应用DNA条形码技术鉴定烤鱼片、鱼干中河鲀鱼鱼种

应用DNA条形码技术对北京和厦门市市售烤鱼片、鱼干中河鲀鱼成分进行鉴定。方法 以烤鱼片、鱼干中提取基因组DNA为模板,利用针对河鲀鱼细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因的特异性引物进行PCR扩增,将扩增产物克隆并测定线粒体COⅠ基因序列。将测序结果与GenBank中已有河鲀鱼的DNA序列进行BLAST比对,并且构建分子进化树。结果 本研究27份样品中有15份能扩增出特异性条带。通过BLAST比对和进化树分析,将15份样品归属到不同的河鲀鱼鱼种中。结论 北京和厦门市市售烤鱼片和鱼干中存在混入河鲀鱼的现象,应加强监管和规范产品的加工程序以避免中毒事件发生。     

抗微囊藻毒素单克隆抗体的研制

为研制抗微囊藻毒素(Microcystins,简称MC)的特异性单克隆抗体,用MC-KLH偶联物免疫6～8周龄雌性BalB/c小鼠,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,经过3～4次亚克隆建立稳定分泌抗MC的杂交瘤细胞株。将杂交瘤细胞注射入BalB/c小鼠腹腔,生产出抗MC的单克隆抗体。得到了抗微囊藻毒素单克隆抗体细胞株,命名为G5,抗体亚类为IgG2a,亲和力常数2.9×10-11mol/L,分子量150KD,加标回收率在81.5%～125.0%之间,与其他结构类似物的交叉反应率<1%。筛选出的抗微囊藻毒素单克隆抗体具有较好的特异性。     

2017年我国沙门菌定性检验及血清学分型质量控制考核结果研判

目的 评估我国食品安全风险监测体系各检验机构(简称检验机构)食源性沙门菌的定性检测能力,并全面了解各级检验机构实验室沙门菌血清学分型能力概况,确保沙门菌检验结果准确可靠,提升监测质量。方法 批量制备菌球样品(含6种我国常见血清型沙门菌和阴性对照)和样品基质,经稳定性等测试后发放至435家检验机构进行考核,使用点分数法对上报结果进行评价,Pearson卡方检验进行率的比较。结果 431家检验机构上报检验结果,初测所有指标完全正确率为72.6%(313/431),总体满意率为92.6%(399/431),结果不满意的主要类别为阴性样品假阳性(7.4%,32/431),区县级检验机构满意率(80.0%,52/65)低于省级(100.0%,32/32)和地市级(94.3%,315/334)。血清学分型考核完全正确比例为80.7%(348/431),不同级别检验机构间血清群正确率差异无统计学意义(P＞0.05),但地市级检验机构血清型正确率低于省级甚至区县级。结论 本次考核提示各级检验机构的沙门菌定性检验能力基本能够满足监测任务需求,但部分实验室仍需要加强质量控制以提升沙门菌检验水平,省级以下实验室血清型鉴定水平仍需进一步提高,本次质量控制考核为开展针对性的监测培训提供了数据支持。     

B型婴儿肉毒中毒的实验室诊断

目的对1例疑似肉毒毒素中毒的婴儿病例灌肠液样品进行实验室检测并确证。方法对患儿的灌肠液样品进行肉毒梭状芽胞杆菌分离及肉毒毒素检测。结果患儿灌肠液样品TPGY培养物腹腔注射小鼠后可致小鼠出现类似肉毒毒素中毒表现(竖毛、呼吸困难并出现典型的蜂腰、四肢麻痹)继而死亡。培养物经胰酶处理后小鼠仍出现中毒并死亡,但培养物经100℃加热处理后再次染毒动物,小鼠不出现中毒和死亡。A、B、C、D、E、F六种混合型肉毒毒素诊断血清及B型单价肉毒毒素诊断血清可对小鼠起到保护作用。患儿灌肠液样品中分离到梭状芽胞杆菌,该菌经表型、生化、PCR肉毒毒素产毒基因鉴定,结果为产B型肉毒毒素的肉毒梭状芽胞杆菌。结论患儿疾病与B型肉毒毒素中毒相关。     

北京市市售牡蛎中诺如病毒核酸检测及定量分析

目的针对北京市市售牡蛎样品中诺如病毒污染水平及污染浓度进行定量分析研究。方法分离牡蛎消化腺,将消化腺匀浆处理,加入含有蛋白酶K的磷酸盐缓冲液,进行样品前处理,用试剂盒提取病毒RNA,用一步法实时荧光逆转录聚合酶链式反应(real time RT-PCR)检测诺如病毒RNA,并对阳性样品进行定量分析。结果共检测牡蛎样品356份,其中GGI阳性样品12份,GGII阳性样品39份,GGI和GGII同时为阳性的样品6份。对阳性样品中的诺如病毒核酸定量分析,核酸浓度在3.7×10~3~2.8×10~5基因拷贝/g(消化腺)之间。结论北京市市售牡蛎中存在诺如病毒污染的情况,需要加强对牡蛎中诺如病毒的污染监测,并开展污染水平风险评估,保障消费者食用安全,降低由诺如病毒引起的腹泻病的疾病负担。     

