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根据大肠杆菌的密码子偏好性,优化外切型琼胶酶AgaO的基因并人工全合成,克隆入表达载体质粒pET-30a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),优化表达条件即诱导温度、诱导时间和诱导剂IPTG终浓度,纯化重组蛋白rEAgaO,并分析其酶学性质变化。结果表明,重组酶rEAgaO在16 ℃、IPTG终浓度0.1 mmol/L条件下诱导20 h时表达量最高;95%以上的重组蛋白质为水溶性表达,产量约为1432.7 mg/L,较优化前原始基因的产量提高了10.9倍;重组酶rEAgaO的最适反应温度为45 ℃,在低于40 ℃的温度下预处理2 h后,仍然具有90%以上的残余活性,最适pH为7.0,在pH6.0~10.0不同缓冲体系4 ℃处理2 h仍保留69.5%以上的活性;该酶降解琼脂糖后的最终产物经TLC分析鉴定为新琼二糖。基因密码子优化虽不改变蛋白质氨基酸序列,但可明显提高水溶性重组蛋白质的产率及酶活,对促进相关酶类的生产和应用具有借鉴意义。 相似文献
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用MIKE21水动力模块和物理模型对三里埂汇流段流场进行了模拟。经过试验验证,模拟结果和实测资料吻合较好,说明两个模型的建立是成功的。数学模型对深槽内水流的水力学性质研究表明,深坑处是深槽沿程受水流剪切力、冲击力以及弯道环流最大的区域。深坑被剥蚀和冲刷下来的泥沙通过弯道环流向对岸高滩输运,形成高滩不断淤高,深坑不断冲刷的状况。此外,由物理模型试验对深坑处流态的观察可知,深坑处于水流交汇和分汊不断变化区域,经常出现漩涡、汇流、紊流等不良流态,这些流态提高了水流紊动能量和挟沙能力,为深坑的发展提供了有利条件。三里埂汇流段水动力状况的数学模型和物理模型研究为该河段深坑的整治提供了理论依据。 相似文献
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我国现代化社会的发展使人们的生活水平逐渐提高,在交通出行的过程中,越来越多的人开始选择乘坐飞机到达目的地。因此,民航机场需要面临越来越大的压力,以满足人们的正常出行需求。在机场运行的过程中,需要实现机场服务功能。因此,就需要对其中的弱电系统进行管理及维护,保证人们的正常出行。本文主要通过对民航机场弱电系统进行概述,分析弱电系统管理及维护问题,提出相关的措施提升民航机场弱电系统维护效用。 相似文献
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WSSV-VAP1基因克隆及在毕赤酵母中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
根据WSSV-黏附蛋白(VAP1)基因序列设计了一对引物,在5‘引物和3‘引物中分别引入EcoRI和XbaI酶切位点。经PCR扩增,将VAP1基因克隆至穿梭载体pGAPZαA之GAP启动子下游位点,构建成含α-factor信号肽的重组表达载体,获得的重组质粒pGAPZαA-VAP1经线性化后转入毕赤氏酵母SMD1168菌株,构建成分泌型表达VAP1的酵母工程菌株。SDS-PAGE和Western-blot及结合活性检测分析表明,VAP1基因在该体系中得到成功表达,表达产物与对虾细胞膜具明显的结合活性。 相似文献
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介绍了萜烯催化环氧化反应的最新进展,了解到近年来在萜烯中双键选择性环氧化研究的焦点集中在非均相催化剂的制备上,因此,如果综合考虑各种催化体系存在的优缺点,结合具体条件予以优化和改进,将能获得更为理想的环氧化结果. 相似文献
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为探讨原料蒸煮工艺对酱油生产的影响,用高温短时法连续蒸煮与低盐固态发酵相结合的方法,以种曲蛋白酶活力为指标,通过单因素试验确定原料蒸料温度、蒸料时间、蒸料压力的选择范围,再通过正交试验确定蒸煮最佳工艺条件。并对种曲的蛋白酶活力以及发酵各阶段的酱醅和所得成品中的氨态氮含量进行测定和分析。结果表明,蒸煮温度在115℃、时间为4min、压力为0.15MPa时,种曲中的蛋白酶活力最高,达3545U/g,头油氨氮含量达1.078g/100mL,原料蛋白质利用率达89%。在实际生产中,应用上述优化条件,不但能提高原料利用率和产品质量,还降低了生产成本,提高了经济效益。 相似文献
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韩文君 《电子制作.电脑维护与应用》2015,(12)
重载车辆行动部分螺纹拆装车可以为修理作业提供“高效、省力、精准”的螺纹拆装设备,其中双轴变距螺纹旋扭机构是实现拆装车功能的核心机构,由于该机构具有“双向双轴、双轴变矩、平面位移、外力平衡”的特点,使得行动部分螺纹拆装车具有使用价值。 相似文献
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计量技术作为科技进步发展的一个重要分支,始终站在当代科技前沿,计量技术的发展也融入当代最新的科技成果,发生着日新月异的变化。本文从计算机技术在计量技术应用的角度,探讨研究了计量技术的发展趋势及对计量工作的作用和影响。 相似文献
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在无线传感网络室内定位中,节点的发射功率不同会降低基于对数-正态模型的定位算法的定位精度。针对这一问题,基于真实室内环境下RSSI值的变化,提出了一种基于不同发射功率的室内定位优化算法。该算法通过确定最小动态区域,对RSSI测距方法进行优化,降低不同发射功率带来影响。仿真和实验结果证明,提出的新算法在参与定位的信标节点发射功率不一致的情况下,达到了信标节点发射功率一致情况下的定位精度。 相似文献