Trypsin-/Chymotrypsin-Inhibitoren in Samen der Puffbohne (Vicia faba)

Zusammenfassung Durch isoelektrisches Fokussieren wurden mehrere Trypsin/Chymotrypsin-Inhibitoren in Samen vonVicia faba nachgewiesen, deren isoelektrische Punkte bei pH 8,5 (Hauptpeak mit Schulter) und bei pH 9,1 (Nebenpeak mit Schulter) sowie im Bereich von pH 9,1-6,4 (Nebenpeaks mit deutlich geringeren Aktivitäten) liegen. Aus einem durch Affinitätschromatographie an trägergebundenem Trypsin erhaltenen Inhibitorgemisch wurden drei Inhibitoren durch preparative Elektrophorese in Polyacrylamidgel isoliert, die sich bei pH 9,2 und bei pH 4,0 als elektrophoretisch einheitlich erwiesen. Die Molekulargewichte liegen bei 6000 Dalton. Der Anteil an basischen Aminosäuren ist hoch, während Methionin und Isoleucin fehlen. Die Hemmwirkung ist spezifisch auf Serinproteinasen gerichtet: Neben Trypsin und Chymotrypsin werden einige mikrobielle Enzyme dieser Gruppe gehemmt. Die thermische Stabilität ist relativ groß. Die Inhibitoren ausVicia unterscheiden sich damit in einer Reihe von Eigenschaften deutlich von den Inhibitoren ausPhaseolus.

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Inhibitors for trypsin and chymotrypsin in seeds of the broad bean (Vicia faba)

Summary Several inhibitors for trypsin and chymotrypsin were detected in seeds ofVicia faba by isoelectric focussing. Their isoelectric points are at pH 8.5 (main peak with shoulder), at pH 9.1 (minor peak with shoulder) and in the range of pH 9.1-6.4 (several minor peaks with significant lower activities). From the mixture of inhibitors obtained by affinity chromatography on carrier bound trypsin, three inhibitors were isolated by preparative electrophoresis in polyacrylamide gel. On electrophoresis these inhibitors behaved uniformly at pH 9.2 and at pH 4.0. Their molecular weights are about 6000 daltons. The amount of basic amino acids is high, while methionine and isoleucine are absent. Besides of trypsin and chymotrypsin some serine proteinases of microbial origin are inhibited. The thermal stability is quite high. TheVicia inhibitors therefore differ significantly from thePhaseolus inhibitors in several properties.

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Der AIF und dern Forschungskreis der Ernährungsindustrie danken wir für die finanzielle Unterstützung     

Beitrag zur Nahrungsuntersuchung des Wolfes (Canis lupus L.)

Zusammenfassung Nach der Analyse von 35 Kotproben wird ein Beitrag zur Ernährung des Wolfes in Polen geliefert. Eine eigene Einteilung der ausgewählten Komponenten ist dabei zugrunde gelegt. Die Ergebnisse werden in den Tabellen 1 bis 4 dargestellt. Den höchsten Prozentanteil hat als Beutetier das Rehwild. In der Diskussion wird an Hand des Vergleiches in Tab. 5 Übereinstimmung zu den amerikanisch-kanadischen Untersuchungen aufgezeigt, deren Autoren dieselbe Methode verwandten.

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Summmary Following the analysis of 35 samples of droppings, this paper contributes to the knowledge of the diet of the wolf in Poland. The diet issclassified on the components of the droppings, and the results are represented in Tables 1 to 4. The roe deer forms the highest percentage of the prey. On the basis of the comparison made in Table 5, the discussion comes to the same conclusions as American and Canadian studies, whose authors used the same methods.

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Résumé Une analyse de 35 échantillons de matières fécales permet une meilleure connaissance de l'alimentation du Loup en Pologne. Pour le dépouillement de cette analyse, il est fait appel à un mode de présentation particulier des composants choisis. Les résultats figurent aux Tableaux 1 à 4. Parmi les proies du Loup, le Chevreuil constitue l'espèce la mieux représentée. Dans la discussion, on se réfère au Tableau 5 pour relever les similitudes de ces résultats avec ceux de recherches américaines et canadiennes pour lesquelles les auteurs ont fait usage de la même méthode.