山东地区饲料原料真菌污染状况调查

目的调查山东地区饲料原料真菌污染状况。方法从山东地区代表性饲料生产企业采集豆粕、棉籽粕、麦麸、可溶性干酒糟(distillers dried grains with soluble,DDGS)和玉米粉5种饲料原料样品,密封送至实验室采用平板稀释法接种分离,并对不同样品的真菌进行鉴定。结果 5种饲料原料的真菌检出率分别为豆粕(76.19%)、棉籽粕(68.75%)、麦麸(85.71%)、DDGS(21.62%)和玉米粉(100%)。玉米粉带菌量最高,达4.75×105 cfu/g;豆粕带菌量最低,均小于103 cfu/g。污染真菌种类多样,共检出曲霉属8种、镰刀菌属3种、青霉属7种、其他真菌19种,其中以黄曲霉、串珠镰刀菌和串珠镰刀菌胶孢变种最为常见。结论山东地区饲料原料受真菌污染较普遍,不同种类饲料原料受真菌污染水平不同。污染的黄曲霉和镰刀菌可能含产毒菌株,值得关注。     

乙醇对小鼠免疫系统影响的研究

为给评价声称具有提高免疫的能力的含乙醇保健食品提供依据 ,观察不同剂量乙醇对小鼠免疫系统的影响。采用 17～ 2 0g的雄性BalB c小鼠 90只 ,随机分为 6组 ,每组 15只 ,分别以 0、0 6 7、1 33、3 33、6 0 8、8 0 0g kgBW 乙醇每天一次灌胃给予 ,灌胃量为 2 0mL kgBW,连续灌胃 30d后 ,分别测定细胞免疫、体液免疫、单核巨噬细胞及NK细胞活性等 7项指标。结果表明 :(1)乙醇可以导致小鼠的免疫系统损伤。 (2 ) 8 0 0g kgBW(5 0 % )剂量组在一次灌胃后 2 0min内全部进入昏睡状态 ,2 4h内全部死亡。 (3) 6 0 8g kgBW(38% )组小鼠死亡率为 82 2 %。存活小鼠碳粒廓清能力低下 ,至 30d时仍未恢复。 (4 ) 1 33g kgBW(8% )组腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力 (吞噬率 )降低 ,但对鸡红细胞吞噬指数无显著性影响。 (5 ) 0 6 7g kgBW(4 % )组NK细胞活性降低。 (6 ) 3 33g kgBW(2 0 % )组小鼠的 7项免疫指标均无显著性影响。 (7)以酒精为载体的保健食品在进行免疫调节作用评价实验时 ,小鼠灌胃液中酒精的浓度不宜超过 2 0 %。     

离子色谱测定高氯盐污水中微量硫酸根

通过优化实验条件,建立了离子色谱梯度洗脱测定高氯盐污水中微量硫酸根的方法。该方法有效避免了高浓度氯离子的干扰,具有操作简便,快捷,线性范围广,灵敏度高等特点。有效的避免了高氯盐对硫酸根测定的影响,加标回收率在97.5%～105.1%之间,相对标准偏差为0.46%,是测定高氯盐中微量硫酸根的有效方法。     

参类保健食品中人参皂甙含量与小鼠免疫功能关系的初步探讨

为研究参类保健食品中人参皂甙含量与小鼠免疫功能的关系 ,对 2 4个参类保健食品按照《保健食品功能学评价程序和检验方法》进行了迟发型变态反应、脾溶血空斑实验、碳粒廓清实验。结果表明 :2 4个参类产品中出现免疫效应实验的敏感顺序为迟发型变态反应 (70 8% )、小鼠脾细胞溶血空斑实验 (5 0 0 % )、碳粒廓清实验 (33 3% ) ;三项实验中 ,至少一项阳性的产品占 95 8% ,至少两项阳性的产品占 5 0 0 % ;人参皂甙量每日少于 10mg 6 0kgBW的 ,小鼠脾细胞溶血空斑数实验很少出现免疫调节效应 ;每日人参皂甙量为 2 0mg 6 0kgBW以上的产品 ,其迟发型变态反应效应明显增加 ;不同剂量的人参皂甙对正常小鼠碳粒廓清功能的影响不明显 ;人参皂甙量为每日 2 0mg 6 0kgBW以上的参类产品 ,5 7 1% (8 14)免疫调节功能增加 ;但值得注意的是 4 1 7% (10 2 4 )的参类产品中人参皂甙量少于每日 2 0mg 6 0kgBW。按现行的评判标准 ,这 2 4种参类产品 ,仅有5 0 0 %符合卫生部保健食品免疫调节功能的要求 ;如果有一项实验阳性即判定为产品具有免疫增强或免疫调节作用 ,则与文献报道的参类产品都具有免疫调节功能相一致