新型脂肪酶基因的克隆与表达

目的 通过同源比对筛选黑曲霉中新型活性脂肪酶.方法 抽提黑曲霉基因组,依据从烟曲霉中获得的高活性脂肪酶基因序列,NCBI网站序列比对后搜索到与烟曲霉af1-1同源性较高的黑曲霉脂肪酶基因序列an1-1,设计引物进行PCR扩增,产物胶回收后连接至PMD 18T载体,测序验证正确后将目的序列连接至表达载体PET28a,转化Escherichia coli BL21 (DE3)中表达和测定活性.结果 克隆了一种来源于黑曲霉新型脂肪酶基因an1-1,15℃表达条件下主要为可溶性表达,对C4底物(对硝基苯酚丁酸酯)活性达2365 U/L.结论 同源序列比对能有效提高筛选效率,并从黑曲霉中筛选到一种新的脂肪酶基因,在大肠杆菌中可高表达并具有生物学活性.     

对虾抗菌肽PEN-3和PEN-4嵌合基因在大肠杆菌中的表达及抗菌活性测定

目的表达融合2种具有对虾抗菌肽活性的新型抗菌肽。方法利用overlap-PCR连接并扩增对虾抗菌肽Penaeidin-3和Penaeidin-4的嵌合基因序列,定向插入原核表达载体pET-28a(+)中,构建此嵌合基因的表达质粒。将表达质粒转化至E.coliBL21(DE3),经终浓度1.0mmol/LIPTG分别在37℃和15℃诱导表达4h和14h,SDS-PAGE分析嵌合蛋白质的表达,用抑菌圈法测定产物的抑菌活性。结果获得了含有Penaeidin-3和Penaeidin-4嵌合基因的表达质粒;18%SDS-PAGE电泳显示,大肠杆菌中表达的嵌合蛋白质相对分子质量约14.7×103,主要以包涵体形式存在,包涵体15℃的表达量高于37℃的表达量;包涵体复性后,对枯草杆菌和溶藻弧菌具有明显的抑菌活性。结论实现了2种对虾抗菌肽嵌合基因在大肠杆菌中的表达。     

感官评价原理及其在肉质评价中的应用

随着人民生活水平的提高,人们对肉品的品质要求越来越高。感官评价作为一种新近发展起来的肉质评价方法,既有其优点,也存在一些不足。本文介绍了感官评价的原理、主要方法,重点介绍了感官评价在肉质评价中的应用,指出了未来发展的方向。     

环锭细纱机上纱条张力分析与应用

为了稳定纱条张力,提高成纱质量,降低纺纱断头,分析了细纱机加捻卷绕过程中纱条张力的分布规律,纱条张力与基本卷绕工艺的关系,重点阐述了纺纱张力曲线的变化,纱条张力测试方法、设备、一落纱中典型位置纺纱张力测定示例,及其在细纱变速上的应用。指出:①卷绕过程中纱条张力分布一般规律为TW>T0>TR>TS;②纱条张力与基本卷绕工艺的关系是TR与锭子速度平方(ns2)、钢丝圈重力Gt、钢领半径R(直径DR)成正比;③纺纱张力不是恒值,而是一个不断波动的变量,张力波动和张力脉动是管纱卷装型式客观条件决定的;④由高速摄影记录曲线发现,当纱条转到机台正前方、脱开导纱钩孔眼而悬空时,Tsmax=T0,即在纺纱张力测试时,同时也可测得气圈顶端张力;⑤细纱机上变频调速装置可降低毛羽,调节范围广且节电,纺纱效益好。     

A^2／O及其组合工艺在制糖废水处理中的研究动态

制糖工业废水的生物处理是一项复杂的工艺系统。制糖废水分高、中、低三种不同浓度,成分复杂,色度较深,而A^2／O工艺相比厌氧或好氧法处理制糖废水,具有水力停留时间短,还能够同时满足制糖废水脱氮除磷的要求,且A^2／O与其它工艺的组合在制糖废水处理中效果十分显著。本文对这一研究领域的工艺、控制参数和相关研究做了综述。     

一种新型凋亡素融合蛋白的克隆表达及活性测定

目的克隆表达EC-SOD3-凋亡素融合蛋白,并检测其生物活性。方法PCR扩增出apoptin序列,与表达载体EC-SOD3-pET-28a连接后在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导,表达产物进行Ni2+-NTA纯化和MTT活性检测。结果表达载体pET-28a-EC-SOD3-apoptin经酶切鉴定和序列分析,证明质粒构建正确,转化E.coliBL21(DE3)后,重组蛋白获得表达,Ni2+-NTA纯化后的凋亡素融合蛋白纯度达到85%以上,经噻唑蓝(MTT)法测定具有活性。结论成功构建了表达载体pET-28a-EC-SOD3-apoptin,并在大肠杆菌中表达了EC-SOD3-凋亡素融合蛋白,纯化的蛋白质具有诱导HeLa细胞凋亡的能力。     

基于基准管理理论的公园绿地评估指标体系建构 ——以济南旧城区为例

城市公园绿地对促进新型城镇化发展以及居民健康和福祉具有重要意义,客观评估公园绿地能够有效促进公园绿地资源的分配.但是现有公园绿地评估标准尚不完善,影响了公园绿地管控的实际效用.基于此,尝试引入基准管理理论构建公园绿地评估指标体系,旨在通过对比有益经验来重新审视指标界定、数值衡量等存在的问题.通过济南旧城区实证研究表明,...     

配电网供电可靠性的提升策略

电力是国家的重点工程,是社会发展的必要前提,我国在经济发展的过程中大力发展电力,如建设三峡大坝水力发电站.配电网在电力系统工作的过程中有非常重要的作用,并在工作过程中占主导地位,是电力系统高质量工作的基础保障.在实际工作中,电力系统中配电网供电的可靠性受到了极大的关注.要有效解决供电可靠性的问题,就需要工作人员根据实际...     

黏弹性边界在某重力坝动力计算中的应用

采用APDL语言编写了黏弹性边界,在ANSYS中实现了重力坝考虑黏弹性边界的动力计算。选取安哥拉某水电站重力坝标准坝段,地震荷载激振方向按水平方向输入,用谱分析法分别采取刚性约束边界和黏弹性边界对某重力坝进行模态和动力计算。研究坝体在不同边界条件下的响应,并对结果进行对比分析。计算结果表明,采用有质量地基模型并赋予黏弹性边界比无质量地基刚性约束边界假设更贴近工程实际情况,自振频率更低,加速度分布更合理且坝顶加速度放大系数较小。     

重组超氧化物歧化酶1/3杂合酶在大肠杆菌中表达的优化

目的获取活性高的重组SOD 1/3杂合酶。方法用含pET-SOD 1/3的工程菌诱导表达重组SOD 1/3杂合酶,通过分析SDS-PAGE及SOD酶活性,考察诱导温度、诱导时间、诱导剂浓度、Cu 2+、Zn 2+浓度对重组酶表达量和活性的影响。结果正交试验表明,用1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在A600=1.2时诱导,Cu2+、Zn2+浓度分别为2.4 mmol/L,诱导温度15℃,诱导时间12 h,能获得高活性重组SOD 1/3,其比活性为1681U/mg。结论培养温度和Cu2+、Zn2+浓度是优化表达的最主要因素。降低诱导温度有利于重组酶的可溶性表达,添加Cu2+、Zn2+能促进重组酶活性提高。