     

Mikromethode zur quantitativen Bestimmung von Coffein

Zusammenfassung Zur quantitativen Bestimmung von Coffein in biologischem Material wird ein kombiniertes Verfahren aus Dünnschichtchromatographie und Densitometrie beschrieben. Das Verfahren läßt Bestimmungen im Nanogramm-Bereich zu. Das Probenvolumen liegt unter 100 l.Die Proben — Capillarblut — werden zunächst mit dem gleichen Volumen Chloroform extrahiert. Anschließend wird das Coffein mittels Dünnschichtchromatographie von Begleitstoffen und störenden Substanzen abgetrennt. Es werden Kieselgel-60-Fertigplatten und Chlorofom/Aceton (9 + 1; v/v) als Fließmittel verwendet, dabei beträgt die Laufzeit 30 min.Die quantitative densitometrische Auswertung erfolgt durch Remissionsmessung bei 273 nm. Im Bereich von 10–60 ng Coffein/Fleck verläuft die Eichkurve linear. 1 mg/I Coffein kann noch sicher quantitativ erfaßt werden. Die Nachweisgrenze liegt bei 0,1 mg/1.

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A quantitative micromethod for the caffeine determination

Summary A combined procedure with thin-layer-chromatography and densitometry is described for the quantitative estimation of caffeine in biological material. This method ist applicable in the nanogram range. Test samples of less than 100 l may be used. The samples (capillary-blood) are extracted with the same volume of chloroform. Caffeine is separated from interfering compounds by thin-layer-chromatography. Commercial silica-60-plates with chloroform/acetone (9 + 1; v/v) as solvent are used. The running time is about 30 min. The quantitative densitometric determinations are performed in the remission mode at 273 nm. In the range from 10 to 60 ng/spot the calibration curve is linear. Accurate quantitative data will be obtained even at concentrations of 1 mg/1 caffeine. The detection limit is at about 0.1 mg/1.

     

Gaschromatographische Bestimmung der h?heren Ester in Weindestillat, Weinbrand, Branntwein und Wein. II

Zusammenfassung Auf Grund der Beobachtung, daß freie Fettsäuren die Bestimmung höherer Äthylester \ bei gaschromatographischer Trennung an Carbowax 20 M stören können, wurden Reihenversuche zur Eliminierung dieser Störpartner durchgeführt. Dabei erwies sich Natriumhydrogencarbonat günstiger als Natriumcarbonat. Eine geeignete Methode zur Bestimmung der gradkettigen Äthylester der Capron- bis Stearinsäure, die auch für die Äthylester von ungesättigten C₁₆- und C₁₈-Säuren verwendet werden kann, wird angegeben.

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Determination of the ethyl esters of long chain fatty acids in wine distillate, brandy, and wine. II

Summary Free fatty acids are able to interfere the determination of the ethyl esters by gas chromatography on Carbowax 20 M. Therefore series of tests were made to remove the fatty acids. Sodium hydrogen carbonate was found to be more suitable than sodium carbonate. A method is described to determine the ethyl esters of fatty acids of caproic to stearic acid and of the unsaturated fatty acids with 16 and 18 carbon atoms.

     

Multiple forms of soluble monophenol, dihydroxyphenylalamine: oxygen-oxidoreductase (EC 1.14.18.1) from potato tubers (Solanum tuberosum). II. Partial characterization of the enzyme forms with different molecular weights.

Gel chromatography on Sephadex G-200 was used to separate a soluble phenoloxidase from potatoes (var. Maritta) into at least six active fractions with dopa (dihydroxyphenylalanine) as substrate. Only high-molecular-weight-enzyme forms exhibited monophenoloxidase activity. Re-chromatography of the highest-molecular-weight form gave the same molecular weight distribution as with the crude enzyme. The molecular weights indicate association phenomena of subunits with a molecular weight of about 36000 daltons. According to polyacrylamide-gel electrophoresis, several monomeric forms with differnt isoelectric points seem to be present. This suggests that the large number of multiple forms of the enzyme arises from various combinations of identical and/or different subunits. SDS polyacrylamide gel electrophoresis failed to show the monomeric forms; the dimer and higher oligomers were obtained.