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食品中3种致病菌的Taqman多重荧光定量PCR检测 总被引:1,自引:0,他引:1
利用实时荧光定量PCR(RTi-PCR)技术探索病原微生物的快速高通量检测方法已是食品微生物学的研究热点之一。首先,通过调整混合培养基的配比摸索食品中金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺氏菌的快速共增菌条件,并选择稳定高效的细菌基因组DNA提取方法,然后根据3种目标致病菌的保守基因分别设计RTi-PCR引物和双标记Taqman探针,分别使用FAM、TAMRA及CY5作为报告基团,对致病菌进行多重RTi-PCR检测,并设计、构建了阳性内参用于检测反应体系。结果表明,方法针对42种已知目标菌株和21种已知菌株组合特异性良好,检测限可达101 cfu/PCR反应,且反应体系各组分间未见交叉干扰。阳性内参Ct值保持稳定,有效地保证了检测的可靠性。对人工污染的食品盲样检测验证了方法的实用性。总之,建立了一种食品中金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺氏菌同时快速检测的多重RTi-PCR方法,为食源性致病菌的检测提供了新的方法学依据。 相似文献
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2010年9月26~28日,由中国材料研究学会主办,日本材料研究学会、台湾材料研究学会协办,中国材料研究学会与青岛市政府联合承办的"第11届国际材联亚洲材料大会(IUMRS-ICA 2010)" 在青岛国际会展中心隆重举行.此次大会围绕新材料领域最新的研究成果和发展动态进行了广泛而深入的探讨,旨在解决目前业界存在的高耗能、高成本等问题,为全球新材料的发展建言献策.大会共设21个分会和一个论坛,内容涵盖能源与环境材料、高性能结构材料、功能和电子材料、纳米与非晶材料、生物医用材料、材料先进制备加工技术以及材料模拟和评价等领域. 相似文献
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沙门氏菌是造成我国食源性疾病的常见细菌之一,也是肉类消费过程中密切监测的重点对象。在2018年~2021年期间,共计采集了南京市545份猪肉源食品样本,利用选择性培养法分离得到44株沙门氏菌,采用血清学方法和分子生物学方法(MLST)对其进行分型鉴定,并分析其耐药性。结果表明,市售样本中共计检出44株沙门氏菌,平均检出率为8.07%,其中内脏样本检出率相对最高(检出率为30.49%);血清型分析表明,检出的菌株中以鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)、罗森氏沙门氏菌(Salmonella rissen)、德尔卑沙门氏菌(Salmonella derby)和伦敦沙门氏菌(Salmonella london)4种血清型沙门氏菌最为常见;基因分型表明,ST19型为猪肉源中优势沙门氏菌株,占比为20.45%;检出的沙门氏菌中,38株菌株对四环素具有明显耐药性,占全部检出菌株的86.36%,而对头孢他啶、头孢噻肟和头孢西丁的耐药不超过10%。此外,对检出的1株多重耐药性沙门氏菌耐药基因分析发现,共筛查出了包括7大类抗生素及与耐药相关的基因。该实验详细分析了南京市场猪肉源食品中沙门氏菌污染状况,也为后期沙门氏菌的综合防治提供了理论依据。 相似文献
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鸭血制品作为市场常见商品,掺假现象十分严重。选取鸡、鸭、鹅基因组中的特异性单拷贝基因为靶基因,设计引物和探针,建立鸡、鸭、鹅血微滴数字PCR定量检测方法。使用人工混合样品对该方法的准确性进行验证,同时通过检测市售样品来验证方法的适用性。实验结果表明,样品含量在1~1000 μg/mg时,靶基因拷贝数与样品质量之间具有良好的线性关系,检测限和定量限分别为5 μg/mg和1 μg/mg。通过人工混合样品和市售样品检测证明,该方法具有良好的准确性和适用性,可用于对鸡、鸭、鹅血制品的定量检测。 相似文献