全文获取类型
收费全文 | 60篇 |
免费 | 27篇 |
专业分类
电工技术 | 2篇 |
综合类 | 2篇 |
化学工业 | 11篇 |
金属工艺 | 1篇 |
建筑科学 | 2篇 |
矿业工程 | 3篇 |
轻工业 | 37篇 |
水利工程 | 1篇 |
无线电 | 2篇 |
一般工业技术 | 1篇 |
自动化技术 | 25篇 |
出版年
2022年 | 1篇 |
2021年 | 1篇 |
2019年 | 4篇 |
2016年 | 1篇 |
2015年 | 3篇 |
2014年 | 2篇 |
2013年 | 3篇 |
2012年 | 6篇 |
2011年 | 2篇 |
2010年 | 7篇 |
2009年 | 10篇 |
2008年 | 10篇 |
2007年 | 4篇 |
2006年 | 5篇 |
2005年 | 5篇 |
2004年 | 5篇 |
2003年 | 6篇 |
2002年 | 4篇 |
2001年 | 3篇 |
2000年 | 4篇 |
1989年 | 1篇 |
排序方式: 共有87条查询结果,搜索用时 0 毫秒
41.
42.
目的建立中试制备重组人血清白蛋白-干扰素β(Recombinant human serum albumin-interferonβ,rHSA-IFNβ)融合蛋白的纯化工艺及质控方法。方法采用50 L发酵罐诱导表达rHSA-IFNβ融合蛋白,发酵液经超滤浓缩及脱盐后,再经BlueSepharose FF亲和层析、G25凝胶过滤层析和SP Sepharose FF阳离子交换层析纯化。SDS-PAGE(银染法)和HPLC测定融合蛋白纯度,Western blot分析反应原性,质谱法测定相对分子质量,Edman降解法测定N-末端氨基酸序列,等电聚焦电泳法测定等电点,细胞病变抑制法测定rHSA-IFNβ融合蛋白的生物学活性,其余检测项目均按《中国药典》三部(2010版)要求进行。结果纯化的3批融合蛋白纯度可达96%以上,具有人血清白蛋白和人干扰素β的双重反应原性,相对分子质量分别为89 070、89 035和88 669,N-末端氨基酸序列为:NH2-D-A-H-K-S,等电点为6.34,比活性分别为1.9×106、1.5×106和1.1×106IU/mg,其余各项指标均符合要求。结论已成功建立了中试制备rHSA-IFNβ融合蛋白的纯化工艺及质控方法。 相似文献
43.
44.
为了明确能使人脑纳肽(Brain Natriuretic Peptide)保持活性的适用缓冲溶液条件,采用常规离体血管灌流实验,观察人脑纳肽的不同缓冲溶液对家兔离体兔胸主动脉血管片段舒张功能的影响。研究发现,在以柠檬酸/磷酸氢二钠为基质的缓冲液条件下,BNP在10-8~10-5mol/L浓度区间对家兔血管舒张均呈良好的剂量依赖关系,而以醋酸/醋酸钠或磷酸氢二钾/磷酸二氢钾为基质的这两种缓冲液虽有一定的舒张效果,但没有剂量依赖关系。由此表明,在合适的pH条件下(4或5),柠檬酸/磷酸氢二钠缓冲液具有作为改进BNP注射剂处方的潜在价值。 相似文献
45.
46.
高效液相色谱法测定红曲莫纳可林及桔霉素——如何防治色素的干扰 总被引:3,自引:2,他引:3
红曲产品存在的色素对桔霉素和莫纳可林K的高效液相色谱分析有干扰作用 ,并造成色谱柱负担过重。消除色素的副面影响显得尤为重要。采用甲苯 /乙酸乙酯 /甲酸为溶剂萃取固态红曲样品 ,可在萃取较少色素的同时最大程度萃取桔霉素。对于液态发酵的红曲样品 ,采用 2倍于发酵液体积的乙醇萃取桔霉素的方法也优于其他方法。在HPLC分析中 ,用红曲的 3种色素与莫纳可林K(酸型和内酯型 )分别进样或混合后进样 ,发现当流动相中的乙腈浓度较高时 ,内酯型莫纳可林K与黄色素有相当接近的出峰时间。同时 ,紫色素、橙色素与酸型莫纳可林K也有相当接近的出峰时间 ,无法完全分离。如果不预先去除红曲色素 ,也可通过降低流动相中乙腈的比例 ,有效分离色素与莫纳可林K ,以提高分析结果的准确性。 相似文献
47.
以Kcmf1基因NW_003614172.1第629890碱基处定点整合ZsGreen1报告基因的CHO-K1细胞(2C3)为研究材料,采用倒置荧光显微镜和流式细胞仪定量分析ZsGreen1的表达,开展系统的稳定性表达研究。2C3细胞贴壁培养连续传代50代次,100%的细胞可以稳定表达ZsGreen1报告基因。无血清悬浮驯化培养2C3细胞后,细胞表达ZsGreen1的平均荧光强度明显降低;连续悬浮传代培养60代次,表达ZsGreen1的细胞数目显著增多,添加体积分数10%FBS到悬浮培养的细胞池,ZsGreen1阳性细胞比例上升到95%以上。流式细胞术分选细胞池中高、低表达ZsGreen1蛋白的2C3细胞,PCR确认它们均含有ZsGreen1报告基因;Q-PCR发现在高、低表达ZsGreen1蛋白的细胞中,相关的ZsGreen1 mRNA水平有明显的差异。提示CHO-K1细胞Kcmf1基因内非编码区域定点整合外源基因后,不会因细胞分裂和生长而丢失外源表达基因;悬浮驯化需要优化培养基和培育条件,达到构建工程细胞的需求。 相似文献
48.
探索共表达蛋白质折叠辅助因子Ero1、PDI和Bi P对毕赤酵母GS115分泌表达融合蛋白质IFNβ-HSA的影响。将构建的蛋白质折叠辅助因子表达载体p GAP-Ero1、p GAP-PDI、p GAPBi P和空载对照线性化后,电击转化重组毕赤酵母GS115/IFNβ-HSA细胞,用含有400μg/m L zeocin的YPD平板筛选阳性转化子,并采用PCR和Western blot法进一步鉴定。阳性转化子进行摇瓶发酵后,采用SDS-PAGE及Western blot法分析共表达Ero1、PDI和Bi P对IFNβ-HSA表达水平的影响。结果表明,Ero1、PDI和Bi P成功地在胞内过量表达,且不影响宿主细胞的正常生长;共表达Ero1和PDI分别使IFNβ-HSA的表达量提高了80%和90%,而共表达Bi P则对IFNβ-HSA的表达水平无明显影响。 相似文献
49.
50.
针对功能性红曲生产过程中的烘干及辐照两道工序对功能性红曲中Monacolin K含量的影响因素进行了研究.发现烘干温度越高,酸式结构的Monacolin K越多地脱水转化成内酯式结构的Monacolin K,在100℃下烘干15 h,总Monacolin K含量从7 748.01 mg/kg下降到5 663.92mg/kg,下降幅度26.9%左右.烘干时间对Monacolin K的降低及酸式Monacolin K的比例也有明显的影响.功能性红曲产品经钴-60辐照后总Monacolin K含量下降10%以上,酸式结构和内酯式结构的Monacolin K的含量均下降,酸式结构下降的幅度比内酯式结构下降的幅度更大. 相似文献