副溶血性弧菌ERIC-PCR分型及毒力基因检测研究

目的:建立副溶血性弧菌ERIC-PCR分子分型技术,分析副溶血性弧菌标准菌株及分离株基因组DNA ERIC-PCR指纹图谱,并对副溶血性弧菌毒力基因进行检测,以了解不同来源副溶血性弧菌毒力基因携带情况.方法:提取副溶血性弧菌基因组DNA,以肠杆菌基因间共有重复序列(ERIC)为引物进行PCR扩增,PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后用凝胶成像分析仪对图谱进行观察分析,并以相似性系数构建聚类图;通过PCR方法对直接耐热溶血素(TDH)和耐热直接相关溶血素(TRH)进行检测.结果:26株副溶血性弧菌均可扩增产生可重复的DNA指纹图谱,ERIC-PCR可将26株菌分为12个型,分辨力指数为0.926;只在临床分离株中检测到TDH基因,而除一株标准菌株外,所有菌株都未检测到TRH基因.结论:研究显示ERIC-PCR可从分子水平对副溶血性弧菌基因组DNA进行快速指纹图谱分析,同时结合毒力基因检测,能够为副溶血性弧菌食物中毒疾病的预防和流行病学调查提供科学依据.     

谈高校学生的计算机信息安全法规教育

谈高校学生的计算机信息安全法规教育陈洪友（重庆工业管理学院计算机中心）普及一般的法律常识教育在我国已多次进行。对提高全体公民的法律知识和法制意识起了极大的推动作用。但是，对于有一定行业针对性的专用法律法规的普及教育相对较薄弱或不尽如人意。如计算机信息...     

利用全基因组序列优化气单胞菌脉冲场凝胶电泳分型方法

目的对气单胞菌脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型方法从限制性内切酶的选择和电泳条件设置上进行优化,减少片段共迁移,使片段在电泳中分布均匀且利于分析。方法利用6个种的气单胞菌的全基因组数据,通过BioEdit软件对基因组序列进行677种酶的限制性片段分析,选择产生片段数量适宜的、有效片段比例高的酶作为备选酶。对片段长度取以10为底的对数作为自变量,以片段在泳道中的相对迁移距离作为应变量,计算片段长度-相对位置拟合公式,并模拟备选酶的电泳效果图。利用气单胞菌分离株对备选酶进行试验验证,确定PFGE分型方法,并用其对腹泻分离株进行分型应用。结果经Bio Edit分析,根据片段数量及有效片段比例,PmeⅠ、PacⅠ、SwaⅠ比XbaⅠ更适合于气单胞菌的分型。从PFGE模拟效果及分离株试验验证看,Pac Ⅰ、PmeⅠ的限制性片段的分布比XbaⅠ和SwaⅠ更均匀,片段重叠更少。最终确定PmeⅠ、PacⅠ分别为气单胞菌PFGE分型的首选酶和次选酶,脉冲场电流转换时间为2.16~63.8 s。16株腹泻分离株PFGE分型辛普森多样性指数为99.17%。结论优化的PFGE方法使用PmeⅠ、PacⅠ作为气单胞菌PFGE分型的限制性内切酶,该方法产生的片段数量与分布都优于XbaⅠ,在腹泻分离株的分型中能获得良好的分辨率。此研究提供的优化程序可用于其他细菌PFGE方法的建立或优化。     

土工膜斜墙防渗体施工技术

在正常情况下，堤防要解除漫溢的危胁，堤顶必须达到有关规范规定的设计高程。堤顶加高，堤相应也要培厚，我国绝大多数堤防为粘性土均质堤。若无特殊原因，一般多选择与原堤防相同的土料加固堤身，若原筑堤粘性土料短缺，且堤防加高高度大，所需粘性土料方量大，则可选择以土工膜作防渗体斜墙，以砂砾石或砾卵石作支承体。　　堤防加高的断面形式可以选择为土工膜斜墙复式堤型，具体如下：　　一、土工膜斜墙复式堤　　以土工膜斜墙防渗、以砂砾石作支承体的复式加高断面如图所示　　若采用单层PE或PVC膜，厚度约为0.4毫米左右，若采用两布一膜型复合土工膜，膜厚约为0.2～0.3毫米，膜两边的土工织物分别为200克/平方米～250克/平方米，应优先选择复合土工膜，并且优先选用两布一膜型复合土工膜。土工膜可埋置在原堤顶开挖的槽内，槽的形状尺寸见图所示：膜与原堤土应紧密结合，接触渗径应大于承受水头的1/4～1/3。　　复合土工膜也应以单层膜的形式埋置在槽中，否则，带有透水织物的那一面就不能保证应有的接触渗径。土工膜在堤顶应与防浪墙相连接，若不设防浪墙，则可向背水面平铺50厘米作封顶，土工膜上面为保护层。若原堤防土质疏松或土料渗透性大，也可将土工膜...