株中间葡糖醋杆菌的分离与发酵条件优化

从中国传统固态发酵食醋醋醅中分离出5株产细菌纤维素(BC)的菌株,经生理生化特征及16S rDNA序列分析,它们均属于中间葡糖醋杆菌(Gluconacetobacter intermedius),其中编号为1-17的菌株初始产量较高。应用扫描电镜技术(SEM)和傅里叶红外光谱技术(FT-IR)分析了BC结构特征。采用单因素研究了温度、培养时间、碳源、初始pH对BC合成的影响。确定菌株1-17最适温度为35℃,发酵时间为7d,甘油和葡萄糖为最适碳源,最适初始pH为6.0,乳酸根离子和钙离子能够促进BC的合成。通过培养条件优化使得细菌纤维素产量从初始的(3.90±0.08)g/L增加到(7.90±0.19)g/L。     

灰树花菌丝体糖肽GFPSlb体内抗肿瘤作用的研究

采用移植型小鼠黑色素瘤B16模型进行试验,研究灰树花菌丝体糖肽GFPS1b的体内抗肿瘤作用.结果表明,灰树花菌丝体糖肽GFPS1b对移植型小鼠黑色素瘤B16有显著的抑制作用,抑瘤率在30%以上;样品作用组瘤体积生长速率比阴性对照组慢,且瘤体积小;同时能延长荷瘤小鼠的存活期;HE染色结果表明,GFPS1b中、高剂量组能使B16肿瘤细胞呈团索状实性排列或弥漫性分布,并有肿瘤细胞大片坏死,坏死区周围可见凋亡细胞;免疫组化技术进一步显示,GFPS1b能诱导瘤组织中Bax基因蛋白表达,同时也能显著下调Bcl-2蛋白的表达.研究表明,GFPS1b对小鼠移植性肿瘤有显著的抑瘤作用.     

碳氮源对Bacillus pumilus K9产角蛋白酶的影响

对Bacillus pumilus K9以羊毛粉为底物产角蛋白酶的培养条件及培养基成分进行了单因素优化和正交试验,其中重点考察了碳氮源对K9产角蛋白酶的影响。实验结果表明,添加适量外加碳氮源比使用羊毛粉为唯一碳氮源更利于K9产角蛋白酶;葡萄糖、蔗糖和无机氮源等对产酶具有抑制作用,而适量的麦芽糖和酵母粉则对产酶具有促进作用。B.pumilus K9最适产酶条件为:麦芽糖15 g/L,酵母粉10 g/L,羊毛粉25 g/L,磷酸氢二钾0.4 g/L,氯化钠0.5 g/L;接种量6%,初始p H值为8.5,装液量为25 m L(250 m L),温度35℃,转速220 r/min,培养时间48 h,上述条件下最高酶活达到1 270 U/m L,较优化前提高了2.54倍。     

黄酒多肽的多级分离纯化及其对小鼠巨噬细胞免疫调节的影响

本研究以黄酒为原料,通过大孔树脂吸附、凝胶色谱等方法多级分离纯化黄酒中活性肽组分,并探究各级分离肽组分对小鼠巨噬细胞RAW264.7免疫调节作用的影响。通过脂多糖LPS(1 μg/mL)刺激RAW264.7细胞建立体外炎症模型,以不同浓度的各级分离纯化的黄酒多肽样品进行干预,对NO释放抑制率最高的黄酒多肽组分进行结构分析。结果表明,可通过大孔树脂初步分离纯化黄酒活性多肽。对3种不同型号大孔树脂的吸附解析性能进行比较,最终选择DA201-C大孔吸附树脂富集黄酒多肽,收集洗脱液旋蒸冻干后获得黄酒多肽SJ组分。采用MTT法检测细胞活力,黄酒多肽SJ作用RAW264.7细胞的安全范围为≤2.5 mg/mL。采用Griess Reagent法检测细胞培养液中一氧化氮(NO)含量,与LPS模型组相比,黄酒多肽SJ浓度为0.3、0.6、1.2、2.5 mg/mL时能明显抑制NO释放(抑制率分别为20.85%、36.42%、68.58%、95.01%)。黄酒多肽SJ经Sephadex G-15凝胶色谱柱分离得到3个组分即G₁、G₂、G₃,分别收集这三组洗脱峰并测定其对RAW264.7细胞NO分泌量的影响。研究发现G₁组分活性高于其他2种组分,G₁、G₂、G₃的NO释放半抑制浓度分别是0.68、0.86、0.75 mg/mL。对G₁组分进行氨基酸组成分析得知其疏水氨基酸占比32.63%,必需氨基酸占比28.46%。研究结果证明黄酒多肽能显著抑制LPS诱导的RAW264.7分泌NO,对LPS刺激的RAW264.7细胞炎症具有保护作用,从而促使巨噬细胞发挥免疫作用。     

灰树花菌丝体糖肽GFPS1b体内抗肿瘤作用的研究

采用移植型小鼠黑色素瘤B16模型进行试验，研究灰树花菌丝体糖肽GFPS1b的体内抗肿瘤作用。结果表明，灰树花菌丝体糖肽GFPS1b对移植型小鼠黑色素瘤B16有显著的抑制作用，抑瘤率在30％以上；样品作用组瘤体积生长速率比阴性对照组慢，且瘤体积小；同时能延长荷瘤小鼠的存活期；HE染色结果表明，GFPS1b中、高剂量组能使B16肿瘤细胞呈团索状实性排列或弥漫性分布，并有肿瘤细胞大片坏死，坏死区周围可见凋亡细胞；免疫组化技术进一步显示，GFPS1b能诱导瘤组织中Bax基因蛋白表达，同时也能显著下调Bcl-2蛋白的表达。研究表明，GFPS1b对小鼠移植性肿瘤有显著的抑瘤作用。     

膜吸收用聚丙烯和聚偏氟乙烯微孔膜的性能评价

以水吸收空气中的氧为例,从膜的微孔性、疏水性、传质效率、膜污染和价格等五个方面对市售国产聚丙烯和聚偏氟乙烯两种微孔中空纤维膜在膜吸收过程中的性能进行了评估,并分析了造成这两种膜性能差异的原因.评价结果表明,聚丙烯微孔膜具有疏水性好、氧传质系数大、抗污染能力强和价格便宜等优良性能,更适宜应用于膜吸收过程.     

由L-精氨酸发酵液制备结晶型精酮合剂

精酮合剂(L-精氨酸-α-酮戊二酸盐,AAKG)是目前国际市场上销量日益增长的一种氨基酸盐类功能制品,通常的产品形式是混合型而非结晶型。实验直接以L-精氨酸(L-Arg)发酵液为原料,通过加入α-酮戊二酸(α-KG)进行络合,制备出结晶型精酮合剂,其主要工艺步骤和控制参数如下:首先对发酵液进行絮凝和过滤,并减压浓缩至L-Arg浓度为1.0 mol/L,再等摩尔加入α-KG进行络合,进一步减压浓缩使AAKG浓度达到1.5mol/L;浓缩液以2℃/h的速率缓慢降温至10℃,恒温结晶24 h,获得粗晶体,并再在同样的条件下进行重结晶。其精酮合剂纯度为99.2%,分子中L-Arg∶α-KG的摩尔比为1∶1.02,产品总收率为62.9%。